KỸ THUẬT BẢO QUẢN HOA

BÀI 1: PHA MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY BÀI 2: CẤY BÀI 3: PHA DUNG DỊCH DINH DƯỠNG HOAGLAND BÀI 4: ƯƠM HẠT VỚI DUNG DỊCH HOAGLANDBÀI 1: PHA MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY BÀI 2: CẤY BÀI 3: PHA DUNG DỊCH DINH DƯỠNG HOAGLAND BÀI 4: ƯƠM HẠT VỚI DUNG DỊCH HOAGLAND

KỸ THUẬT BẢO QUẢN HOA

MỤC LỤC

BÀI 1: PHA MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY 1

1 Dụng cụ: 1

2 Chuẩn bị túi môi trường: 1

3 Chuẩn bị hoá chất: 2

4 Pha môi trường: 3

5 Kết quả và nhận xét: 5

BÀI 2: CẤY 6

1 Chuẩn bị hạt: 6

2 Tiền hành cấy: 7

3 Kết quả và nhận xét: 9

BÀI 3: PHA DUNG DỊCH DINH DƯỠNG HOAGLAND 11

1 Dụng cụ: 11

2 Hoá chất: 11

3 Tiến hành: 11

4 Kết quả và nhận xét: 11

BÀI 4: ƯƠM HẠT VỚI DUNG DỊCH HOAGLAND 13

BÀI 1: PHA MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY

1 Dụng cụ:

- Cân điện tử

- Nồi

- Túi nilon

- Máy khuấy từ

- Pipet

- Cốc đong, ống đong

- Nồi hấp

- Bình thuỷ tinh

2 Chuẩn bị túi môi trường:

Kích thước: 20x15 (cm)

Tiến hành: gấp đấy túi, chồng lại với nhau chuẩn bị hấp

3 Chuẩn bị hoá chất:

* Thành phần Đa lượng:

*Thành phần Vi lượng:

*Vitamin:

*NaFe- EDTA

- Đường: 30 g/l = 150 g/5l

- Agar : 8.5 g/l = 42.5 g/5l

4 Pha môi trường:

- Cân hoá chất

- Pha stock 1 đa lương  Stock 2 vi lượng  stock 3 vitamin  NaFe –

EDTA  Đường  Agar

- Sử dụng máy khuấy từ khuấy tan từng chất

- Dùng nước cất và ống đong 1 lít định mức thành 5 lít

- Kiểm tra pH của môi trường nằm trong khoảng 5.8-6 là được

- Rót môi trường sau khi pha vào các bình thuỷ tinh, đậy kỹ miệng bình

- Chuẩn bị 5 bình nước cất hấp cùng với môi trường

- Sau khi hấp xong được chuyển tủ cấy mà để tiến hành rót môi trường vào túi

đựng mối trường hấp

Cân hóa chất Pha môi trường

* Tiến hành rót môi trường

- Mặc áo blue trước khi vào phòng cấy

- Khởi động tủ cấy  lau tủ cấy bằng dung dịch khử trùng

- Di chuyển môi trường, nước cất và túi đựng môi trường sau khi hấp xong vào tủ cấy để tiến hành rót

- Khử trùng tay trước khi thực hiện việc rót môi trường

5 Kết quả và nhận xét:

- Trong quá trình cân hóa chất cần chú ý đảm bảo lượng hóa chất và tránh việc cân nhầm hóa chất

- Túi môi trường khi gấp phải đảm bảo các nếp gấp tránh không bị bung khi

đổ môi trường

- Khi hấp môi trường, nước cất và túi dựng môi trường phải đảm bảo môi trường và nước cất được đậy kín miệng bình, thời gian hấp và nhiệt độ hấp đảm bảo

- Trước khi tiến hành rót môi trường trong tủ cấy phải khỏi động tủ và vệ sinh

tủ bằng dung dịch khử trùng để đảm bảo vô trùng trong quá trình rót môi trường tránh gây nhiểm khuẩn cho môi trường

- Môi trường sau kho rót vào túi phải được ghim lại và đánh dấu

- Trong quá trình rót tránh việc chạm tay vào bên trong túi để tránh gây nhiễm khuẩn cho môi trường

BÀI 2: CẤY

1 Chuẩn bị hạt:

Giống: Đậu nành, đậu đen, chè:

Tiền hành:

- Chọn hạt có chất lượng tốt  Ngâm hạt trong nước Javen trong 10p  rửa sạch bằng nước  Ngâm hạt trong nước cất đã tiệt trùng  chuyển vào tủ cấy

Chọn hạt

Ngâm hạt trong Javen

2 Tiền hành cấy:

* Cách thực hiện:

- Mặc áo blue trước khi vào phòng cấy

- Khởi động tủ cấy  lau tủ cấy bằng dung dịch khử trùng

- Chuẩn bị dụng cụ cấy (kẹp, dao, đĩa, thùng chứa ), khử trùng dụng cụ cấy trước khi cấy

- Khử trùng tay trước khi cấy

- Bắt đầu tiền hành cấy theo hướng dẫn của GV

- Nghi rõ ngày tháng cấy và giống cây

Khử trùng dụng cụ cấy

Xử lý lại hạt giống trước khi tiến hành cấy

Quá trình cấy giống vào môi trường

3 Kết quả và nhận xét:

* Nhận xét:

- Chú ý khử trùng thật kỉ trước khi tiến hành cấy

- Trong quá trình cấy cần khử trùng lại dụng cụng cấy để đảm bảo tránh gây nhiểm khuẩn

- Hạt giống phải được xử lý tốt trước khi cấy nhằm loại bỏ nấm, mốc có thể gây nhiểm bệnh trong quá trình cấy

- Các thao tác cần phải có độ chính xác cao, tránh tiếp xúc trực tiếp với những vật dụng đã khử trùng, miệng túi,

- Trong quá trình cấy không được cho tay hay dụng cụ cấy ra khỏi tủ cấy, nếu

có cần phải khử trùng lại trước khi đưa vào tủ cấy

- Các túi môi trường trước khi đưa vào tủ cấy phải được khử trùng cẩn thận

- Sau khi cấy xong các túi môi trường cần được đánh dấu và sau đó mang tới

* Kết quả:

Sau khi được cấy và nuôi tại phòng nuôi cấy 2 tuần thì tỉ lệ cây phát triển là 70% trong đó tất cả các hạt chè sau khi cấy đều không phát triển chiếm 20% còn lại 10% hạt đậu nành và đậu đen bị nhiễm bệnh và không phát triển

Một số lý do dẫn đến hạt không nảy mầm và nhiễm bệnh là do:

- Chất lượng hạt không tốt

- Hóa chất không chính xác, đinh dưỡng trong môi trường không đều dẫn đến cây phát triển không đều

- Thao tác trong quá trình cấy không đảm vô trùng gây nhiễm trùng đến môi trường và hạt

BÀI 3: PHA DUNG DỊCH DINH DƯỠNG HOAGLAND

1 Dụng cụ:

- Cân

- Pipe

- Máy khuấy từ

- Cốc đông

- Bình định mức

2 Hoá chất:

202

136

505

136

25250

6800

493

80

493

80

24650

4000

5

2.86 1.81 0.22 0.051 0.09 0.12

2.86 1.81 0.22 0.051 0.09 0.12

143 90.5

11 2.55 4.5

6

3 Tiến hành:

- Hoá chất được pha cho từng bình sau đó định mức lên 1 bình 500ml sau đó dán nhãn cho từng bình

- Lấy mỗi bình 10ml sau đó định mức lên 1lit thu được dd dinh dưỡng Hoagland tưới cho cây

4 Kết quả và nhận xét:

- Sau khi pha thu được 5 bình chứa 5 dung dịch như trên dùng cho 50lit nước

- Cần chú ý trong quá trình pha hóa chất tránh nhầm lẫn giữa các bình với nhau

- Kiểm tra pH sau khi pha đạt từ 6.5-7

Dung dịch pha xong được mãng trong phòng đèn led để lưu trữ

BÀI 4: ƯƠM HẠT VỚI DUNG DỊCH HOAGLAND

- Chọn hạt đậu nành và đậu đen có chất lượng tốt mang đi xử lý bằng nước Javen

- Ngâm trong nước Javen 10p sau đó rửa sạch bằng nước máy

- Chuẩn bị đất: sử dụng đất tơi xốp được lấy ngoài trời tại A11

- Sử dụng các hộp nhựa đã đục lổ dưới đáy, cho đất đã được chuẩn bị vào và tiến hành gieo hạt

- Mỗi hộp là 10 hạt (5 đậu đen và 5 đậu nành)

- 4 hộp cho 2 nghiệm thức

a) Theo dõi trong điều kiện tự nhiên: 1 sử dụng dd Hoagland, 1 đối chứng

b) Theo dõi trong phòng nuôi cấy có đèn led: 1 sử dụng dd Hoagland, 1 đối chứng

Theo dõi trong môi trường có đèn led chiếu sáng

* Kết quả và nhận xét:

Sau 1 tuần

Hộp có chứa dd Hoagland hạt bắt đầu nảy mầm, một số hạt bị nhiễm khuẩn

và không nảy mầm

Đối với nghiệm thức được chiếu sáng bằng đèn led

Hộp không chứa dung dịch Hoagland hạt có hiện tượng nảy mầm

Hộp có chứa dung dịch Hoagland hạt bắt đầu nảy mầm, mầm nhú ra khỏi vỏ hạt

Nhận xét:

- Sau 1 tuần tỉ lệ nảy mầm của hạt ở cả hai điều kiện còn rất thấp khoảng 20%

- Sau 2 tuần ở điều kiện hộp sử dụng dinh dưỡng Hoagland phát triển tốt Hộp

- Sau 2 tuần ở điều kiện chiếu sáng bằng đèn led hộp sử dụng dinh dưỡng Hoagland phát triển tốt Hộp không có dung dịch hoagland bắt đầu nảy mầm

- Một số lý do khiến tỉ lệ nảy mầm thấp là:

+ Quá trình xử lý hạt không tốt

+ Hạt để quá lâu nên chất lượng nảy mầm kém

+ Quá trình gieo hạt quá sau làm giảm khả năng nảy mầm của hạt