Kiểm Nghiệm Vi Sinh Thực Phẩm

Môn: Kiểm Nghiệm Vi Sinh Thực Phẩm GVHD: Lê Thị Phượng Linh BÁO CÁO THỰC HÀNH... ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ VI SINH VẬT HIẾU KHÍ BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐẾM KHUẨN LẠC... KIT Định danhcác phản ứng hóa s

Môn: Kiểm Nghiệm Vi Sinh

Thực Phẩm

GVHD: Lê Thị Phượng Linh

BÁO CÁO THỰC HÀNH

Thành viên nhóm 4

1 Nguyễn Ngọc Lan 18125152

2 Nguyễn Ngọc Minh Nguyên 19125225

3 Phan Thị Minh Thoa 19125350

4 Trần Ngọc Nhi 19125248

5 Phan Lê Duy Linh 18125164

NỘI DUNG

Chuẩn bị mẫu Khái quát quy trình thực

I/ Chuẩn bị mẫu

Tên mẫu : Nước Cam đường không đá

Thời gian mua mẫu : 11h 45 ngày 7/10/2020

Thời gian thực hiện : 12h45 ngày 7/10/2020

Vị trí lấy mẫu : Quán nước trên đường Tám Giang trường Đại học Nông Lâm

Môi trường vị trí lấy mẫu : nước cam được vắt trên sạp nhỏ, xung quanh trời mưa, ẩm, dụng cụ vắt

cam và chứa đựng chưa được vệ sinh kĩ lưỡng.

II/ Khái quát quy trình thực hiện:

BÀI 1 ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ VI SINH VẬT HIẾU KHÍ

BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐẾM KHUẨN LẠC

Bài 2 ĐỊNH LƯỢNG TỔNG VSV MEN VÀ MỐC

25 2,5 10

10

X   x

BÀI 3: ĐỊNH LƯỢNG COLIFORM BẰNG PHƯƠNG PHÁP MPN

Bài 4: ĐỊNH TÍNH E coli

KIT Định danh

(các phản ứng hóa sinh)

KẾT QUẢ ĐỊNH DANH VI KHUẨN

Kết luận định danh

• Không xác định được vi sinh vật từ mẫu cô đưa

• Nguyên nhân :

– Thời gian ủ chưa đủ

– Sai thao tác thực hiện

Do mỗi loài vsv có đặc tính sinh hóa khác nhau nên có nhiều kiểm tra thử nghiệm sinh hóa khác nhau giúp xác định tên vsv đó

• Thử nghiệm oxydase

• Phản ứng lên men glucose

• Thử nghiệm khả năng lên men

• Thử nghiệm ONPG

• Thử nghiệm Urease

• Thử nghiệm Citrata

BÀI 5: ĐỊNH TÍNH Salmonella

Môi trường XLD sau khi nuôi cấy phân lập

BÀI 6: KIỂM SOÁT VỆ SINH KHÔNG KHÍ

 Trường hợp 100 l:

Đĩa 1

Số khuẩn lạc đếm được: 23 khuẩn lạc Tra bảng phụ lục ta được: N=24

V= thời gian lấy mẫu * 0,1 t= 0.5

Vậy: Mức độ ô nhiễm không khí = = )

 Trường hợp 100 l:

Đĩa 2

Số khuẩn lạc đếm được: 30 khuẩn lạc Tra bảng phụ lục ta được: N=32

V= thời gian lấy mẫu * 0,1 t= 0.5

Vậy: Mức độ ô nhiễm không khí = = )

Bài 4: ĐỊNH TÍNH E coli Không có E.coli

BÀI 5: ĐỊNH TÍNH Salmonella Nghi ngờ không có Salmonella

BÀI 6: KIỂM SOÁT VỆ SINH KHÔNG

KHÍ Truyền thống : 45,2,11,15,8Máy V100 mL: Đĩa 1: 48 (CFU/m 3 ),

Đĩa 2 : 64 (CFU/m 3 )

BẰNG KIT ĐỊNH DANH Không định danh được

Quy trình ly trích ADN

Chạy phản ứng Real – time PCR (polymarase Chain Reaction)

• Ở 90 độ C: các Nu tách rời nhau thành các mạnh đơn

• Ở 60-65 độ C: cho phép sự gắn kết của các mồi với khuôn DNA

• 72 độ C : tạo điều kiện cho phản ứng trùng hợp được xúc tác bởi enzyme DNA polymerase.

( Chất màu huỳnh quang chèn vào sợi đôi DNA để tạo ra tín hiệu

sau mỗi chu kỳ)

30-40

vòng

lặp lại

Kết quả

Kết quả chứng dương

Kết quả chứng âm

Kết quả Realtime - PCR

Kết quả nhóm 4

Nước Cam

Kết luận phản ứng Real time PCR

• Không có Salmonella có trong mẫu nước cam

của nhóm 4 vì đường biểu thị đi ngang

So sánh kết quả vsv trong mẫu nước cam của nhóm với chỉ tiêu

vi sinh vật của TCVN 5042:1994 đối với nước giải khát không

đóng chai

Định lượng tổng số vi sinh vật hiếu khí

Định lượng tổng số men, mốc

Colifrom Colifrom chịu nhiệt

0 (MPN/ml)

0 (MPN/ml)

Salmonella

Không xuất hiện

Kết luận

• Vậy mẫu nước cam đường của nhóm 4 đã đạt chỉ tiêu cho phép về vi sinh vật có trong nước giải khát không đóng chai

 ( theo TCVN 5042: 1994)