KL tốt nghiệp Hóa môi trường

“NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG DIỆT VI KHUẨN LAM ĐỘC CỦA CAO CHIẾT TỪ CÂY MẦN TƯỚI EUPATORIUMM FOTUNEI TURCZ BẰNG CÁC DUNG MÔI KHÁC NHAU TRONG QUY MÔ PHÒNG THÍ NGHIỆM.” 1.. - Nấm, vi khu

“NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG DIỆT VI KHUẨN LAM ĐỘC CỦA CAO

CHIẾT TỪ CÂY MẦN TƯỚI EUPATORIUMM FOTUNEI TURCZ BẰNG CÁC

DUNG MÔI KHÁC NHAU TRONG QUY MÔ PHÒNG THÍ NGHIỆM.”

1 Tên đề tài

2 Lý do chọn đề tài

 Bùng nổ dân số

 Sản xuất nông nghiệp

 Phát triển công nghiệp

Ô nhiễm dinh dưỡng môi trường nước

Nước nở hoa(Bùng nổ VKL)

Hồ Núi Cốc

Hồ Dầu Tiếng

2 Lý do chọn đề tài

Các hướng nghiên cứu diệt VKL độc

- Hòa loãng, siêu âm, phơi khô bùn cặn,…

- CuSO4; KMnO4; AgNO3; H2O2;…

- Nấm, vi khuẩn, virut,…

- Hợp chất thiên nhiên: rơm rạ, lá bàng, mần tưới,…

=> “NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG DIỆT VI KHUẨN LAM ĐỘC CỦA CAO CHIẾT TỪ

CÂY MẦN TƯỚI EUPATORIUMM FOTUNEI TURCZ BẰNG CÁC DUNG MÔI KHÁC NHAU

TRONG QUY MÔ PHÒNG THÍ NGHIỆM”

2 Mục đích nghiên cứu

 Nghiên cứu ảnh hưởng của dịch chiết cây mần tưới (Eupatorium fortunei Turcz)

trong các dung môi nước, etanol, metanol đến sự sinh trưởng và phát triển của

chủng vi khuẩn lam M.aeruginosa.

 Khảo sát nồng độ tối ưu của các dịch chiết trong việc ức chế vi khuẩn lam

M.aeruginosa.

3 Nhiệm vụ

 Tìm hiểu, nghiên cứu các tài liệu liên quan đến vi khuẩn lam và các phương pháp

ức chế bùng nổ sinh trưởng vi khuẩn lam độc

 Tiến hành làm thực nghiệm đối với dịch chiết mần tưới trong các dung môi nước,

metanol, etanol cùng với dung dịch CuSO4 để tìm ra dung môi và nồng độ có hiệu quả cao nhất

4 Tổng quan

4.1 Tổng quan về VKL

- Không có nhân thực, không có lục lạp

- Có Riboxom 70S, có thành peptidoglycan

- Có sắc tố quang hợp (chlorophyll a, caroten β,…)

- Quang hợp trong Thylakoid

4 Tổng quan

- Gây tổn thương tế bào gan

- Tiêu chảy, nôn mửa, sởn gai ốc, tử vong

- LD50 = 36-122 μg/kg; LCT50 = 180mg/min/m3

- Nồng độ cho phép: 1μg/L nước (1998)

CTCT độc tố microcystin-LR

4.1 Tổng quan về VKL

4 Tổng quan

4.1 Tổng quan về cây Mần tưới Eupatorium fortunei Turcz

- Mần tưới vị đắng, mùi thơm, tính hơi ấm

- Hoạt huyết, tán ứ, sát trùng,…

- Dân gian dùng diệt chấy rận, rệp, đuổi bọ

chó, bọ mạt, dĩn,…

Cây mần tưới

4 Tổng quan

4.1 Tổng quan về cây Mần tưới Eupatorium fortune Turcz

Công thức thí nghiệm Tính theo tổng số tế bào

5 Thực nghiệm

5.1 Đối tượng nghiên cứu

- Chủng M.aeruginosa từ bộ sưu tập của Phòng Thủy sinh học môi trường

- Cây mần tưới thu thập tại các hiệu thuốc bắc tại Hà Nội

5 Thực nghiệm

5.2 Quy trình

B1: Nhân giống và lưu giữ mẫu VKL M.aeruginosa

- Môi trường cân bằng (CB):

- Điều chỉnh pH=9; khử trùng trong nồi hấp tiệt trùng

5 Thực nghiệm

5.2 Quy trình

B2: Thu thập cao chiết mần tưới

- Thu thập mẫu mần tưới, nghiền bột

- Ngâm bột trong các bình 2L với các dung môi khác nhau (nước, etanol, metanol) qua đêm

- Siêu âm 3 lần, lọc hút chân không thu được dịch chiết

- Cô quay chân không thu được cao chiết, đựng cao chiết trong các ống falcon, bảo quản lạnh

5 Thực nghiệm

5.2 Quy trìnhB3: Chuẩn bị các mẫu thí nghiệmNồng độ các chất được tính toán trong bảng

Nồng độ (μg/ml)

V-gốc (ml)(10 mg/ml)

VMT (ml) VVKL (ml) V dung dịch (ml)

Thời gian (ngày)

6 Kết quả

6.1 Đánh giá tác dụng ức chế sinh trưởng vi khuẩn lam M.aeruginosa của dịch chiết nước mần tưới

Ma/ CuSO4 5 0.039

0.03 1 0.034 0.033

Ma/MT-Et-200 0.039

0.03 3 0.057 0.144

Ma/ MT-Et-500 0.039

0.09 5 0.014 0.018

DC

Ma/CuSO

4 5

200

500

Ma/MT-Et-Thời gian (ngày)

6 Kết quả

6.2 Đánh giá tác dụng ức chế sinh trưởng vi khuẩn lam M.aeruginosa của dịch chiết etanol mần tưới

Thời gian (ngày)

6 Kết quả

6.4 Đánh giá tác dụng ức chế sinh trưởng vi khuẩn lam M.aeruginosa của dịch chiết mần tưới trong các

dung môi khác nhau.

Thời gian (ngày)

6 Kết quả

6.4 Đánh giá tác dụng ức chế sinh trưởng vi khuẩn lam M.aeruginosa của dịch chiết mần tưới trong các

dung môi khác nhau.

6 Kết quả

6.4 Đánh giá tác dụng ức chế sinh trưởng vi khuẩn lam M.aeruginosa của dịch chiết mần tưới trong các

dung môi khác nhau.

6 Kết quả

6.5 Đánh giá pH của các mẫu thí nghiệm trong quá trình nuôi cấy.

pH

T1 T10

6 Kết quả

6.6 Đánh giá tác dụng ức chế sinh trưởng vi khuẩn lam M.aeruginosa của chất sạch phân đoạn từ dịch

chiết cây mần tưới.

Thời gian (ngày)

6 Kết quả

6.6 Đánh giá tác dụng ức chế sinh trưởng vi khuẩn lam M.aeruginosa của chất sạch phân đoạn từ dịch

chiết cây mần tưới.

6 Kết quả

6.7 Một số hình ảnh chụp dưới kính hiển vi

Mẫu DC

Mẫu MT-Et-500 + Ma Mẫu MT-Me-500 + Ma

Mẫu MT-W-500 + Ma

7 Kết luận

1. Nghiên cứu tài liệu.

2. Thu thập cao chiết mần tưới

3. Nuôi cấy, lưu giữ mẫu VKL M.aeruginosa trong PTN

4. Dịch chiết nước mần tưới

7 Với cùng nồng độ 500 μg/ml, dịch chiết etanol mần tưới cho hiệu suất ức chế cao nhất.

8 Đánh giá ảnh hưởng của quá trình nuôi cấy đến pH

9 Chất sạch nồng độ 200 μg/ml ức chế VKL mạnh (H=88,71%)