PowerPoint Presentation Phương pháp APE Là phương pháp được phát triển để tăng hiệu suất trích ly polyphenol từ vỏ quả lựu Bản chất của phương pháp này dựa trên định luật Fick Trong đó là gradient nồn.
Trang 1Phương pháp APE
Là phương pháp được phát
triển để tăng hiệu suất
trích ly polyphenol từ vỏ
quả lựu
Bản chất của phương pháp này dựa trên định luật Fick:
Trong đó:
là gradient nồng độ
là trở lực trích ly
J là lượng vật chất chuyển khối
Với phương pháp này, polyphenol được kết tủa bằng Ca2+ trong môi trường kiềm → ảnh hưởng đến gradient nồng độ → thúc đẩy sự thẩm thấu của polyphenol từ trong tế bào vào dung dịch
Trang 2Phương pháp thu nhận polyphenol
Phương pháp APE + Nguyên liệu: Vỏ lựu, dung dịch CaCl2,
dung dịch NaOH, etanol 50%
+ Tiến hành:
• Đưa nguyên liệu vào bể nước khuấy
điện từ, tiến hành khuấy ở 60oC trong
1 giờ với vận tốc 200 vòng/phút
• Sau đó, ly tâm dịch chiết với vận tốc
6000 vòng/phút ở 25oC trong 10 phút
• Lọc kết tủa, hòa tan kết tủa bằng
etanol 50%, điều chỉnh pH về 3-4
bằng dung dịch HCl 1M
Phương pháp SE + Nguyên liệu: Vỏ lựu, etanol 50%
+ Tiến hành:
• Hòa tan 2 (g) vỏ lựu vào 30 (ml) etanol 50%
• Tiến hành khuấy trong bể nước khuấy điện từ trong 1 giờ, ở 60oC với vận tốc 200 vòng/phút
• Tiếp đến, ly tâm để thu lấy kết tủa lần
1, hòa tan kết tủa vào etanol và ly tâm lần 2, lọc thu lấy kết tủa
Trang 3Phương pháp
phân tích hoạt tính
polyphenol
+ Thêm 50 μl dịch thu nhận (đã pha loãng 20 lần) vào ống nghiệm
+ Thêm vào ống nghiệm 0,5 ml FeCl3 0,1 M, 0,5 ml K3Fe(CN)6 0,008 M, 0,5 ml HCl 0,1 M
+ Điều chỉnh thể tích tới 10 ml bằng H2O, đặt ở nơi không có ánh sáng trong 15 phút ở điều kiện nhiệt độ phòng
Tiến hành đo độ hấp thụ ở bước song 695 nm của nước cất làm mẫu trắng
+ Đo độ hấp thụ của mẫu phân tích
+ Xác định hàm lượng polyphenol bằng cách dựa vào đường chuẩn của axit gallic