Phân tích thực phẩm

Trang 25 1.3.5.1 Sai s ng u nhiên Random error 1.3.5.2 Sai s h th ng Systematic error - Trang 42 1.10Dung môi aIso-octane Pentane Cyclohexane Cyclopentane Heptane Hexane 1,1,2-Trichlor

I H C CÔNG NGH TP.HCM

Biên

4

I V

1

1.1 VÀ CÓ 1

1.1.1 M 1

1

1.2 PHA DUNG 4

4

4

4

5

10

1.3 KÊ TRONG PHÂN TÍCH 11

11

11

13

13

14

19

1.4 XÁC THAM CÔNG 19

19

ng 19

20

1.5 QUY TRÌNH PHÂN TÍCH 22

22

22

23

27

TÓM 49

CÂU ÔN 54

57

2.1 XÁC PHÁP 57

57

58

58

58

2.2 XÁC HÀM NITROGEN 59

59

62

2.3 XÁC HÀM LIPID 65

65

65

66

67

67

2.4 XÁC HÀM GLUCID 68

68

68

70

2.4.4 Tính toán 70

TÓM 71

CÂU ÔN 74

BÀI 3: 76

3.1 PHÁP QUANG THU 76

76

77

77

3.1.4 81

3.2 PHÁP KÝ 87

87

87

88

102

TÓM 122

CÂU ÔN 126

BÀI 4: PHÂN TÍCH VI 127

4.1 CÁC PHÁP THU, VÀ 127

127

128

129

4.2 VI SINH SOÁT TRONG VÀ 133

133

134

4.3 PHÁP BÀO VI SINH 136

(haemocytometer) 136

Sulghina - Brid) 139

4.4 PHÁP KH PHÁP 141

141

142

143

143

145

147

148

151

4.5 PHÁP TRÊN MÔI PHÁP N) 154

154

155

4.5 156

156

157

4.6 XÁC BÀO SINH VI SINH 161

161

161

162

4.7 PHÁP MÀNG (MEMBRANE FILTER TECHNIQUE) 163

163

164

165

4.8 MÀNG PETRI (PETRIFILM) 166

166

167

4.8.3 Petrifilm E coli Count Plate (ECCP) 167

TÓM 172

CÂU ÔN 176

G TRONG PHÂN TÍCH VI SINH 179 5.1 PHÁP PHÁT QUANG SINH ATP TRONG GIÁM SÁT SINH 180

180

180

tính toán 181

5.2 PHÁP ELISA PHÁP THU DÙNG ENZYME LIÊN 183

183

184

5.3 PH PHÁP PCR (POLYMERASE CHAIN REACTION) 192

192

192

194

- 199

TÓM 204

CÂU ÔN 207

208 TÀI THAM 209

-

n,

- Ph - phân tích vi sinh

pháp ELISA

PCR

phân tích, Hóa sinh, Vi sinh

-

30%

70%

trong tính toán

1.2.4.4 N ng dung d ch phân t gam

2H+SO4 + 2 Na+OH- 2Na+SO4 + H2O

-

i i tb

1

1.3.2.2 2 (Variance)

i trung bình (Xtb

)1(

)(

1

2 2

n

X x S

n

i

tb i

1.3.2.3 l ch chu n (SD: Standard Deviation)

i

1

)(

1

2

n

X x SD

n

i

tb i

thiên CV (Coefficient of Variation)

tb

X

SD CV

X tb .

n

SD t X M n

SD t

1.3.4 Sai s trong phân tích

i

thu

tb

X S

1.3.5 Phân lo i sai s theo nguyên nhân

1.3.5.1 Sai s ng u nhiên (Random error)

1.3.5.2 Sai s h th ng (Systematic error)

-

-

M X

t tn tb

1.1: Giá

90 % 0,10

95 % 0,05

98 % 0,02

99 % 0,01

1.3.5.4 Sai s thô (Gross error)

2 1

x x

x x

, t

1.4.3 Xây d ng chu n i v i hàm tuy n tính

b a S

1

2

,

0,

a nb

0

n n

i i i

n

i a x x y x

b

2 1

0

1.4

x1 x2

xn

y1 y2

yn

x12x22 xn

x1y1 x2y2 xnyn

1.4.3.2 nh h s

n i

n

i i

y y

y y R

1

2 1

2 2

1

n i

y n

y

11

b ax

2 1

y

2 2

y

2

n

n y y

2 2

n

i

i y y

1

i y y

XA XB

KD = [X]B/[X]A [X]B, [X]A

D

-KD >1) Dung môi dùng diethyl, benzene, chloroform, CCl4, acetone,

p

-

Methyl isobutyl ketone

Methyl t-butyl ether

0,006 (25 0C) 0,01

0,014 0,016 (25 0C) 0,017 (25 0C) 0,018 (25 0C) 0,04

0,05 0,052 (25 0C) 0,11

0,54 0,68 0,81 0,815 1,60 1,7 4,8 5,5 5,95 6,89 7,81 8,5 8,7 17,5 (25 0C) 24,0

a

0

Methyl isoamyl ketone

Methyl t-butyl ether

Methyl isobutyl ketone

0,011 (25 0C) 0,020

0,033 (25 0C) 0,04

0,056 0,08 0,15 0,24 0,31 (25 0C) 1,2

1,26 1,3 1,5 1,9 (25 0C) 3,3

3,3 4,6 8,3 (25 0C) 10,0

16,4 20,07

a

0C)

-

acetamide, N,N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, 1,4-dioxane, ethyl alcohol,

-1.3

Hình 1.4

Không tan Tan

-10 M x 1 l = 4,0 x 10 - 10 mol

KD

Suy ra:

D ) + 1]}

-

-pH 2

1a

1b

Phenol, pKa = 10 Tan tron

Sodium phenolate

naphthalene, và aniline

naphthalene

a= 6,8.10-5

-c

1.7

nh thu

Hình 1.8

làm

d

Hình 1.10

- base

-

D = [X]G/[X]L [X]G, [X]L

e

o

-

Hình 1.13:

3

tb có

n

SD t

n

SD t

X tb .

n

SD t X M n

SD t

4

-

t tn < t lt

t tn > t lt

n SD

M X

2 1

x x

x x

tn max

SD

X X

a nb

0

n n

i i i

n

i a x x y x

b

2 1

0

n i

n

i i

y y

y y R

1

2 1

2 2

1

6 Quy trình phân tích

2.1:

% N trong protein 16,00

15,70 18,76 17,70 18,66 18,12 19,34

6,25 6,38 5,33 5,65 5,36 5,52 5,17

um

14 V x 3

= 1,4.x V g

2NaOH 2Na+ + 2OH- I2 + 2OH- 2I- + H2O + O

2.4.3 Ti n hành

ml NaOH N/10

2SO4 2 phân

V

mol

5.10.20.2

180

1

Ng

1

2 1

1,4.x V g

2 S 2 O 3

và iod N/10

-

-

Hình 3.4

orbitalorbital

orbitalthu

E = Eelectron + E + Equay

Hình 3.5:

3.1.3.2 S phát x c a v t ch t

thu

100 lg(

)

1 lg(

)

T T

I

I A

:

A= b.C -1.cm-1

(a)

(d) (b)

C

O

A

c và Ax

c

c x xA

C A

Cách 4: Cách thêm chu n vào m u

3.2.2 Phân lo i

sau:

Phân lo i theo tr ng thái liên h p c

Phân lo i theo thi t b hình thành s

Amino acid

ethylic, formaldehyde

ethylic, phenol, chloroform

Silicagel, nhóm oxide, titan

hydroxyt (Ca(OH)2, magne oxide (MgO)

b

dung

anionit

chung KR, NaR, CaR2, MgR2

2RNa + CaCl2 R2Ca + 2NaCl

NaOH 5 %, H2O2, alcol ethylic 95

Vi = Vo + KiVs Vi

Vo

Vs

Ki:

4

5

8

9 - 10

gel sau

(ml/gel khô)

Nh i c t

u vào c t

-

-

80 o

Hình 3.13

Có khí trong dung môi

cách pha loãng

ân

o

o dùng dung môi ngâm

khí

3.2.4.10 B ng c t

a

a protein Amino acid

c

amino acid amino acid

Chu n b thu c th

-

% 50

N).6,25 mg

10 (4

%

f X

protein

mN

ml HCl 6 N và 0,1

nitrogen

2 là tác nhân gây desamine hóa oxi hóa

2 oxi hóa

- nitrogen

-

Ph n ng chuy n hóa

K thu t phân tích trên máy s c ký l ng cao áp

- Thêm vào bình 0,5 ml TEA

-

vòng/phút)

o

)()

/()

/()/(

ml

l V ml mol C mol g M l mg

amino acid

amino acid

ký

C A

- Cách 4: Cách thêm chu n vào m u

4.1.3.4 Chu n b m u

5 oo

ng nh t m u

Hình 4.1

- Campylobacter: Campylobacter

- Clostridium perfringens

Clostridium perfringens

- Listeria monocytogenes:

-

coliforms và c coliforms Khi c

e Tính toán

1000 4000

c

b a

x

xab

Forming Units) trong

plate)

1 P

Ngoài ra,

0C)

4.4.2 ng d ng

-2

4.4.5

lông

Hình 4.6(a):

c làm

sau:

i i

1 1

g hay 1 N

Vi

fi

-12,5.102 CFU/g

4.7

4.4.7.5

c

R f V n f

V n

N ml

CFU hay g CFU A

i

i .

) / /

(

1 1

LOÃNG T I H N)

0C cho coliforms, 45 0C cho coliforms phân, Manitol Salt Broth cho

Hình 4.10

4.6.3 Th c hi n k t qu

à

ng

- Petrifilm Aerobic Count Plate,

- Petrifilm Coliforms Count Plate,

- Petrifilm High - Sensitivity Coliforms Count Plate,

- Petrifilm Serie 2000 Rapid Coliform Count Plate,

- Petrifilm E.coli Count Plate,

- Petrifilm Enterobacteriaceae Count Plate,

- Petrifilm Yeast/Mould Count Plate

4.8.3 Petrifilm E coli Count Plate (ECCP)

a

Petrifilm Coliforms Count Plate (CCP): thêm 5bromo4chloro3indolyl

e

6,6

B5

v th tích m u

Tính toán

1000 4000

c

b a

x

3

Nguyên

-i i

1 1

V i

f i

1

Câu 1:

vi sinh trong m u th c ph m? Gi i thích các giá tr n, c, m, M

1 1

5.1 C ATP

TRONG GIÁM SÁT V SINH

5.1.1 Nguyên t c

ánh sáng phát ra

E + LH2 + ATP E LH2 AMP + PPi(1)

E LH2 AMP + O2 Oxyluciferin + AMP + CO2 + h (2)

E + LH2 + ATP + O2 Oxyluciferin + AMP +CO2 + h + PPi

(E: Luciferase, LH2: luciferin)

5.1.2 Áp d ng

-100 ATP này sau khi

TCA 5

Hình 5.1

5.1.3 Th c hi n tính toán

tra

Hình 5.5sandwich ELISA

-

vào

không

-

Hình 5.6

5.2.2.2 ELISA c nh tranh

enzyme

Hình 5.7

-

-

(Ara h1 và Ara h2)

RIDASCREEN -Lactoglobulin RIDASCREEN Casein Milk Protein ELISA Kit Allergens ELISA Kits FASTKIT SLIM Milk Allergens

ELISA Systems -Lactoglobulin RIDASCREEN FAST Peanut

Peanut Protein ELISA Kit Allergens ELISA Kits FASTKIT SLIM Peanut Allergens

Peanut Residue ELISA

R-Biopharm

R-Biopharm Crystal Chem Inc Astori Labs

Cosmo Bio USA

ELISA Systems R-Biopharm

Ovomucoid, ovalbumin, ovotransferrin, lysozyme

Gliadins, secalin, hordein,

prolamin, gluten

conglutin)

RIDASCREEN FAST Gliadin

Gliadin ELISA Kit Wheat Protein ELISA Kit Gluten ELISA Kits

Allergens ELISA Systems Gliadin

Senf/Mustard Allergens ELISA Kits

Allergen Mustard Seed Protein Assay

RIDASCREEN FAST Lupine

Allergens ELISA Kits ELISA Systems Lupine Residue

RIDASCREEN FAST Crustacean

Allergens ELISA Kits

ELISA Soy Protein ELISA Kit Allergens ELISA Kits

FASTKIT SLIM Soybean Allergens

ELISA Systems R-Biopharm

Crystal Chem Inc Diagnostic

Automation Astori Labs

Cosmo Bio USA ELISA Systems R-Biopharm

Morinaga Inst

Crystal Chem Inc ELISA Technologies Astori Labs

Cosmo Bio USA ELISA Systems R-Biopharm

Astori Labs Neogen ELISA Systems R-Biopharm

Astori Labs ELISA Systems R-Biopharm

Astori Labs ELISA Systems

US Biologicals Diagnostic Automation Astori Labs Cosmo Bio USA ELISA Systems

5.2.2.3 Ví d ng d ng k thu t ELISA c phân tích

0 0

B

B B B

0

Hình 5.9

O B/B0

lg[CAP]

5.3 P (POLYMERASE CHAIN REACTION)

Hình 5.10

chung kéo dà

Hình 5.11

các khuôn dài

c và th c ph m

a

(III) chloride (FeCl3

hình sau:

K

20-50 3 3

VPEG

-

Norwalk, Hepatitis A, Astro, Rota, Adeno

không có RT-

- ethanol (96 100

5.2AW1

(ml)

Ethanol (ml)

tích (ml)

-

AW2 (ml)

Ethanol

5.3.4.3 Quy trình tách chi t và tính s ch RNA virus

1 Cho 560 µl Buffer AVL v

phút Ly tâm 8000 rpm trong 1 phút

Hình 5.15

-

-

-

-

( ) S

2

[1] AOAC Official methods of analysis, 1984

[2] C.H Collins & Patricia M Lyne Butterworths, Microbiological methods, 1979

[3] Martin R Adams and Maurice O Moss, Food Microbiology, 3rd edition, University

of Surrey, Guildford, UK, 2008

[4] John P Harley, Laboratory Exercises in Microbiology, 5th edition,

Companies, 2002