PCR là kỹ thuật quan trọng trong sinh học phân tử. Do đó, hiện nay có rất nhiều trung tâm nghiên cứu, trường đại học và các công ty nghiên cứu xây dựng phòng thí nghiệm PCR. Bài viết mô tả cách thiết kế phòng thí nghiệm PCR.
Trang 1Thiết kế phòng thí nghiệm PCR
Phòng thí nghiệm PCR cần được chia làm 3 khu vực:
• Khu vực 1: chuẩn bị mẫu
• Khu vực 2: trộn hóa chất (PCR mix)
• Khu vực chạy máy PCR
• Khu vực 3: chạy điện di
tất cả các khu vực cần được tách biệt và được bố trí kín với lối vào riêng, đồng thời sử dụng hệ thống lọc không khí riêng biệt như điều hòa…
Nếu có các cabinet riêng biệt như tủ thao tác PCR hoặc tủ cấy vi sinh, khu vực chuẩn bị mẫu và khu vực trộn hóa chất có thể để chung trong một khu vực ( 1phòng) Và tách riêng với khu vực chạy máy PCR
Khu vực chạy máy PCR phụ thuộc vào phương pháp PCR sử dụng Nếu sử dụng phương pháp PCR liên quan đến việc mở nắp ống PCR ( thường gọi phương pháp PCR cổ điển, sau khi PCR cần có quá trình điện di, hoặc lai phân tử) thì khu vực đặt máy PCR cần đặt đủ xa khu vực 1 và khu vực 2 Đảm bảo rằng hệ thống thông khí các phòng này không liên kết với nhau và với các khu vực khác
Khi xây dựng phòng PCR, cũng lên chú ý có một phòng riêng để thay quần áo, ăn uống và có một phòng riêng để các vật tư tiêu hao cho PCR: như đầu côn, rack, khẩu trang, găng tay…
Tất cả các phòng lên có đèn UV để khử trùng Tủ an toàn sinh học cần đặt trong khu vực 1 để xử lý mẫu Điều này sẽ đảm bảo an toàn cho người sử dụng khi thao tác với các mẫu bệnh có thể gây bệnh cho người Trước và sau khi xử lý mẫu lên bật đèn UV khử trùng Các công đoạn như nghiền mẫu, ly tâm, tách chiết DNA/RNA được xử lý ở khu vực này
Khu vưc để trộn hóa chất chạy PCR cần được chuẩn bị trong tủ thao tác PCR (PCR cabinet) Tủ thao tác PCR cần có đèn chiếu sáng và đèn huỳnh quang để đảm bảo khử trùng Tất cả các dụng cụ PCR cần được đánh dấu và chỉ được sử dụng trong khu vực 2 Các dụng cụ tiêu hao sạch mới được phép chuyển vào trong khu vực này
Sau khi quá trình PCR kết thúc , ống PCR cần được chuyển sang khu vực điện di hoặc lai phân tử mà không được mở nắp ống
Buồng điện di và soi gel điện di bao gồm 2 thiết bị chính: máy điện di , nguồn điện di và máy soi gel
Hiện nay máy điện di , bộ nguồn điện di của Cleaver – Anh Quốc được sử dụng nhiều tại Việt Nam
Trang 2Công ty TNHH khoa học và công nghệ 3B.
Mr Duy (0917.517.147)