- B2 : Nuôi cấy phân lập trong điều kiện 37 độ C trong 18-24h Môi trường Endo và xác định vi khuẩn: + Men Lactose + -> Nghi ngờ vi khuẩn E.Coli + Men Lactose - -> Nghi ngờ vi khuẩn Samon
Trang 1Bệnh phẩm : Phân
Vi khuẩn : E.coli , Samonella , Shigella
- B1 : Nhuộm Gram chẩn đoán sơ bộ xác định vi khuẩn và định hướng cho nuôi cấy phân lập
+ Hình thể: Cầu khuẩn, trực khuẩn, xoắn khuẩn
+ Màu sắc: Gram (+) bắt màu tím , Gram (-) bắt màu đỏ
- B2 : Nuôi cấy phân lập trong điều kiện 37 độ C trong 18-24h (Môi trường Endo)
và xác định vi khuẩn:
+ Men Lactose (+) -> Nghi ngờ vi khuẩn E.Coli
+ Men Lactose (-) -> Nghi ngờ vi khuẩn Samonella, Shigella
Từ khuẩn lạc nghi ngờ có thể tiến hành nhuộm gram để khẳng định lại tính chất của
vi khuẩn
- B3 : Cấy chuyền khuẩn lạc vào môi trường chuẩn đoán KIA (môi trường hai đường), môi trường MIU (môi trường thạch mềm/ di động và môi trường Ure-Indole) ở 37 độ C, từ 18h-24h
* Môi trường hai đường: ban đầu môi trường có màu đỏ , sau 24h
Sinh hơi : môi trường thạch cao lên sinh hơi có E.coli và Samonella Sinh H2S : chỉ có Samonella sinh khí H2S
-> Môi trường thạch chuyển vàng (lên men đường glucozo (+) và lactozo (+)
* Môi trường thạch mềm : Kiểm tra tính chất di động -> Chỉ có E.coli và salmonella di động được nhờ các lông xung quanh thân; không di động được -> Shigella
* Môi trường Ure – Indole :
+ Phân giải ure
Nếu xuất hiện màu vàng nhạt không phân giải Ure ( - )
Nếu xuất hiện màu hồng có phân giải Ure ( + )
+ Sinh indole : với thuốc thử kovac để kiểm tra tính chất sinh indole
Có quầng đỏ nổi trên bề mặt môi trường vi khuẩn có sinh indole (Chỉ có vi khuẩn e-coli sinh indole )
Có quầng nâu ,vàng trên bề mặt môi trường vi khuẩn không sinh indole
- B4 : Sau khi định dạng được vi khuẩn Định dạng được Typ huyết thanh