THỰC HÀNH BÀI TANIN

Lấy Ống nghiệm này đem đi lọc bỏ tủa → lấy dịch cho vào ống nghiệm hình bên dưới b... • Pha TT stiasny: 2ml formol + 1ml HCl đđ• Nếu làm phản ứng stiasny không có tủa đỏ gạch thì KL: ch

TANIN ( PC: pyrocatechic & PG: pyrogallic )

I. Chiết xuất:

1. Cho vào bình nón:

2. Lọc qua bông → thu dịch chiết ( lọc 2 lần )

II. Định tính

1. Phản ứng định tính chung ( xác định có tannin hay không)

a.

b.

2. Phản ứng phân biệt 2 loại tannin (PC or PG)

a

Lấy Ống nghiệm này đem đi lọc bỏ tủa → lấy dịch cho vào ống nghiệm (hình bên dưới )

b

1mcf bột ngũ bội tử

H 2 O

t o đến kh bình nóng là được

↓ BÔNG TRẮNG

2ml dd Gelatin

2ml dd Vài FeCl 3 ↓ XANH ĐEN

t o → ↓ ĐỎ GẠCH CÓ TANIN PC

3ml dd

10 TT stiasny

t o

→ ↓ XANH ĐEN → CÓ 2 PC & PG

→ KHÔNG ↓ → CHỈ CÓ PC

Dịch bỏ tủa vừa lọc Trung hòa stiasny thừa bằng Natri acetat) + FeCl 3

Xảy ra 2 trường hợp

• Pha TT stiasny: 2ml formol + 1ml HCl đđ

• Nếu làm phản ứng stiasny không có tủa đỏ gạch thì KL: chỉ có PC

→ Định tính tanin trong Ngũ bội tử (Galla chinensis)

* Chiết tanin từ dược liệu

Lấy khoảng 1,00g bột dược liệu cho vào bình nón dung tích 50ml, thêm 20ml nước cất, đun sôi trong 2 phút Để nguội, lọc Dịch lọc được dùng để định tính

* Các phản ứng định tính:

a Ống 1: lấy 2ml dịch lọc, thêm 2 giọt dung dịch FeCl3 5% (TT) sẽ xuất hiện màu hoặc tủa màu xanh đen hoặc xanh nâu nhạt

b Ống 2: lấy 2ml dịch lọc, thêm 2 giọt chì acetat 10% (TT) sẽ xuất hiện tủa bông.

c Ống 3: lấy 2ml dịch lọc, thêm 5 giọt dung dịch gelatin 1% sẽ xuất hiện tủa

bông trắng

d Phản ứng Stiasny (Phân biệt tanin pyrogallic và pyrocatechic)

Lấy 10ml dịch lọc, thêm vào đó 2ml formol và 1ml HCl đậm đặc Nếu không có tủa là tanin pyrogallic, nếu có tủa là tanin pyrocatechic

→ Nếu dược liệu có cả hai loại tanin thì sau khi làm phản ứng Stiasny tạo ra tủa thì lọc qua giấy lọc để loại tủa tanin pyrocatechic, thêm vào dịch lọc natri acetat

dư rồi thêm dung dịch FeCl3 5% (TT) sẽ xuất hiện tủa xanh đen

e Phản ứng xác định tanin catechic

→ Lấy 0,20g bột dược liệu cho vào 1 bình nón nhỏ, cho vào đó 10ml methanol đun cách thủy đến sôi Sau khi nguội lọc qua giấy lọc Lấy 1ml dịch lọc, cho vào

đó 0,5ml dung dịch vanilin 1% và 1ml HCl đậm đặc Nếu có tanin catechic sẽ xuất hiện màu đỏ đậm

g Định tính tanin bằng sắc ký lớp mỏng

→ Bản mỏng silicagen tráng sẵn GF254 (Merck), hoạt hóa ở 1100C trong 1 giờ

Dung dịch thử: lấy 0,5g bột Ngũ bội tử thêm 3ml methanol ngâm trong 15 phút, thỉnh thoảng lắc, lọc lấy dịch lọc làm dung dịch thử

→ Hệ dung môi khai triển: cloroform - ethyl acetat - acid formic (5 : 5 : 1)

Có thể tiến hành với dung dịch đối chiếu acid gallic trong methanol (1ml chứa 1mg acid gallic)

→ Thuốc thử phun hiện màu: pha 10ml dung dịch FeCl35% trong ethanol Tanin sẽ kết hợp với ion Fe3+ tạo ra phức chất có màu xanh, xanh lục hoặc xanh đen