Các phương pháp phát hiện đề kháng kháng sinh

Xac dinh MIC phương pháp pha loãng kháng sinh trong tube... Xac dinh MIC phương pháp pha loãng kháng sinh trong thạch... Dia khang sinh Để tiện sử dụng, cho đĩa kháng sinh vào các lọ chứ

Bai giang vi sinh

CAC PHƯƠNG PHÁP

PHÁT HIỆN

ĐỀ KHÁNG KHÁNG SINH

Phạm Hùng Vân

Phân loại kháng sinh theo dược động

T/MIC Penicillins, cephalosporins,

trên MIC) carbapenems, "macrolides",

clindamycin

AUC/MIC fluoroquinolones, azithromycin,

tetracyclines, vancomycin, ketolides, Streptogramins

——

T gian

Điểm gãy PK-PD của thuốc A là 1qg/mI vì ở điểm này, nồng độ của thuốc đạt

1/10 Cmax (10ug/ml)

Xác định điểm gãy PK-PD

một ví dụ trên các KS có dược dong 24hAUC/MIC

fluoroquinolones

azithromycin, tetracyclines,

vancomycin,

ketolides, Streptogramins

Xac dinh MIC

phương pháp pha loãng kháng sinh trong tube

Xac dinh MIC phương pháp pha loãng kháng sinh trong thạch

Xac dinh MIC phương pháp epsilon (E-tes†t)

Xac dinh MIC phương pháp pha loãng trong microwell

- a i me he na Peete

#4

PHUONG PHAP XÁC ĐINH MBC

Minimal

Bactericidal

Concentration

Dia khang sinh

Để tiện sử dụng, cho đĩa

kháng sinh vào các lọ chứa

Bao quan dia khang sinh

Lựa chọn moi trudng lam KSB

Trải vi khuẩn lên mặt thạch KSĐ

N

Dung tam bong vo

trung, lay huyén dich

vk, ép kiệt nước thừa,

rồi trải đêu vk lên mặt

đêu trong NS vô trùng

y McF 0.5

| | Huyên dịch vk phải

tương đương McF 0.5

Trải vi khuẩn lên mặt thạch KSĐ

N

Dung tam bong vo

trùng trải đều vạch cấy vk lên mặt thạch

trên mặt thạch KSD

>>

oh

Làm khô mặt thạch đã trải vi khuẩn trong tủ vô trùng

trong vòng không quá 15 phút

trước khi đặt đĩa kháng sinh lên mặt thạch

Đặt địa kháng sinh lên mặt thạch

Đặt địa kháng sinh lên mặt thạch

Nhiệt độ, khí trường, thời gian ủ

16 - 18h

(Staphylococci va Enterococci can 24h)

Khí trường thường

Nhiệt độ, khí trường, thời gian ủ

Nhiệt độ, khí trường, thời gian ủ

vk khó mọc:

H influenzae (KSB tren HTM) 35°C

16 - 18h

5% CO2 (bình nến)

Nhiệt độ, khí trường, thời gian ủ

vk kho moc:

khac (KSB tren MHC) 35°C

Đo đường kính vòng vô khuẩn

(1) dia khang sinh Trim/Sulf,

| (2) vi khuẩn Profeus mọc lan

Đo đường kính vòng ngoài

Các trường hợp khác có 2 vòng

vô khuẩn: (1) đặt ĐKS lúc mặt

thạch còn ướt (2) vk không thuần

Phải lam lai KSB

Bién luan két qua KSB

dựa theo đường kính vòng vô khuẩn

VD: vk thu KSD E coli

DKS Dmm vòng vô khuẩn Bảng biện luận kết quả Kết quả

đo được Kháng T.gian Nhay

Cm 14 <12 1347 >18 T gian

Phải dùng đúng bản biện luận kết quả Dmm vòng vô khuẩn, theo

NCCLS 2000, có 9 bảng biện luận, tùy vk thử KSĐ

Enterobacteriaceae Staphylococci

Haemophilus spp

S pneumoniae

V cholerae

Pseudomonas, Acinetobacter Enterococci

N gonorrhoeae Streptococci khac

Dam bao chat lượng KSĐ

Kiểm tra chất lượng trên các vi khuẩn ATCC; thực hiện định kỳ hay

moi khi co: (1) lot môi trường mới, (2) lot ĐKS mới, (3) người mới thực hiện KSĐ

mm

Cx, Cu, Cl, Ci, Dx, Er, Ge, Kn, NI, Fr,

Nr, Of, Ox, Pn, Rf, Sm, Te, Tb, Bt, Va

Cu, Cl, Ci, Dx, Ge, Im, Kn, Ng, NI, Fr,

Dam bao chat lượng KSĐ

Kiểm tra chất lượng trên các vi khuẩn ATCC; thực hiện định kỳ hay

moi khi co: (1) lot môi trường mới, (2) lot ĐKS mới, (3) người mới thực hiện KSĐ

Vi khuẩn ATCC ĐKS kiểm tra

Im, Of, Rf, Te, Bt

Nr, Ox, Of, Pn, Rf, Te, Bt, Va

Cac van đề thường gặp

Thiéu hay phương tiện và phương pháp

ý sai KQ các kháng sinh Sul/Trim, Aminoglycosides

khi dùng NA, hay MHA kém chât lượng

ý sai KQ với các đĩa kháng sinh kém chất lượng

ý mặt thạch KSĐ ướt — 2 vòng vô khuẩn mật độ VK dày —> vòng vô khuẩn nhỏ

Cac van đề thường gặp

Chọn lựa các kháng sinh làm KSĐ

Kêt quả KSĐÐ thiêu hữu dụng lâm sàng

làm rối trí lâm sàng khi chọn kháng sinh kết quả KSĐ tự mâu thuần

phải chọn kháng sinh theo kinh nghiệm

chọn kháng sinh điều trị sai (không dùng đĩa

oxacillin dé phat hién S pneumoniae khang PNC)

Các đểm cần lưu ý khi doc KQ KSB

í kháng Oxacillin tức là kháng tất cả các kh

các B - lactams khác (kế cả B - lactams ph ioitors

Phat hién S Pneumoniae khang Penicillin phải thực hiện với dia

Oxacillin 1ug Nếu Dmm vòng vô khuẩn đối với Oxacillin < 19mm, vi khuẩn có thể kháng vừa với Penicillin (PISP, MIC = 0.1 — 1 U/ul) hay khang cao vdi Penicillin (PRSP, MIC = 0.1 — 1 U/ul)

AC trường hợp sau: K pneumoniae nh nhạy Polymycin B, Sïrepfococci tiêu

Các đểm cần lưu ý khi doc KQ KSB

lết phải làm kháng sinh đồ các vi khuẩn sa

tiêu huyết B group A (vì luôn nhạy với Peni

vi con nhạy cảm với Penicillin và Ampicillin

với Streptomycin, và là vi khuẩn mọc chậm

Kháng sinh đồ là thứ nghiệm phát hiện đê kháng, không phải là thu

nghiệm tìm kháng sinh nhạy cảm Do vậy khi đọc kết quả KSĐ phải

lưu ý các kháng sinh bị đề kháng để không dùng, chứ không

phải tìm kháng sinh nhạy cảm để dùng

ng tên thương mại của kháng sinh để

mà phải dùng tên khoa học

inh da bi dé khang thi cac khang sinh trong kha nang dé khang chéo cao

Thu nghiém tim men B - lactamase

Là thử nghiệm đơn giản, nhanh, cho lâm sàng hướng điêu trị kháng

sinh trước khi có kết qua KSĐ nhờ ý nghĩa: vk tiết B - lactamase đa số kháng đa

kháng sinh, vi khuẩn không tiết B -gactamase nhạy cảm với nhiều kháng sinh thông dụng

Phát hiện vi khuẩn

tiết men B - lactamase phổ rộng

Co thé phat hién K pneumoniae, K oxytoca, va E coli

tiết B - lactamase pho r6ng

Sang loc budc dau