THÍ NGHIỆM CÔNG NGHỆ tế bào KHÓA 2015

ova, E. Zazimalova and E.F. George 6 Plant Growth Regulators II: Cytokinins, their Analogues and Antagonists 205 J. van Staden, E. Zazimalova and E.F. George 7 Plant Growth Regulators III: Gibberellins, Ethylene, Abscisic Acid, their Analogues and Inhibitors; Miscellaneous Compounds 227 I.E. Moshkov, G.V. Novikova, M.A. Hall and E.F. George 8 Developmental Biology 283 D. Chriqui 9 Somatic Embryogenesis 335 S. Von Arnold 10 Adventitious Regeneration 355 P.B. Gahan and E.F. George 11 Stock Plant Physiological Factors Affecting Growth and Morphogenesis 403 J. Preece 12 Effects of the Physical Environment 423 E.F. George and W. Davies 13 The Anatomy and Morphology of Tissue Culturedova, E. Zazimalova and E.F. George 6 Plant Growth Regulators II: Cytokinins, their Analogues and Antagonists 205 J. van Staden, E. Zazimalova and E.F. George 7 Plant Growth Regulators III: Gibberellins, Ethylene, Abscisic Acid, their Analogues and Inhibitors; Miscellaneous Compounds 227 I.E. Moshkov, G.V. Novikova, M.A. Hall and E.F. George 8 Developmental Biology 283 D. Chriqui 9 Somatic Embryogenesis 335 S. Von Arnold 10 Adventitious Regeneration 355 P.B. Gahan and E.F. George 11 Stock Plant Physiological Factors Affecting Growth and Morphogenesis 403 J. Preece 12 Effects of the Physical Environment 423 E.F. George and W. Davies 13 The Anatomy and Morphology of Tissue Culturedova, E. Zazimalova and E.F. George 6 Plant Growth Regulators II: Cytokinins, their Analogues and Antagonists 205 J. van Staden, E. Zazimalova and E.F. George 7 Plant Growth Regulators III: Gibberellins, Ethylene, Abscisic Acid, their Analogues and Inhibitors; Miscellaneous Compounds 227 I.E. Moshkov, G.V. Novikova, M.A. Hall and E.F. George 8 Developmental Biology 283 D. Chriqui 9 Somatic Embryogenesis 335 S. Von Arnold 10 Adventitious Regeneration 355 P.B. Gahan and E.F. George 11 Stock Plant Physiological Factors Affecting Growth and Morphogenesis 403 J. Preece 12 Effects of the Physical Environment 423 E.F. George and W. Davies 13 The Anatomy and Morphology of Tissue Cultured

1

THÍ NGHIỆM CÔNG NGHỆ TẾ BÀO KHÓA 2015

Buổi 1 (Tuần lễ 4/9 – 10/9)

Chương trình học

Lý thuyết thí nghiệm

Pha stock

Buổi 2 (Tuần lễ 11/9 – 17/9)

Pha môi trường tạo chồi trực tiếp hoa tử la lan

Buổi 3 (Tuần lễ 18/9 – 24/9)

Cấy cây hoa tử la lan

Buổi 4: (Tuần lễ 25/9 – 1/10)

Pha môi trường:

- Tạo sẹo cúc

- Tạo PLB ly ly

Buổi 5: (Tuần lễ 2/10 – 8/10)

Tạo sẹo cúc

Buổi 6: (Tuần lễ 16/10 – 22/10)

Tạo PLB ly ly

Buổi 7: (Tuần lễ 23/10 – 29/10)

Pha môi trường cấy Ngải giấm

Buổi 8: (Tuần lễ 30/10 – 5/11)

Cấy Ngải giấm

Buổi 9: (Tuần lễ 6/11 – 11/11)

Ôn tập và hướng dẫn cách trình bày bài báo cáo

2

MỤC ĐÍCH MÔN HỌC

Giới thiệu đến sinh viên kỹ thuật nuôi cấy tế bào, mô, cơ quan thực vật nhằm mục đích nhân giống cây trồng và thu nhận các hợp chất thứ cấp

- Nhân giống:

 Tạo chồi trực tiếp hoa tử la lan

o Nguyên liệu: thân, lá, cuống lá

o Môi trường: MS + BA (1; 1,5; 2; 2,5; 3 mg/l) + NAA 0,1 mg/l

 Tạo chồi từ chồi bên cây ngải giấm

o Nguyên liệu: đốt thân

o Môi trường: MS + BA (0; 0,05; 0,1; 0,15; 0,2 mg/l)

 Tạo PLB ly ly

o Nguyên liệu: gốc thân, lá

o Môi trường: MS + BA 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7 (mg/l) + NAA 0,5 mg/l

- Nuôi cấy tế bào:

 Tạo sẹo từ cúc

Nguyên liệu: thân, cuống lá, lá

Môi trường: MS + BA 2 mg/l + 2,4-D (1; 1,5; 2; 2,5; 3 mg/l)

HÌNH THỨC BÁO CÁO

Viết một báo cáo theo hình thức trình bày của một bài báo khoa học

3

MÔI TRƯỜNG KHOÁNG Thành phần môi trường MS (Murashige và Skoog, 1962):

KHOÁNG ĐA LƯỢNG

STT

độ (mg/l)

Trọng lượng (mg)

Thể tích dung dịch cuối (ml)

Thể tích dung dịch cần thiết để pha 1 lít môi trường chuẩn

KHOÁNG VI LƯỢNG

SẮT (FeEDTA)

MESO-INOSITOL

VITAMIN

4

CHẤT ĐIỀU HÒA SINH TRƯỞNG THỰC VẬT

ĐHSTTV

Dung môi hòa tan

Trọng lượng (mg)

Thể tích tổng

1 mg/ml

MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY CƠ BẢN

lít môi trường

Ghi chú

5

CÁC LOẠI MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY

nuôi cấy

Ký hiệu

Thành phần môi trường

Vi nhân giống tử la lan (Sinningia speciosa)

mg/l) + NAA 0,1 mg/l

Nuôi cấy tế bào cúc (Chrysanthemum sp.)

1,5; 2; 2,5; 3 mg/l)

Vi nhân giống ly ly (Lilium sp.)

0,7 (mg/l) + NAA 0,5 mg/l

Vi nhân giống cây ngải giấm (Artemisia dracunculus)

0,2 mg/l)

pH môi trường: 5.8 ± 0.1

Điều kiện khử trùng môi trường:

- Thời gian: 15 phút

- Nhiệt độ: 121oC

6

CHUẨN BỊ

Thể tích môi trường cần chuẩn bị/sinh viên:

- 50 ml môi trường tạo chồi tử la lan (T)

- 50 ml môi trường tạo sẹo cúc (C)

- 50 ml môi trường tạo PLB ly ly (L)

- 50 ml môi trường tạo chồi cây ngải giấm (N)

Lưu ý:

- Sinh viên làm việc theo nhóm (4 sinh viên/nhóm)

- Chuẩn bị petri tiệt trùng: 1 – 2 petri/sinh viên (buổi 2, 4 và 7)

Dụng cụ thủy tinh cho mỗi nhóm:

- Đũa khuấy thủy tinh : 2

- Phễu thủy tinh nhỏ : 2

7

CÁC CHỈ TIÊU THEO DÕI

1 Vi nhân giống tử la lan

1.1 Tỷ lệ mẫu cấy thân, lá, cuống lá tạo chồi sau 2, 3 và 4 tuần nuôi cấy

1.2 Số lượng chồi/mẫu cấy sau 2, 3 và 4 tuần nuôi cấy

1.3 Hình thái chồi (chiều cao, màu sắc, số lượng lá) sau 4 tuần nuôi cấy

2 Nuôi cấy tế bào cúc

2.1 Tỷ lệ mẫu cấy thân, lá, cuống lá tạo sẹo sau 1, 2, 3 tuần nuôi cấy

2.2 Hình thái mô sẹo sau 1, 2 và 3 tuần nuôi cấy

2.3 Trọng lượng tươi mô sẹo sau 3 tuần nuôi cấy

3 Vi nhân giống cây hoa ly ly

3.1 Tỷ lệ mẫu cấy gốc thân và lá tạo PLB sau 1, 2, 3 tuần nuôi cấy

3.2 Trọng lượng tươi và màu sắc PLB sau 3 tuần nuôi cấy

4 Vi nhân giống cây ngải giấm

4.1 Tỷ lệ mẫu cấy tạo chồi sau 1, 2 tuần nuôi cấy

4.2 Số lượng chồi/mẫu cấy sau 1, 2 tuần nuôi cấy

4.3 Hình thái chồi/cây (chiều cao, màu sắc, số đốt thân, số lượng lá, chiều dài

lá) sau 2 tuần nuôi cấy

Lưu ý: cần thu nhận kết quả thí nghiệm của các nhóm trong cùng buổi thí nghiệm,

so sánh và bàn luận sự khác biệt của kết quả giữa các nghiệm thức

8

NỘI DUNG BÀI BÁO CÁO

Trình bày theo qui định của Tạp chí Phát triển khoa học & công nghệ, ĐHQG - HCM

1 Bài công bố kết quả công trình nghiên cứu (research work) viết bằng một trong

ba thứ tiếng Việt, Anh, Pháp

Bài viết dài không quá 10 trang đánh máy trên khổ giấy A4 210 x 297 mm (kể cả bảng biểu, đồ thị và tài liệu tham khảo), font Times New Roman (Unicode), cỡ chữ 10, lề trái 3 cm, lề phải 2 cm, lề trên 2,5 cm, lề dưới 2,5 cm (kể cả hình vẽ)

Nội dung tóm tắt (khoảng 200 - 250 từ) và các từ khóa nêu rõ mục đích và kết quả của công trình nghiên cứu và từ khoá của bài (sắp xếp theo thứ thự alphabet)

Nếu bản thảo bằng tiếng Việt thì tóm tắt này bằng tiếng Anh; còn nếu bản thảo bằng tiếng Anh thì tóm tắt bằng tiếng Việt

Bài viết có thứ tự mục và tiêu đề, các công thức, ký hiệu viết rõ ràng, chính xác Chú thích tên hình ảnh, bảng biểu đồ thị Nếu thuật ngữ khoa học mới hoặc chưa phổ biến thì cần phải chú thích bên cạnh bằng thuật ngữ xuất xứ

2 Tài liệu tham khảo cần được đánh số thứ tự phù hợp với số chỉ dẫn trong bài

 Đối với bài báo trích dẫn: số thứ tự, tên tác giả, tên bài báo, tên tạp chí in

nghiêng, hoặc có thể viết tắt theo thông lệ quốc tế, tập (số), trang, năm xuất bản

Thí dụ: [3] Taylor G.I, Proc Roy Soc A 104, 180 (1992)

 Đối với sách trích dẫn: số thứ tự, tên tác giả hay tên người xuất bản, nếu có thể,

nêu tên chương (chapter) hay tên bài trong sách trích dẫn, tên sách in nghiêng, nhà xuất bản, nơi và năm xuất bản

Thí dụ: [5] Stanler J C Electromagnestism Mc Graw – Hill, London (1947)

 Nếu tham khảo các báo cáo kỹ thuật (technical reports), cần ghi số thứ tự, tên

tác giả, tên báo cáo in nghiêng, ngày báo cáo, tên và địa chỉ của cơ quan lập báo cáo

Tham khảo các bài báo đã xuất bản của tạp chí ở địa chỉ

http://www.vjol.info/index.php/JSTD

9

TÊN BÀI BÁO (size 12)

Tên tác giả

Trường Đại Học Bách Khoa – ĐHQG TP.HCM

TÓM TẮT: Giới thiệu ngắn gọn thí nghiệm và các kết quả chính…

Từ khóa: Artemisia dracunculus,…

Chữ viết tắt: BA: benzyladenine; MS: Murashige và Skoog; …

MỞ ĐẦU

Nêu ý nghĩa của kĩ thuật nuôi cấy tế bào thực vật Giới thiệu về các đối tượng nghiên cứu (cúc, ngải giấm,…) Mục đích của các thí nghiệm

VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

Vật liệu

Các mẫu thực vật được cung cấp bởi phòng thí nghiệm Công nghệ sinh học – Đại học Bách Khoa – Đại học quốc gia Tp HCM

Thân, lá và cuống lá của cây … ngày tuổi được sử dụng làm nguyên liệu tạo chồi trực tiếp cây tử la lan

…

Phương pháp

Tạo chồi trực tiếp cây tử la lan

Nêu cụ thể cách tiến hành cấy, kích thước mẫu cấy, thành phần môi trường và điều kiện nuôi cấy, các chỉ tiêu

theo dõi

Tạo sẹo cúc

…

KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

Tạo chồi trực tiếp cây tử la lan

Trình bày kết quả của các chỉ tiêu theo dõi, hình ảnh, bảng, biểu đồ so sánh giữa các nghiệm thức (nếu có)

Hình 1 Tên hình

10

Bảng 1 Sự tái sinh chồi trực tiếp từ mẫu cấy tử la lan trên môi trường MS + BA …+ NAA… sau 4 tuần

nuôi cấy

Loại mẫu cấy Số chồi Chiều cao chồi

(cm) Số lá/ chồi Hình thái chồi

(màu sắc, …)

Thân

Lá

Cuống lá

Hình 2 Tên đồ thị (Ảnh hưởng của nồng độ BA lên sự tái sinh chồi trực tiếp từ mẫu cấy tử la lan sau 4

tuần nuôi cấy)

Lưu ý: mỗi kết quả đều cần phải được thảo luận

KẾT LUẬN

Mẫu cấy thân tử lan tạo chồi trực tiếp tốt nhất trên môi trường …

…

PAPER TITLE Author Name

Ho Chi Minh City University of Technology - VNU - HCM

ABSTRACT: Tarragon…

Keywords: Artemisia dracunculus,…

TÀI LIỆU THAM KHẢO

[1] Nguyễn Đức Lượng, Lê Thị Thủy Tiên Công nghệ tế bào, Nhà xuất bản Đại học quốc gia Tp Hồ Chí

Minh (2006)

[2]…

NỘP BÁO CÁO: Thứ 3 ngày 21/11/2017