bao cao cố định protein enzym

NỘI DUNG:• Enzym tự do hay Enzym được tách khỏi tế bào, chúng có khả năng hòa tan trong môi trường nước và thực hiện các phản ứng ngoài tế bào... Việc tách sản phẩm cuối ra k

Phương pháp cố định

Protein Enzym

Phương pháp cố định

Protein Enzym

Nhóm F5 :

nguyễn ngọc vân nguyễn đình việt nguyễn văn tình nguyễn ngọc tuyến trương minh vũ

I MỞ ĐẦU:

Ngày nay, việc cố định Enzym được

thực hiện một cách phổ biến, đặc

biệt trong các lĩnh vực như công

nghệ thực phẩm, dược phẩm, các

hệ thống kiểm tra cảm biến sinh

học và miễn dịch học Enzym cố

định có khả năng tái sử dụng, thuận tiện trong điều khiển và phục hồi lại

Enzym cố định.

II NỘI DUNG:

• Enzym tự do hay Enzym được tách

khỏi tế bào, chúng có khả năng hòa tan trong môi trường nước và thực hiện các phản ứng ngoài tế bào

• Trong quá trình tham gia phản ứng các

loại Enzym này thường lẫn vào sản phẩm

Việc tách sản phẩm cuối ra khỏi Enzym

hòa tan là một công việc khó khăn và đòi hỏi chi phí cao, sau phản ứng nếu tách

được Enzym ra khỏi phản ứng để thực

hiện các phản ứng tiếp theo thì Enzym sẽ

không giữ được như hoạt tính ban đầu

=> Việc tái sử dụng Enzym không hiệu quả

Mục đích cuối cùng của việc cố định Enzym là gắn được Enzym vào một chất mang nào đó

để ta có thể thực hiện phản ứng Enzym nhiều

lần

• Công việc này thực hiện các bước

sau :

+ Chọn chất mang phù hợp với

Enzym cần gắn vào nó

+ Hoạt hóa chất mang cho khả năng gắn Enzym tốt hơn

+ Tiến hành các kỹ thuật phù hợp để gắn Enzym vào chất mang

1 Chất mang dùng

để cố định Enzym :

• Chất mang Polymer hữu cơ:

+ Polymer tự nhiên: Cellulose,

Agarose, Dextran, Sephadex, Gelatin, Keratin, Albumin….

+ Polymer tổng hợp: Polyacrylamide,

Polyester, Polyvinylalcohol,

Polyvinylacetare, Polyacrylic…

• Các chất mang vô cơ:

Ngoài các Polymer được sử dụng làm

chất mang còn có một số chất mang

vô cơ đã được sử dụng thương mại

như sợi bông thủy tinh Silicum Oxide,

Alluminium Oxide, Mangesium Oxide

Đây là những dạng Oxide có cấu trúc

lỗ và có khả năng hấp thụ tốt

2 Phương pháp hoạt

hóa chất mang

- Hoạt hóa chất mang bằng Cyanogen Halogenur

- Hoạt hóa bằng Ethyl Chloroformate

- Hoạt hóa bằng phương pháp Azide

- Hoạt hóa bằng Glutaraldehyde

- Hoạt hóa bằng phản ứng Diazo

- Hoạt hóa bằng Carbodiimide

- Hoạt hóa bằng

3-Aminopropyltriethoxysilane

3 Các phương pháp cố định

Enzym:

• Trong tế bào sinh vật tồn tại sẵn cả

Enzym ở dạng hòa tan và cả

Enzym không hòa tan

a Phương pháp nhốt Enzym:

Gồm phương pháp nhốt Enzym trong Gel và phương pháp nhốt Enzym trong

hệ sợi

• + Phương pháp nhốt Enzym trong

Gel:

• là phương pháp dựa trên cơ sở tạo ra

một màng bọc hay một Polymel Các

chất tham gia phản ứng và sản phẩm của phản ứng có thể thẩm thấu vào

trong hoặc ra ngoài thông qua màng

bọc này và Enzym sẽ được giữ

nguyên trong khuôn Gel đó

• + Phương pháp nhốt Enzym trong

hệ sợi:

Phương pháp nhốt Enzym trong hệ sợi có

khả năng xúc tác phản ứng tốt hơn

phương pháp nhốt Enzym trong Gel

Các sợi sử dụng để nhốt Enzym thường

là những sợi nhân tạo,các loại sợi này

có độ bền với acid,kiềm,các loại Ion và

• + Phương pháp tạo vi nang nhốt

Enzym ( phương pháp tạo màng

bọc):

•

Các vi nang được tạo ra để nhốt

Enzym thường có kích thước

1-100µm các vi nang có tính chất là

cho các cơ chất và sản phẩm phản ứng qua lại tự do

b Phương pháp tạo

liên kết Enzym với

chất mang

• Đây là phương pháp gắn Enzym vào chất

mang,các vật liệu làm chất mang trong phương pháp này phải có các tính chất

đặc biệt sau:

+ Chất mang phải bền với Acid hoặc kiềm

+ Chất mang phải gắn được với Enzym

theo những cơ chế nhất định

+ Chất mang không được tham gia phản ứng với cơ chất

• Tùy theo tính chất của các chất mang

người ta thực hiện gắn Enzym vào

chất mang theo những phương pháp sau:

+ Phương pháp hấp phụ

+ Phương pháp tạo liên kết Ion

+Phương pháp liên kết với kim loại

+Phương pháp tạo liên kết đồng hóa trị

THE AND