Bài thực phân tích môi trường

BÀI THỰC HÀNH SỐ 1: Xác định hàm lượng đường tổng và đường khử phương bằng phương pháp trắc quang 1.. Cường độ màu của hỗn hợp phản ứng tỉ lệ thuận với nồng độ đường khử acid dinitrosasy

Trang 1

BÁO CÁO THỰC HÀNH MÔN PHÂN TÍCH MÔ TRƯỜNG

Nhóm 1 (Lớp Quản lí TN&MT k2)

 Thành viên trong nhóm

1. Nguyễn Thị Hải Bình

2. Hoàng Trung Kiên

3. Phoutthasone Phouangvanh

4. Sonephanh Sainouphin

5. Khounphiw Anna

I BÀI THỰC HÀNH SỐ 1: Xác định hàm lượng đường tổng và đường khử phương bằng phương pháp trắc quang

1 Chuẩn bị lí thuyết

Phương pháp này dựa trên cơ sở phản ứng tạo màu giữa đường tổng và đường khử với thuốc thử acid dinitrosalisylic (DNS) Cường độ màu của hỗn hợp phản ứng tỉ lệ thuận với nồng độ đường khử acid dinitrosasylic sẽ tính được đường khử của mẫu nghiên cứu

2 Dụng cụ thiết bị

Ống nghiệm có nắp: 7 cái

Micropipet 20-200μl: 1 cái

Micropipet 100-1000μl: 1 cái

Bình định mức 100ml: 2 cái

Cân phân tích: 1 cái

Đầu côn

Becker 250ml: 3 cái Đũa thủy tinh: 1 cái Chén cân: 1 cái Cuvet: 2 cái Máy đo quang

3 Hóa chất

Thuốc thử acid ditrosalisylic(DNS):Cân 1g DNS pha trong 20ml NaOH 2N, thêm vào 50ml nước cất và 30g muối Sodium potaaium tartrate, đun cách thủy cho tan rồi định mức tới 100ml

Dung dịch glucose mẫu (5mg/ml): cân 0,5g D-glucose cho vào bình đinh mức, thêm nước cất, định mức đúng 100ml

4 Thực hành

Cách tiến hành:

Nếu hàm lượng đường trong mẫu ít thì có thể định mức một lần

Lập đường chuẩn với các dung dịch glucose chuẩn có nồng độ 5mg/ml và tiến hành tạo phức màu cho mẫu theo bảng sau:

Dung dịch gốc (ml) 0 0,04 0,08 0,12 0,16 0,2

Nước cất (ml) 1,0 0,96 0,92 0,88 0,84 0,8

Nồng độ C (mg/ml) 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1

Trang 2

DNS (ml) 0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0

Đun cách thủy đến khi dung dịch chuyển màu nâu đỏ

II BÀI THỰC HÀNH SỐ 2: Xác định chỉ số vi sinh vật trong nước

1 Chuẩn bị môi trường

Môi trường PDA (nuôi cấy nấm mốc)

- Thành phần:

+ Dịch chiết khoai tây: 100g

+ Dextrose: 10g

+ Agar: 10g

- Tiến hành:

+ Cân 10g dextrose và 10g bột agar rồi cho vào bình tam giác 1000ml

+ Cân 100g khoai tây, đêm luộc khoai tây từ 2 tiếng trở lên, sau đó lọc lấy phần nước bỏ phần bã khoai tây Đổ phần dịch chiết khoai tây vào bình tam giác, lắc đều cho đến khi tan hết

+ Định mức lên 500ml

+ pH của môi trường bằng 7

+ Đem môi trường thanh trùng ở điều kiện 1150C, 20 phút

2 Đổ môi trường

- Đổ môi trường trong tủ nuôi cấy vi sinh

- Mở nắp đĩa petri khoảng 300 (Tránh không cho vi sinh vật bên ngoài vào), đổ môi trường vào đĩa petri (khoảng 1/3-1/2 đĩa petri), đậy nắp, xoay nhẹ cho môi trường dàn đều

3 Chuẩn bị cần phân tích (làm trong tủ nuôi cấy vi sinh)

- Pha loãng mẫu:

+ Chuẩn bị 6 ống nghiệm có nắp chưa 9ml nước muốn sinh lý

+ Lắc đều mẫu, dùng micropipet lấy 1ml nước mẫu cho vào ống nghiệm thứ nhất (Độ pha loãng 1/10)

+ Lắc đều ống nghiệm 01, dùng micropipet lấy 1ml dung dịch ở ống nghiệm 01 cho vào ống nghiệm 02 (Độ pha loãng 1/100)

Trang 3

- Cho mẫu vào petri: lấy 50μl cho vào đĩa petri có sẵn môi trường đã được chuẩn

bị

- Trang: Dùng que trang để trải đều mẫu nước chứa vi sinh vật trên mặt thạch

trong đĩa petri Lưu ý: que trang cần phải được khử trùng bằng cách nhúng cồn rồi đốt cháy hết cồn trước và sau mỗi lần trang

*Lưu ý: Tất cả các dụng cụ được sử dụng đều phải được khử trùng.

4 Ủ vi sinh: Cho các đĩa petri đã được chuẩn bị xong cho vào tủ ủ ấm vi sinh ở

370C trong 48 tiếng

5 Đếm khuẩn lạc

- Nếu khuẩn lạc mọc thưa, dễ đếm thì đếm toàn bộ số khuẩn lạc mọc trên hộp thạch Nếu khuẩn lạc mọc dầy, khó đếm thì có thể chia mặt hộp ra làm nhiều ô, sau

đó đếm một số ô tiêu biểu rồi tính kết quả trung bình

- Tính số VSV có trong mẫu ban đầu: lấy số khuẩn lạc đếm được nhân với hệ số pha loãng

Định dạng
Số trang	3
Dung lượng	24,55 KB