nghiên cứu phân đoạn có hoạt tính lợi sữa

nghiên cứu phân đoạn có hoạt tính lợi sữa

Phl1n Nghien Cliu -Chudng IV

-67-Chuang IV NGHIEN CUU PHAN DO~N CO HO~ T TiNH L(1I SUA:

Cac ke't lu~n d chuang III cho hie't cac phan do~n cua eha't trich bff h<)thongdeu ehua protein va polisaearid MOt phan do~n co ho~t tinh IQi sua phai ehuaprotein va polisacarid vdi ham lu.<fngcao Sl{ tinh chC kC tier la giai do<;tndin thiG't

dC tIm hidu them vC Ulc phan do<;tnc6 ho<;tttinh l<jisua.

C6 nhiCu phu.<1ngphap dC tinh chC, dl{a tren sl{ khac bi~t cua cae phan ta vc

kich thudc, dO hoa tan trong dung moi, dic$n tich eua phan ta, tinh ai ll{c d~e bic$tcua vai lo~i n6i chua trong phan ta Vdi cae d~e tinh neu tren ,nhung phuong phap

tinh che' sa d~ng ]a: site ky IQc gel, sitc ky iraQ d6i ion va site ky ai ll{e.

IV.1 S~c ky IQc ~cl.

IV.I.I.Nguyen titc eua phuong phap siic kv lac ~el

Gel thong d~ng co ten thuong m~i sephaeryl, sephadex, sepharoz, ]a mQtlo~i polimer co nhanh eua dextran No thong tan nhung ra't ng~m nudc, co d~nghtnh Calliron, duong kinh trung binh 0,1 rum

Cho dung djeh gel bao h<)atrong dung moi vao cQt sitc ky , tie'p do, cho m~ucha't dati cOt Khi giai ly, cae phan ta co trQng luQng phan ta nho , duQe phan b6trong dung m6i d khoang tr6ng giua cae h~t gel va e6 thS xuyen vao n~m trongnhung h<;ttgel Phan ta eo trQng lu<jngphan ta IOn thong chili vao cae h~t gel, dtrong dung djch, ehie'm kh6ng gian giua eae h<;ttgel, se di ehuySn nhanh ra khoi cQttrude (Phan t6ng quan II.8)

IV.1.2 Phuong phap site ky IQegel, dung gel SEPHADEX G-IOOcl{cmin ,ap d~ng

IV./.2.a Thlfc nghi?m

Kich thu(Jc cQt : chi'eu caD

duong kinhthS tich chungthe tich tr6ng

Thea d6i sac kj : b~ng khuc x~ kG'

ThlfC nghi?m : hoa tan phan do<;tn 50 - 100 KD (2g) trong nude ea't (1600).Dun Hong cach thuy vai phut Ly tam 9.000 vong / phut trong 15 phut Thu duQcc~n (50 mg) Cho dung djch vao dati cQt sitc ky, dung nude ca't lam dung moi giai

ly vdi v~n t6e 0,25 ml / phut Hung eha't dung ly trong nhung 6ng nghic$m Bong co

chiln kh6ng cae philn do<;tnthu du<fc.

55 em5em

905 00

280 00

Phdn Nghien Cliu -Chu(Jflg IV

-68-Phan Hchham luQng nitrogen va phan tich voi may siic ky lOng cao ap ,dungd)t BONDAGEL E-125, v~n t6c giiii Iy 0,5 mJ/phut,mQtsO'phan do(;ln

Iv f.2.h Ket qua

Ghi trong bang 23 va cac hlnh 19,20,21

BANG 23 : Phuong phap siic ky IQc gel G - 100 SF , ap dl;}ngtren phan do(;ln

-Thu h6i toan phiill : 83,6 %

Ph'tin Nf!.ht'en Ct(u - Chu:anf! IV

-69-HINH 20: So sanh cac ph an do<;lncua phu'ong phap s3:cky lQc gel G-] 00 biing may

HPLC, cQt BONDAGEL E - ]25 , ph<it hit;n biing ta ngo<;lid 250 nm

PHAN J-)O~N SIEU LQC 50 - 100 KD ,

\ .~"'-PHAN l:)O~N SAC KY G5

,

':'

Phut

Ph(Jn Nghien Cau - Cht/(fng IV

-70-HINH 21 : Ke't qua di~n di cac phan do<;lncua si\c ky IQc gel G-IOO clfc mill, ap

dt;mg tren phan do<;lnsieu IQc 50 - 100 KD

d'ay 1mm Cu'ong de) dong di~n khong d6i 10 mA ,trong 160 phut .

C(lt 3 Chell chuiJ'ncua hang PHARMACIA C(Jt 4 Phan dO(ln sac ky l()c gel 03 C(Jt 5 Phan dogn sac ky lQc gel G4 C(Jt 6 Phan dogn sac ky l(JCgel G5 C(Jt 7 Phan dogn sac ky lQCgel G6 C(Jt 8 Phan dogn sac ky l(JCgel G7 C(Jt 9 Phan dO(ln sac ky l(JCgel G8

l