Vết chính trên sắc ký đồ thu được của dung dịch thử phải phù hợp với vết chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu về vị trí, mầu sắc và kích thước.. B.Trong phần Định lượng, thời gia
Trang 1VIÊN NÉN ENALAPRIL
Tabellae Enalaprili
Là viên nén chứa enalapril maleat
Chế phẩm phải đáp ứng các yêu cầu trong chuyên luận “Thuốc viên nén”(Phụ lục 1.20) và các yêu cầu sau đây:
Hàm lượng enalapril maleat, C20H28N2O5.C4H4O4, từ 90,0 đến 110,0% so với hàm
lượng ghi trên nhãn
Tính chất
Viên nén màu trắng
Định tính
A Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4)
Bản mỏng: Silica gel GF 254
Hệ dung môi khai triển: Butan-1 - ol - nước - acid acetic băng (60 : 25 : 15)
Dung dịch A: Hòa tan 0,85 g bismuth nitrat base (TT) trong hỗn hợp 10 ml acid
acetic băng (TT) và 40 ml nước Pha loãng 1 thể tích dung dịch này thành 10 thể tích
Trang 2với hỗn hợp 20 thể tích acid acetic băng (TT) và 70 thể tích nước ngay trước khi
dùng
Dung dịch hiện màu: Hỗn hợp đồng thể tích của dung dịch A và dung dịch kali iodid
40%
Dung dịch thử: Cân một lượng bột viên tương ứng với 20 mg enalapril maleat, thêm
10 ml ethanol 90% (TT), lắc trong 10 phút, ly tâm Sử dụng dịch trong ở trên
Dung dịch đối chiếu: Dung dịch enalapril maleat chuẩn 0,2% trong ethanol 90%
(TT)
Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên bản mỏng 5 l mỗi dung dịch trên Triển khai
sắc ký đến khi dung môi đi được 15 cm Lấy bản sắc ký ra, để khô ngoài không khí
Phun dung dịch hiện mầu, rồi phun tiếp dung dịch hydrogen peroxyd loãng (TT)
Vết chính trên sắc ký đồ thu được của dung dịch thử phải phù hợp với vết chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu về vị trí, mầu sắc và kích thước
B.Trong phần Định lượng, thời gian lưu của pic chính trong sắc ký đồ thu được của dung dịch thử phải tương ứng với thời gian lưu của pic enalapril trong sắc ký đồ thu được của dung dịch chuẩn
Tạp chất liên quan
Tiến hành bằng phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3)
Dung dịch A, pha động, dung dịch đối chiếu (1), dung dịch đối chiếu (2) và các điều
kiện sắc ký: thực hiện như mô tả trong mục Định lượng
Trang 3Dung dịch thử: Cân chính xác một lượng bột viên tương ứng với 50 mg enalapril
maleat, thêm 50,0 ml dung dịch A, lắc trong 15 phút và ly tâm Sử dụng dịch trong ở trên
Dung dịch (1): Pha loãng 1 thể tích dung dịch thử thành 500 thể tích với dung dịch
A
Dung dịch (2): Pha loãng 3 ml dung dịch đối chiếu (1) thành 20 ml với dung dịch A
Dung dịch (3): Pha loãng 1 ml dung dịch đối chiếu (2) thành 20 ml với dung dịch A
Dung dịch (4): Trộn 1 thể tích dung dịch (2) và 1 thể tích dung dịch (3), pha loãng
thành 20 thể tích với dung dịch thử
Phép thử chỉ có giá trị, khi trong sắc ký đồ thu được của dung dịch (4) hệ số phân giải giữa pic enalaprilat và pic enalapril diketopiperazin ít nhất là 3,0; hệ số phân giải giữa pic enalapril diketopiperazin và pic enalapril ít nhất là 2,0 Nếu cần, điều chỉnh các thành phần trong pha động
Trong sắc ký đồ thu được của dung dịch thử, diện tích của bất kỳ pic nào tương ứng với enalaprilat không được lớn hơn diện tích của pic chính trong sắc ký đồ thu được của dung dịch (2) (1,5%), diện tích của bất kỳ pic nào tương ứng với enalapril diketopiperazin không được lớn hơn diện tích của pic chính trong sắc ký đồ thu được của dung dịch (3) (0,5%), diện tích của bất kỳ pic phụ nào khác không được lớn hơn 1,5 lần diện tích của pic chính trong sắc ký đồ thu được của dung dịch (1) (0,3%) Tổng diện tích pic phụ, ngoài các pic tương ứng với enalaprilat và enalapril
Trang 4diketopiperazin, không được lớn hơn 5 lần diện tích của pic chính trong sắc ký đồ thu được của dung dịch (1) (1,0%)
Độ hòa tan (Phụ lục 11.4)
Thiết bị: Kiểu cánh khuấy
Môi trường hòa tan: 900 ml nước
Tốc độ quay: 50 vòng/phút
Thời gian: 45 phút
Cách tiến hành: Lấy một phần dung dịch môi trường đã hòa tan mẫu thử, lọc Pha
loãng dịch lọc với môi trường hòa tan để thu được dung dịch có nồng độ enalapril maleat khoảng 0,00028% Pha dung dịch enalapril maleat chuẩn trong môi trường
hòa tan có nồng độ chính xác khoảng 0,00028% Tiến hành sắc ký như mô tả trong
mục Định lượng Tính hàm lượng enalapril maleat, C20H28N2O5.C4H4O4, đã hòa tan
trong mỗi viên
Yêu cầu: Không được ít hơn 70% lượng enalapril maleat, C20H28N2O5.C4H4O4, so
với hàm lượng ghi trên nhãn được hòa tan trong 45 phút
Định lượng
Tiến hành bằng phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3)
Trang 5Dung dịch A: Hòa tan 0,136 g kali dihydrogen phosphat (TT) trong 800 ml nước,
điều chỉnh pH tới 2,0 với acid phosphoric (TT) và thêm nước vừa đủ 1000,0 ml Lọc
qua màng lọc cỡ 0,45 m
Pha động: Hỗn hợp acetonitril và dung dịch A (40 : 60)
Dung dịch thử: Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình viên, nghiền thành bột mịn
Cân chính xác một lượng bột viên tương ứng với khoảng 10 mg enalapril maleat, thêm 50,0 ml dung dịch A, lắc trong 15 phút và ly tâm Sử dụng dịch trong ở trên
Dung dịch chuẩn: Dung dịch enalapril maleat chuẩn 0,02% trong dung dịch A
Dung dịch đối chiếu (1): Dung dịch enalaprilat chuẩn 0,01% trong dung dịch A
Dung dịch đối chiếu (2):Dung dịch enalapril diketopiperazin chuẩn 0,01% trong
dung dịch A
Dung dịch đối chiếu (3): Trộn 1 thể tích dung dịch đối chiếu (1) và 1 thể tích dung
dịch đối chiếu (2), pha loãng thành 20 thể tích với dung dịch thử
Điều kiện sắc ký:
Cột thép không gỉ (25 cm x 4,6 mm) được nhồi pha tĩnh C (5 m)
Nhiệt độ cột: 70oC
Detector quang phổ tử ngoại đặt ở bước sóng 215 nm
Tốc độ dòng: 1,0 ml/phút
Trang 6Thể tích tiêm: 20 l
Cách tiến hành:
Kiểm tra khả năng thích hợp của hệ thống sắc ký: Tiến hành sắc ký với dung dịch đối chiếu (3) Phép thử chỉ có giá trị, khi trong sắc ký đồ thu được hệ số phân giải giữa pic enalaprilat và pic enalapril diketopiperazin ít nhất là 3,0; hệ số phân giải giữa pic enalapril diketopiperazin và pic enalapril ít nhất là 2,0 Nếu cần, điều chỉnh các thành phần trong pha động
Tiến hành sắc ký lần lượt với dung dịch chuẩn và dung dịch thử
Tính hàm lượng enalapril maleat, C20H28N2O5.C4H4O4, trong viên dựa vào diện tích
(hay chiều cao) pic enalapril thu được của dung dịch chuẩn, dung dịch thử và hàm lượng C20H28N2O5.C4H4O4 của enalapril maleat chuẩn
Bảo quản
Nơi khô mát, tránh ánh sáng
Loại thuốc
Chống tăng huyết áp
Hàm lượng thường dùng
5 mg; 10 mg; 20 mg