nuoi cay mo thuc vat

Với mục đích tìm hiểu về kĩ thuật nhân giống in vitro cây hoa cúc, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu ảnh hưởng của một số chất kích thích sinh trưởng đến khả năng tạo

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

trong giai đoạn nhân nhanh

SVTH: NGUYỄN THỊ MỸ VIỆT GVHD: HÀ CẨM THU

Nội dung

Kết luận và kiến nghị

Kết quả và biện luận

Đối tượng và phương pháp nghiên cứu

Mở đầu

1 Mở đầu

•Hiện nay với mức sống ngày càng cao của con

người, bên cạnh việc thỏa mãn về nhu cầu ăn, mặc thì việc thỏa mãn nhu cầu tinh thần là không thể thiếu, nhu cầu trồng và thưởng thức các loại hoa đang có xu hướng gia tăng và phát triển mạnh, đặc biệt là phong trào trồng kiểng lá

•Cúc vàng là một trong những giống cúc rất được nhiều người dùng không chỉ về màu sắc, kiểu dáng

mà còn tăng thêm sự tôn nghiêm, quý phái, trang

Hiện nay kĩ thuật nhân giống in vitro được tiến

hành nghiên cứu và đưa vào áp dụng trong thực tiễn sản xuất và đã thành công đối với nhiều

loại cây khác nhau

Với mục đích tìm hiểu về kĩ thuật nhân giống in vitro cây hoa cúc, chúng tôi tiến hành nghiên

cứu đề tài: “Nghiên cứu ảnh hưởng của một số

chất kích thích sinh trưởng đến khả năng tạo

chồi, ra rễ của cây hoa cúc vàng trong giai

đoạn nhân nhanh”.

2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP

NGHIÊN CỨU

• 2.1 Đối tượng nghiên cứu:

• Đối tượng là mẫu cấy chuyền cây hoa cúc

vàng thuộc Chi (Chrysanthemum).

• Mẫu được lấy từ trung tâm nghiên cứu giống cây trồng tỉnh Gia Lai

Cúc thọ vàng

2.2 Thời gian và địa điểm nghiên cứu:

Từ 8/3/2010 => 30/4/2010 tại Trung tâm nghiên cứu giống cây trồng ở Gia Lai.2.3 Phương pháp nghiên cứu:

2.3.1 Phương pháp chuẩn bị môi trường nghiên cứu

2.3.1 Môi trường dạng stock:

Hóa chất

Môi trường mẹ (dạng stock) Nước cất

Dung dịch mẹ Nồng độ

(mg/l) Nồng độ trong DD mẹ

(stock)

Lượng nước cần dùng Dung tích cho 1l môi

trường MS1 KNO3 1900 38g 1000ml 50ml/l

KH2PO4 170 2.8g 1000ml 50ml/l

NH4NO3 1650 33g 1000ml 50ml/lMgSO4 370 7.4g 1000ml 50ml/lMS2 CaCl2 332.2 39.2g 500ml 5ml/lMS3 H3BO3 6.2 620mg 500ml 5ml/l

MnSO4.4H2O 8.6 860mg 500ml 5ml/lCoCl2.6H2O 0.025 2.5mg 500ml 5ml/lCuSO4.7H2O 0.025 2.5mg 500ml 5ml/lZnSO4.7H2O 8.6 860mg 500ml 5ml/l

Na2MoO4.2H2O 0.25 3.8g 500ml 5ml/l

KI 0.83 83mg 500ml 5ml/lMS4 FeSO4 27,8 2.8g 500ml 5ml/l

Na2EDTA 37.3 3.8g 500ml 5ml/lMS5 Myo-Inositol 100 10g 500ml 5ml/l

Thiamine.HCl 0.1 20mg 500ml 5ml/lPyridoxine.HCl 0.5 100mg 500ml 5ml/lAcid nicotic 0.5 100mg 500ml 5ml/lGlycine 2 400mg 500ml 5ml/l

Hấp khử trùng (1120C, 30phút

Đổ vào chai thủy tinh

Đưa môi trường vào phòng lạnh

để môi trường Môi trường mẹ

(dạng stock)

2.3.2 Phương pháp chuẩn bị mẫu cấy

• Trước khi đem mẫu vào cấy chuyền phải:

• - Tiến hành vệ sinh tủ cấy

• - Rửa tay sạch sẽ với xà phòng, sau đó dùng cồn lau thật kỹ

• - Vệ sinh bì mẫu đem cấy

Mẫu cấy chuyền

Xịt cồn

(trước khi đưa vào tủ cấy)

Tháo ghim Cắt mẫu cấy

Cấy mẫu

Trình tự cấy mẫu nhân nhanh

Mẫu cúc đem cấy chuyền trong giai đoạn nhân nhanh

• 2.3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng của NAA và BA đến khả năng tạo chồi của cây hoa cúc vàng ở giai đoạn nhân nhanh

• Sau 10, 20, 30 ngày nuôi cấy, tiến hành xác định một

số chỉ tiêu về số chồi/cụm chồi, chiều cao chồi (tính

từ gốc đến ngọn) để nhận xét về nồng độ phát sinh chồi của cây dưới ảnh hưởng của BA và NAA.

• 2.3.4 Nghiên cứu ảnh hưởng của NAA đến khả năng ra rễ của cây hoa cúc vàng ở giai

đoạn nhân nhanh

• - M5: MS bổ sung NAA 0.2 mg/l

• - M6: MS bổ sung NAA 0.4 mg/l

• - M7: MS bổ sung NAA 0.6 mg/l

• - M8: MS bổ sung NAA 0.8 mg/l

• Sau 15 ngày nuôi cấy tiến hành xác định một

số chỉ tiêu về số rễ ra, chiều dài rễ (tính từ

gốc) để nhận xét về nồng độ ra rễ của cây

dưới ảnh hưởng của NAA

• 2.3.5 Phương pháp xử lý số liệu

• Số liệu được tính toán trên phần mềm EXCEL của Microsoft

office

3 Kết quả và biện luận

• 3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ BA

và NAA đến quá trình phát sinh chồi của cây hoa cúc vàng trong giai đoạn nhân nhanh:

• Để tìm nồng độ phù hợp của BA và NAA lên

sự tạo chồi của các giống (Chrysanthemum)

trong thí nghiệm này chúng tôi bố trí 4 nồng

độ khác nhua.

Nồng

độ NAA (mg/l)

Ngày sau cấy

10 ngày 20 ngày 30 ngày

Biểu đồ 3.2 Ảnh hưởng của nồng độ BA + NAA

Bảng 3.1 Ảnh hưởng của NAA và BA

đến khả năng tạo chồi của mẫu cấy chuyền

Các mẫu cúc sau 30 ngày cấy chuyền

Môi trường 1

Môi trường 2

• 3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ

NAA đến quá trình ra rễ của cây hoa cúc

vàng trong giai đoạn nhân nhanh:

• - NAA là một auxin nhân tạo, có vai trò quan trọng trong phân chia tế bào và tạo rễ Việc tạo rễ, thân, lá hoàn chỉnh là giai đoạn cuối

cùng của quy trình nhân giống in vitro

• - Sử dụng NAA vào giai đoạn này với các

nồng độ khác nhau

Môi

trường

Nồng độ

NAA (mg/l) Số rễ Chiều dài rễ (cm) Tỷ lệ ra rễ (%)

M7 0,6 58.4 ± 0.76 4.83 ± 1.4 100

Bảng 3.2 Ảnh hưởng của NAA

đến khả năng tạo rễ của mẫu cấy

Biểu đồ 3.3 Ảnh hưởng của NAA

đến số lượng của rễ

Biểu đồ 3.4 Ảnh hưởng của NAA

đến chiều dài của rễ

Các mẫu cấy khi ra rễ

đoạn nhân nhanh.

• - Môi trường MS có bổ sung 0,6 mg/l NAA là môi trường thích hợp nhất cho sự ra rễ của hoa cúc vàng trong giai đoạn nhân nhanh

• Kiến nghị:

• - Trong khi nuôi cấy nên thay đổi môi trường với các nồng độ chất kích thích sinh trưởng khác nhau, không nên giữ một môi trường

nuôi cấy như vậy giống dễ bị thoái hóa, lụi tàn

• - Tiếp tục nghiên cứu, theo dõi các loại chất kích thích sinh trưởng khác có biên độ dao

động ở mức độ khác nhau để tìm môi trường nuôi cấy thích hợp tốt nhất cho cây