Các phương pháp chuẩn đoán phân tử

Tài liệu công nghệ sinh học phân tử, nguyên lí và ứng dụng của ADN tái tổ hợp

Các quy trình chu n đoán mi n d ch ẩ ễ ị

 G n m u đang c n xét nghi m ắ ẩ ầ ệ vào phi n r n ế ắ

Kháng th đ n dòng ể ơ

 Nuôi trong môi tr ườ ng có

hypoxanthin, amino pterin,

thymidin

Xác đ nh dòng t bào lai ị ếsinh kháng th đ c hi uể ặ ệDùng môi trường nuôi c y ấ

ch a kháng th ti t raứ ể ế

Kháng th th 2 để ứ ược ti p ế

h pợ

khi s d ng kháng th đ n ử ụ ể ơdòng thay cho đa dòng thì tính đ c hi u c a quy ặ ệ ủ

trình tăng

Các h th ng chu n đoán ADN ệ ố ẩ

*Trình t nucleotit quy đ nh m t đ c đi m sinh h c c th s ự ị ộ ặ ể ọ ụ ể ẽ

 phát hi n Trypanosoma cruzi ệ

*Kí sinh trùng thu c đ ng v t nguyên sinh Trypanosoma cruzi ộ ộ ậ

là nhân t gây b nh trùng mũi khoan ố ệ

*Th nghi m PRC b nh trùng mũi khoan đ ử ệ ệ ượ c dùng b tr cho ổ ợ các xét nghi m truy n th ng ệ ề ố

*Trong m t quy trình xét nhi m d a trên PCR đo n ADN 18 bp ộ ệ ự ạ

có m t trong nhi u b gen T cruzi nh ng không có m t trong ặ ề ộ ư ặ ADN b gen c a kí sinh trùng liên quan khác là trình t đích ộ ủ ự

 quy trình lai không phóng xạ

*Lai axit nucleotit đ ượ c phát hi n b ng đánh d u m u dò ệ ằ ấ ẫ

M u dò đánh d u biotin ẫ ấlai v i AND đích ớ

đèn hi u phân tệ ử

• Đèn hi u phân t không ệ ửdùng phóng x đ phát ạ ể

hi n trình t đ c hi uệ ự ặ ệ

• Các quy trình thí

nghi m d a trên đèn ệ ự

hi u phân t đã đệ ử ược phát tri nể

xác đ nh d u vân tay ị ấADN

• K tình nghiẻ

• Ph ADN ti u v tinh ổ ể ệ

bi u di n t p h p đ ể ể ậ ợ ộdài c a m t s chu i ủ ộ ố ổtrong m t s cá thộ ố ể

Nhân b i ng u nhiên các AND đa hìnhộ ẫ

Phân bi t các gi ng cây tr ng khác nhauệ ố ồ

th c m bi n sinh h c vi ể ả ế ọkhu nẩ

• C n có phầ ương pháp xác đ nh d dàng, ị ễnhanh chóng v i lớ ượng

l n h p ch t có ti m ớ ợ ấ ềnăng đ c gây nhi m ộ ễ

được s d ng đ phát ử ụ ể

hi n và đánh giá s ệ ố

lượng ch t ôi nhi m.ấ ễ

Chu n đoán phân t các b nh di truy n ẩ ử ệ ề

*giúp phát hi n nguy c b b nh b n thân, con cháu ệ ơ ị ệ ả

Sàng l c b nh x nang ọ ệ ơ

B nh gây ra do m t trong s l n các thay đ i di truy n trong ADN ệ ộ ố ớ ổ ề bình th ườ ng c a gen đó ủ

Th ườ ng sàng l c b nh di truy n khá ph c t p ọ ệ ề ứ ạ

Thi u máu t bào hình ế ế

li mề

B nh gay ra do thay ệ

đ i nucleoeti trong ổcođon c a axit amin ủ

th sáu chu i β ứ ở ỗ

c a phân t ủ ửhemoglobin

Thay đ i nucleotit ổtrong gen β-globin gây ra b nh thi u ệ ếmáu t bào hình li m ế ềlàm m t v trí nh n ấ ị ậ

bi t enđonucleaza ế

gi i h n Cvnớ ạ I

Sau khi hai trình t ự

m i oligonucleotit ồbên c ch v trí Cvnạ ị I

được thêm vào, m t ộ

s lố ượng nh ADN ỏ

m u có th đẫ ể ược nhân b i b ng PCRộ ằ

*H PCR/OLA nhanh, nh y, đ c hi u cao Có th th c hi n t ệ ạ ặ ệ ể ự ệ ự

đ ng v i s tr giúp c a các robot các b ộ ớ ự ợ ủ ở ướ c c a quy trình th ủ ử nghi m Trong đi u ki n nh v y có th th c hi n đ ệ ề ệ ư ậ ể ự ệ ượ c 1.200

ph n ng g n n i m i ngày ả ứ ắ ố ỗ

 Xác đ nh ki u gen ị ể

b ng các m i PCR ằ ồđánh d u huỳnh ấquang

• Các m i PCR đánh d u ố ấ

b ng các thu c nhu m ằ ố ộhuỳnh quang khác nhau

có th để ược dùng đ ểphát tri n các h th ng ể ệ ốphát hi n d a trên màu ệ ựkhông phóng xạ