Gián án di truyền vi sinh vật

Trường đại học Khoa học Khoa Khoa học Sự sống Bài báo cáo Môn di truyền vi sinh vật Plasmid của vi khuẩn Nhóm sinh viên thực hiện: Nhóm 3 Thái nguyên, tháng 12 năm 2010... Vi khuẩn là mộ

Trường đại học Khoa học Khoa Khoa học Sự sống

Bài báo cáo Môn di truyền vi sinh vật

Plasmid của vi khuẩn

Nhóm sinh viên thực hiện: Nhóm 3

Thái nguyên, tháng 12 năm 2010

GiỚI THIỆU

Vi khuẩn (tiếng Anh và tiếng La Tinh là bacterium, số nhiều

bacteria) đôi khi còn được gọi là vi trùng, nó thuộc loại ký

sinh trùng

Vi khuẩn là một nhóm sinh vật đơn bào, có kích thước nhỏ (kích thước hiển vi) và thường có cấu trúc tế bào đơn giản không có

nhân, bộ khung tế bào (cytoskeleton) và các bào quan như ty

thể và lục lạp

GiỚI THIỆU

Thông tin di truyền của tế bào

vi khuẩn nằm trên một phân

tử DNA mạch kép, vòng tròn

được gọi là “nhiễm sắc thể”

Ngoài ra, một số vi khuẩn có

thêm yếu tố di truyền ngoài

nhân gọi là plasmid.

1 PLASMID LÀ GÌ?

• Plasmid là những phân tử DNA mạch kép dạng vòng nằm ngoài

thể nhiễm sắc , có kích thước rất nhỏ, có khả năng tự nhân lên

độc lập với tế bào và được phân sang các tế bào con khi nhân lên cùng với tế bào

• Đặc điểm:

 Có kích thước khoảng từ 1 đến hơn 400 (bp)

 Có khả năng tự sao chép để tồn tại độc lập trong tế bào

 Không ảnh hưởng đến sự sinh trưởng, phát triển và sinh sản của

tế bào vật chủ

 Các plasmid có thể mang một số gen của vi khuẩn và các gen này

có thể biểu hiện ra protein

 Có dấu chuẩn chọn lọc được sử dụng cho vector tách dòng

2 PHÂN LOAI

2.1 Dựa vào khả năng truyền sang vi khuẩn khác:

 Plasmid tiếp hợp chứa các tra-genes, giúp thực hiện một quá trình phức tạp gọi là tiếp hợp - chuyển một plasmid sang vi

khuẩn khác

 Plasmid không tiếp hợp là những plasmid không có khả năng

tự thực hiện tiếp hợp, vì thế chúng chỉ có thể được chuyển sang một vi khuẩn khác khi có sự trợ giúp của plasmid tiếp hợp

 Nhóm plasmid trung gian gọi là nhóm di chuyển được Chúng

chỉ mang các gene cần thiết cho việc di chuyển Những

plasmid này có thể chuyển với tần số cao khi có mặt của một plasmid tiếp hợp

Sơ đồ về tiếp hợp ở vi khuẩn

2.2 Dựa vào chức năng có thể phân thành 5 nhóm

chính:

 Plasmid giới tính: mang các tra - gene, có khả năng

tiếp hợp

 Plasmid mang tính kháng: mang các gene có khả

năng kháng lại các thuốc kháng sinh hay các chất độc

 Col-plasmid: chứa gene mã hóa cho sự tổng hợp

colchicine, một protein có thể giết chết các vi khuẩn khác

 Plasmid phân hủy: giúp phân hủy các chất lạ như

toluene hay salicylic acid

 Plasmid mang độc tính, làm cho sinh vật trở thành

2 PHÂN LOAI

3 VECTOR PLASMID

Plasmid gặp trong tự nhiên, thường được sửa đổi

nhiều tạo ra các vector có đặc điểm mong muốn.

3.1 Vector plasmid dùng trong tách dòng

 Vector plasmid thế hệ 1: ColE1 và RSF1030

 Vector thế hệ 2: pBR322

 Vector thế hệ 3: pBluscript KS (-) hoặc (+), pUC 18, 19

 Vector thế hệ thứ 4: pCR2.1, pJET1.2

3.VECTOR PLASMID

3.1 Vector plasmid dùng trong tách dòng

a.Vector thế hệ 1

• Có số lượng bản sao 20-40

• Không tiếp hợp

3 VECTOR PLASMID

3.1 Vector plasmid dùng trong tách dòng

b Vector thế hệ thứ 2

• Kích thước nhỏ: 4363 bp

• Có 2 gen kháng kháng sinh

• Trình tự Origin

• Một số RE thuộc gen KKS

3 VECTOR PLASMID

3.1 Vector plasmid dùng trong tách dòng

Vector tách dòng thế hệ thứ 3

pUC (18,19)

• 2686 bp

• Mang gen kháng sinh

• Mang gen mã hóa beta-galactosidase

3 VECTOR PLASMID

3.1 Vector plasmid dùng trong tách dòng

Vector thế hệ thứ 4

3 VECTOR PLASMID

3.2 Vector biểu hiện gen

• Hệ thống

vector pET

biểu hiện ở

E.coli

4 ỨNG DỤNG CỦA PLASMID

• Ứng dụng plasmid trong phòng thí nghiệm di truyền và sinh hóa, chúng được sử dụng để

nhân bản hoặc biểu hiện các gene cần quan

tâm

• Ứng dụng plasmid trong thương mại hóa

• Một ứng dụng quan trọng khác của plasmid là tạo ra protein với số lượng lớn.