Tiểu luận CHUYỂN GEN BẰNG XUNG điện

Khái niệm chung về phương pháp xung điện Phương pháp xung điện hay còn gọi là điện biến nạp (electroporation) là phương pháp sử dụng điện trường cường độ cao, ngắn để gây ra tính thấm thuận nghịch qua lớp lipit kép của màng tế bào. Xung điện làm mở rộng lỗ màng và làm mỏng màng sinh chất, từ các lỗ đó cho phép các đại phân tử khác nhau (AND, ARN, kháng thể…) chuyển qua màng.

Trường: ĐH Nông Lâm-Huế

Khoa : Cơ Khí Công Nghệ

Lớp : BQ41

GVHD : Nguyễn Thị Vân Anh

Thành viên thực hiện:

1.Đào Thị Na 2.Lê Thị Minh Lan 3.Nguyễn Thị Tám

CÔNG NGHỆ SINH HỌC THỰC PHẨM

Khái niệm chung về phương pháp

xung điện

 Phương pháp xung điện hay còn gọi là điện biến nạp (electroporation) là phương pháp sử dụng điện trường cường độ cao, ngắn để gây ra tính thấm thuận nghịch qua lớp lipit kép của màng tế bào.

 Xung điện làm mở rộng lỗ màng và làm mỏng màng sinh chất, từ các lỗ đó cho phép các đại phân

Tế bào muốn

chuyển được đặt

trong máy xung

điện có hiệu điện

thế khoảng 500

V/cm với khoảng

thời gian 4-5

phần nghìn giây

Các bước chuyển gen bằng xung điện

Máy xung điện

Một dòng điện cao

áp trong khoảnh khắc có khả năng tạo ra các lỗ

thủng trên màng

tế bào khiến DNA ngoại lai từ môi trường có thể

xâm nhập vào

trong tế bào

Tiếp đó

xung điện

làm rối loạn

phospholipid

kép của

màng tế bào

và tạo ra các

lỗ tạm thời

Sơ đồ plasmid chứa DNA ngoại lai đi qua các lỗ tạm thời trên màng bào chất

Thể nguyên sinh(Protoplast) được thêm vào một dung dịch có chứa DNA lạ, huyền phù DNA- Protoplast được đưa vào một dòng điện, sự tạo thành các vi khổng (small

spore) ở màng Protoplast cho phép DNA xâm nhập vào tế bào

Sau đó thể nguyên sinh vừa được chuyển nạp gen sẽ tái sinh cho ra cây mới

Sơ đồ chuyển gen bằng phương

pháp xung điện:

Qúa trình chuyển gen

 Hiệu quả biến nạp khá cao

 Chuyển được cả các gen có kích thước lớn.

 Có thể dùng một thể tích dịch tế bào nhỏ.

 Chuẩn bị tế bào biến nạp đơn giản.

 Tần số biến nạp với AND siêu xoắn vàADN

mạch vòng là giống nhau do đó không cần sử

dụng vector.

 Hiệu suất biến nạp phân tử cho AND mạch vòng rất cao đối với các plasmid có kích thước đến

50kb.

Ưu Điểm

Thiết bị biến nạp đắt tiền

Thời gian để tái sinh biến nạp kéo dài

Có những thay đổi lớn không thể điều

chỉnh được trong biểu hiện của gen(hiệu ứng vị trí)

Trong quá trình chuyển gen đòi hỏi người chuyển phải khéo léo, chính xác tránh xảy

Nhược điểm

• Bằng kỹ thuật xung điện thì:

• Chyển các gen mong muốn trong kỹ thuật

di truyền và nuôi trồng thuỷ sản

• 1992 Monila đã tạo ra được giống mía

chuyển gen

• Tạo ra các vacine phòng bệnh hay các

loại vitamin

Ứng dụng:

Tài liệu tham khảo:

1 Công nghệ sinh học thực

vật - Trần Thị Lệ

2 www.google.com.vn