Nuôi cấy và dung hợp tế bào trần 1.Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen 1.Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen... Sự tạo mô sẹo in vitro , nhờ auxin, thuộc một trong ba
Trang 1TRƯỜNG CĐ SP SÓC TRĂNG
KHOA TỰ NHÊN
TÔ SINH KTNN
Trang 21 Tạo mô sẹo & dịch treo tế bào
2 Quá trình sinh phôi thể hệ
3 Chuyển gen
4 Nuôi cấy và dung hợp tế bào
trần
1.Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
1.Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Trang 3 Mô sẹo: đám tế bào không phân hóa,
phân chia mạnh dưới tác động của một auxin mạnh (như 2,4-D) riêng rẽ hay phối hợp citokinin.
Sự tạo mô sẹo in vitro , nhờ auxin,
thuộc một trong ba quá trình:
* Phản phân hóa tế bào nhu mô
* Phân chia tầng phát sinh (dicot)
* Xáo trộn MPS cấp 1 (monocot)
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Trang 4Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Sự tạo dịch treo tế bào
dịch tế bào phân tán và tăng
trưởng trong môi trường lỏng
* Khởi phát bằng cách đặt mô sẹo
(hay cây con, phôi, MPS ngọn…) vào trường lỏng được lắc
* Môi trường lỏng cũng chứa
auxin, với citokinin hay không
Trang 5Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Tế bào sinh phôi
(có khả năng sinh phôi) có
kích thước nhỏ, đẳng kính, vách mỏng, tế bào chất
đậm đặc và nhân to.
Trang 6Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
như chỉ gồm các tế bào sinh phôi cô lập hay họp thành nhóm nhỏ
Trang 7Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Ích lợi của dịch treo tế bào:
* Tăng cường trao đổi khí & các chất, loại trừ tính hữu cực của mô
* Vi nhân giống, thu nhận các hợp chất thứ cấp, trắc nghiệm độc tố (chọn dòng tế bào),
chuyển gen, cô lập và nuôi cấy tế bào trần
Trang 8Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
* Phôi thể hệ (phôi soma)
được tạo từ tế bào thể hệ (tế bào cơ thể, tế bào soma, 2n), theo con đường sinh
phôi thể hệ
Trang 9Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
* Sinh phôi thể hệ (tạo phôi
thể hệ) qua các giai đoạn tương tự như sinh phôi hợp tử
* Phôi thể hệ → Cây con giữ
đặc tính di truyền của tế bào thể hệ.
Trang 10Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
2 giai đoạn thu nhận phôi thể hệ
- tạo tế bào sinh phôi (mô sẹo, dịch
treo tế bào): cần auxin
- tiến hóa phôi: giảm hay loại auxin
Trang 15Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Trang 17+ Agrobacterium (với
plasmid biến đổi)
Nuôi cấy và tuyển chọn với chất kháng sinh
Trang 18Suùng DNA
Trang 20SÚNG BẮN GEN
Trang 224 Cô lập, nuôi cấy và dung hợp tế bào trần
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Trang 24Sản phẩm dung hợp
Trang 25Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Trang 26Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Trang 27Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen
Nuôi cấy tế bào và thu nhận cây chuyển gen