Định tính Trong phần định lợng, pic chính trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải có thời gian lu tơng ứng với thời gian lu của pic clarithromycin trên sắc ký đồ của dung dịch clarithromy
Trang 1Viên nén clarithromycin
Tabellae Clarithromycini
Là viên nén bao phim chứa clarithromycin
Chế phẩm phải đáp ứng các yêu cầu trong chuyên luận “Thuốc viên nén” mục “viên bao” (Phụ lục 1.20) và các yêu cầu sau đây:
Hàm lợng clarithromycin, C38H69NO13,phải từ 90,0 đến 110,0% so với hàm lợng ghi trên nhãn
Tính chất
Viên màu trắng hoặc trắng ngà hoặc có màu đồng đều
Định tính
Trong phần định lợng, pic chính trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải có thời gian lu tơng ứng với thời gian lu của pic clarithromycin trên sắc ký đồ của dung dịch clarithromycin chuẩn
Nớc
Cân chính xác khoảng 0,25 g bột viên, sấy trong chân không dới áp suất 5 mm Hg ở 110 OC trong 3 giờ, lợng mất đi không quá 6,0% ( Phụ lục 9.6)
Độ hoà tan ( Phụ lục 11.4 )
Môi trờng hoà tan: 900 ml dung dịch đệm natri acetat 0,1 M.
Cách pha dung dịch đệm natri acetat 0,1 M: Hoà tan 13,61 g natri acetat trihydrat (TT) trong 1000
ml nớc, điều chỉnh đến pH 5,0 bằng acid acetic 0,1N (TT)
Thiết bị: Kiểu cánh khuấy.
Tốc độ quay : 50 vòng/phút.
Thời gian: 30 phút.
Cách tiến hành:
Tiến hành bằng phơng pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3)
Pha động, dung dịch chuẩn, dung dịch phân giải và điều kiện sắc ký thực hiện nh trong phần
Định lợng
Dung dịch thử : Lấy một phần dung dịch môi trờng sau khi hòa tan, lọc, bỏ 20 ml dịch lọc đầu, pha
loãng dịch lọc với pha động để thu đợc dung dịch có nồng độ clarithromycin khoảng 125 àg/ ml
Yêu cầu: Không đợc ít hơn 80,0% lợng clarithromycin, C38H69NO13,so với lợng ghi trên nhãn đợc hoà tan trong 30 phút
Định lợng
Tiến hành bằng phơng pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3)
Pha động: Hỗn hợp của methanol (TT) và dung dịch kali dihydrophosphat 0,067 M (65: 35), điều
chỉnh đến pH 4,0 bằng acid phosphoric (TT) Lọc qua màng 0,45 àm Điều chỉnh tỷ lệ dung môi nếu cần
Dung dịch thử: Cân 20 viên, tính khối lợng trung bình, nghiền thành bột mịn Cân chính xác một
l-ợng bột viên tơng ứng với 0,2 g clarithromycin vào bình định mức 50 ml, thêm khoảng 35 ml
methanol (TT), lắc trong 30 phút rồi thêm methanol (TT) vừa đủ; để lắng Lấy 3,0 ml dịch ở trên
thêm pha động vừa đủ 100,0 ml, trộn đều và lọc qua màng 0,5 àm
Dung dịch chuẩn: Cân chính xác một lợng clarithromycin chuẩn pha trong methanol (TT), lắc, siêu
âm nếu cần để có dung dịch gốc có nồng độ clarithromycin chuẩn chính xác khoảng 625 àg/ ml Pha loãng 10,0 ml dung dịch này thành 50,0 ml bằng pha động, trộn đều Lọc qua màng 0,5 àm (Dung dịch có nồng độ clarithromycin chuẩn chính xác khoảng 125 àg/ ml.)
Dung dịch phân giải: Pha chất liên quan A (6,11 – di –o-methyl erythromycin A, C39H71NO13 ) của clarithromycin trong methanol (TT) để đợc dung dịch có nồng độ khoảng 625 àg/ ml Lấy 10,0 ml dung dịch này và 10,0 ml dung dịch chuẩn vào bình định mức 50 ml, thêm pha động đến vạch và trộn đều
Điều kiện sắc ký:
Cột thép không gỉ (15 cm ì4,6 mm) chứa pha tĩnh C (5 àm)
Nhiệt độ duy trì ở khoảng 50OC
Detector quang phổ tử ngoại, đặt ở bớc sóng 210 nm
Tốc độ dòng: 1,0 ml/phút
Thể tích tiêm: 20 àl
Cách tiến hành:
Kiểm tra khả năng thích hợp của hệ thống sắc ký: Tiến hành sắc ký với dung dịch phân giải, thời gian lu tơng đối của clarithromycin khoảng 0,75 và của chất liên quan A của clarithromycin là 1,0
Độ phân giải giữa pic của clarithrromycin và chất liên quan A của clarithromycin phải không nhỏ hơn 2,0
Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn, từ pic của clarithromycin tính ra số đĩa lý thuyết của cột không đợc nhỏ hơn 750; hệ số đối xứng không nhỏ hơn 0,9 và không quá 2; độ lệch chuẩn tơng đối của diện tích pic clarithromycin từ 6 lần tiêm lặp lại không lớn hơn 2,0%
Tiến hành sắc ký lần lợt với dung dịch chuẩn và dung dịch thử
Trang 2Tính hàm lợng clarithromycin, C38H69NO13,trong một viên dựa vào diện tích pic thu đợc từ sắc ký đồ của dung dịch chuẩn và dung dịch thử và hàm lợng C38H69NO13 trong clarithromycin chuẩn
Bảo quản
Trong đồ đựng kín, ở nhiệt độ không quá 30OC
Loại thuốc
Kháng sinh
Hàm lợng thờng dùng
250 mg, 500 mg