phân loại vi sinh vật bằng sinh học phân tử (tt) doc

Cách tiếp cận phân loại học với kỹ thuật sinh học phân tử: Ngày nay những tiến bộ trong sinh học phân tử đã mở ra khả năng ứng dụng hữu hiệu trong phân loại học và nghiên cứu đa dạng v

2 Cách tiếp cận phân loại học với kỹ thuật sinh học phân tử:

Ngày nay những tiến bộ trong sinh học phân tử đã mở ra khả năng ứng dụng hữu hiệu trong phân loại học và nghiên cứu đa dạng vi sinh vật Nếu như các phương pháp

truyền thống chỉ tập trung trên một

số đối tượng vi sinh vật thì phương pháp sinh học phân tử có thể áp

dụng trên mọi đối tượng vi sinh

vật

Nói chung các phương pháp sinh học phân tử tập trung vào các

kỹ thuật chủ yếu là:

+ Phân tích acid nucleic

+ Phân tích protein

+ Phân tích

lipopolysaccharid

+ Hóa phân loại học

Trong phần này chúng tôi tập trung giới thiệu một số kỹ thuật

phân loại liên quan đến acid

nucleic Các phần sau chúng tôi

lần lượt giới thiệu các phương

pháp liên quan đến polysaccharid, lipoprotein và hóa phân loại

Phương pháp phát hiện dựa vào thay đổi màu:

Phương pháp đo màu có thể thực hiện trên môi trường dịch thể hay chất mang và khá nhạy so với phương pháp phát quang Người ta

đã tạo ra các cơ chất sinh màu khi

có mặt enzym (chẳng hạn như

Alkaline phosphatase) Lợi thế của phương pháp này là việc phát hiện đơn giản do kết quả là sự thay đổi màu dễ phát hiện và ứng dụng

trong các phòng thí nghiệm vi sinh vật

Một phương pháp có thể làm tăng độ nhạy của phản ứng màu

bằng cách thêm một enzym kích

hoạt phản ứng màu vào hệ thống Một ví dụ cho điều này là vai trò loại nhóm phosphat của phân tử

NADP thành NAD do Alkaline

phosphatase trong hệ thống phát

hiện mẫu dò nucleic Trong hệ

thống này thì NAD có vai trò kích hoạt chu trình oxy hoá mà có sự

tham gia của alcohol

dehydrogenease và diaphorase

Trong mỗi một chu trình thì NAD

sẽ bị khử thành NADPH + H+

Phản ứng oxy hoá này lại kèm theo phản ứng oxy hoá mà NADPH +

H+ lại bị oxy hoá thành NAD, mọi

phản ứng xảy ra gắn liền với việc khử ρ-indonitro-tetrazolium màu

tím thành formazan Sản phẩm

cuối cùng formazan được định

lượng bằng phép so màu (Self

1985)

Vietsciences- Dương Văn Hợp,

Nguyễn Lân Dũng