các kỹ thuật cơ bản trong công nghệ sinh học

các kỹ thuật cơ bản trong công nghệ sinh học

c





O   "!#"$%

& Ê '(")*+,"

ÿ Ê
 sao phҧ th sh prote

rҧ lӡ: Vì kh prote ӣ d th sh sӁ  hot tíh mh prote o đ thì  phҧ  d th kht a 

2

rҧ lӡ:  thӇ th sh bҵ đ d khô b tíh,  phươ php sҳ ký, ly tâm su tӕ, Như đ d ít dù

vì đ d hӍ th sh đưӧ ÿ lưӧ hӓ

3 Êau kh th sh, lm th o đӇ thu hұ prote mo muӕ

rҧ lӡ:
a  thӇ dù phươ php đ d xem  l bă

huҭ khô Phươ php khӕ phә sӁ úp kӇm tra  đo peptt m ta đã x đӏh trưӟ hay khô ay mӝt phươ php kh l m dӏh huǤh qua

Lưu ý: dù dù phươ php o thì trưӟ kh thu hұ

prote đӅu phҧ kӇm tr hot tíh prote xem  đú prote đ khô

& Ê -./012! )3"" 45

ÿ Êӟ thu hu

-Ê
ươ t o l ơ sӣ a v th v th h prote bҵ sҳ ký trao đә o (IE

-dù tro  quy trìh th h v th sh prote ҳ

ký trao đә o : 75%

ҳ ký  lӵ (A: 60% ҳ ký lӑ el (: 50%

2 ÊNuy tҳ

Ê au đ, prote đưӧ ht ra kh tă d lӵ o lm

tươ t o đ bӏ bҿ ãy Ӣ b y, t dù radet muӕ Nal tӯ ÿ

Lưu ý: ơ sӣ a IE l sӵ h trah vӏ trí a  hm thuӝ vo đ tíh phâ tӱ v lӵ o a mô trưӡ đm Kh  đӝ o h trah ao thì  o  th sӁ rӡ

ìh ҧh mh ho sҳ ký tro đә o

& Ê 6.,

ÿ

Ê Pha du dӏh đm hy sҳ ký
rs- l 50 m, P ,

 Nal 50 m (đm A

2 Êhuҭ bӏ mүu

-Ê â đưӧ 50 khoa tây, dù dao th hӓ v hӅ tro 50ml đm A bҵ my xay sh tӕ au đ tr my lӑ bҵ 50ml đm A
ә thӇ tíh đm phҧ dù l ÿ00ml

-Ê Ly tâm ÿ0 000 rpm/20 phút đӇ thu dӏh tro

-Ê Nu dӏh vү đө thì tp tө lӑ đӇ thu dӏh tro bҵ

-Ê au kh lӑ ta t hh đo OD bưӟ so A20

-Ê Đưa du dӏh mүu vӅ p  bҵ h bә su tӯ

3 Êhuҭ bӏ el

-Ê ӱ dө el DEAE-ellulose

-Ê el đã đưӧ huҭ bӏ trưӟ, đã lo bӓ  ht el hӓ, vӥ trô lơ lӱ

4 ÊNh ӝt el

-Ê a el tro 5 l thӇ tíh đm hy, đӇ lҳ, hút ( bӓ

 ht el hӓ lơ lӱ ӣ tr ho đ kh  ÿ,5 thӇ tíh

-Ê Rӱa v tr sh ӝt, lҳp dây dү ra vo đu dưӟ, ҳ ӝt

h đә 5ml ưӟ vo r bơm ra

-ho đӅu ӕ el r dù ppet ÿ000µl (đu ô ҳt to ph đu hút el v thҧ tӯ tӯ vo ӝt (trh to bӑt khí

-Ê Khӣ đӝ bơm ho dӏh đm hҧy ra v el lҳ xuӕ

thưӡ xuy ho đ kh lưӧ el lҳ đt thӇ tíh 5ml

-tӕ đӝ khoҧ 30-60ml/h Đây l bưӟ â bҵ ӝt

5 Êҳ mүu l ӝt

-Ê au kh   đӝ prote ba đu tap pha loã ra 

mүu

Ê Rӱa prote khô ҳ tr ӝt bҵ đm A Đo OD20 <

0 ÿ thì dӯ l

-Ê
hu l 500µl đӇ đ d sҧ phҭm

6 Ê
hu mүu

-Ê Rӱa ht mүu bҵ radet Nal tӯ 0 05 đ ÿ

-Ê ӱ dө my thu phâ đo đӇ thu l lưӧt 70 ӕ hm, mӛ ӕ ÿ ӑt mүu

-Ê
 hh đo OD20  ӕ hҹ thu đưӧ theo th tӵ

2,4,6,« 70 r thӕ k sӕ lu theo bҧ

7189

-Ê Prote  

-Ê Prote tә sӕ  

Du dӏh ht thô ba đu đem đ pha loã ÿ0 l r đo

OD ta thu đưӧ hӍ sӕ l 2,22(m/ml

ÔÊ
a : OD20  0 66 ˆ ÿm prote/ÿml dӏh mүu ÊProte tә sӕ thu đưӧ l:    660 5 (m

ˆÊ
hu đưӧ bҧ sӕ lu:

:& Ê ;"$<"=2 1>"+?>@= @!.2@!%"<>.A#

ÿ ÊĐә el

-Ê Đә el polyarylamde ha lӟp, el ô l 4% v el th l ÿ2%

-Ê Ph el th đưӧ đә trưӟ au kh trù hӧp ho

to,đә ph el ô

-Ê el ô trù hӧp ho to thì sau 30-60 phút thì sӱ dө

đӇ đ d

2 ÊĐ d

-Ê
 hh đ d: prote th sh, dӏh ht thô, dӏh l

ӝt, 
, rӱa ÿ0ml đu, phâ đo 26, 40, 42, 60

-Ê
rӝ ÿ0µl mүu vӟ 30µlđm mүu ( đӝ 4x Đһt vo t

-Ê Đm hy đ d l
rs-ly, P   ha D ÿ%

hy đ d vӟ đ th ә đӏh ÿ50V