Phân tích ý nghĩa của kỹ thuật nhuộm Toluidine blue trong xét nghiệm mơ bệnh học 2.. TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNGQuy trình xét nghiệm mơ bệnh học Cố định bệnh phẩm Chuyển mơ Lấy mẫu bệ
Trang 1TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
TS Dương Hồng Quân Trung tâm Xét nghiệm, Trường Đại học Y tế cơng cộng
Trang 2TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Chuẩn đầu ra bài học
Sau khi học xong, sinh viên cĩ khả năng :
1 Phân tích ý nghĩa của kỹ thuật nhuộm Toluidine blue trong xét nghiệm mơ bệnh học
2 Diễn giải quy trình nhuộm kỹ thuật nhuộm Toluidine blue
3 Liệt kê các vấn đề cần lưu ý khi thực hiện kỹ thuật Toluidine blue và cách khắc phục
4 Thực hiện thao tác kỹ thuật nhuộm Toluidine blue
Trang 3TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Quy trình xét nghiệm mơ bệnh học
Cố định bệnh phẩm
Chuyển mơ
Lấy mẫu
bệnh phẩm,
cắt lọc
Vùi bệnh phẩm
Phân tích/trả kết quả, lưu
trữ Cắt, dán
mảnh Nhuộm
Trang 4TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Nguyên tắc
- Thuốc nhuộm cĩ ái lực cao với các thành phần mơ cĩ tính axit, do
đĩ nhuộm các mơ giàu DNA và RNA
- Việc sử dụng Toluidine blue trong nhuộm mơ bệnh học làm nổi bật các thành phần như hạt tế bào Mast, chất nhày và sụn
Nhuộm Toluidine blue
Trang 5TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Áp dụng
- Thường áp dụng với mơ sống
- Trên lâm sàng áp dụng với mơ cắt lạnh tức thì trong mổ
Nhuộm Toluidine blue
Trang 6TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Chuẩn bị
- Bệnh phẩm được cắt cĩ độ dày 3-5µm và dán mảnh
- Thuốc nhuộm Toluidine blue
- Các hĩa chất khác: Cồn, Toluen, lam kính, lamen, bơm…
Nhuộm Toluidine blue
Trang 7TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Chuẩn bị thuốc nhuộm
1 Dung dịch gốc
- Toluidine blue: 0,5 g
- Cồn 70 o C: 500ml
Cĩ thể lưu trữ dung dịch này trong 6 tháng
Tránh ánh sáng và lửa
Nhuộm Toluidine blue
Trang 8TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Chuẩn bị thuốc nhuộm
2 Dung dịch làm việc
- Toluidine blue (gốc): 5ml
• Dung dịch NaCl 1%: 45ml
(Pha dung dịch NaCl 1%: NaCl 0,5 g và nước cất 50ml)
Nhuộm Toluidine blue
Trang 9TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Tiến hành nhuộm
1 Với bệnh phẩm cắt lạnh
- Nhúng lam kính chứa bệnh phẩm vào dung dịch làm việc Toluidine blue trong 15 giây
- Rửa nước
- Gắn bơm
Nhuộm Toluidine blue
Trang 10TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Tiến hành nhuộm
2 Với bệnh phẩm thường quy
- Mơ được cố định bằng Formol
- Tẩy paraffin
- Nhúng lam vào dung dịch làm việc Toluidin blue 1-2 phút
- Rửa trong nước cất 3 lần
- Làm mất nước nhanh bằng cồn 95 và cồn tuyệt đối
- Làm trong bằng xylen và gắn lamen (gắn bơm)
Nhuộm Toluidine blue
Trang 11TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Phiên giải kết quả
- Nhân tế bào: Màu xanh lơ đến xanh tím
- Bào tương: Màu xanh nhạt
Nhuộm Toluidine blue
Trang 12TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
https://www.saffronscientific.com/mast-cell-stain-toluidine-blue/
Ảnh các hạt trong bào tương tế bào mast
Nhuộm Toluidine blue
Trang 13TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
https://www.sciencephoto.com/keyword/toluidine-blue-stain
Mơ sụn nhuộm với toluidine blue
Nhuộm Toluidine blue
Trang 14TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
https://www.sciencephoto.com/keyword/toluidine-blue-stain
Mơ cơ vân nhuộm với toluidine blue
Nhuộm Toluidine blue
Trang 15TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
https://www.sciencephoto.com/keyword/toluidine-blue-stain
Mơ tuyến giáp ung thư nhuộm với Toluidine blue
Nhuộm Toluidine blue
Trang 16TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Câu 1: Phương pháp nhuộm nào sau đây khơng dùng để nhuộm tiêu bản tế bào học
A Nhuộm Giemsa
B Nhuộm Papanicolaou
C Nhuộm Toluidine blue
D Nhuộm P.A.S
Câu hỏi lượng giá
Trang 17TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Câu 2: Phương pháp tế bào học chọc hút bằng kim nhỏ chính xác hơn các phương pháp tế bào khác vì:
A Dễ thực hiện hơn
B Chủ động lấy đúng vị trí tổn thương
C Trực tiếp khám, đánh giá tính chất u
D B và C đúng
Câu hỏi lượng giá
Trang 18TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Xin chân thành cảm ơn!
Trang 19TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Trang 20TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG
Tài liệu phải học
1 Trường Đại học Y Hà Nội Giải phẫu bệnh vi thể lâm sàng, NXB Y học, 2013 ( Trang 71-72 )