Báo cáo-Sắc ký lớp mỏng

Nguyên tắc: Sắc ký lớp mỏng là phương pháp tách hỗn hợp bằng cách cho pha động di chuyển qua pha tĩnh.. Trong quá trình chuyển động qua lớp chất hấp thụ, nhờ các quá trình trong chất hấ

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NAM CẦN

THƠ KHOA DƯỢC

SẮC KÝ LỚP MỎNG

1

BÁO CÁO DƯỢC LIỆU

1

GVHD: Trì Kim Ngọc

Trần Minh Khoa

Nguyễn Anh Kiệt

Trần Hoàng Minh Đăng

Lê Trần Anh Kha

Trần Phúc Nguyễn Nhật Linh Nguyễn Thành Phú Mai Nguyễn Khánh

Quỳnh

Nội dung :

1 Nguyên tắc:

Sắc ký lớp mỏng là phương pháp tách hỗn hợp bằng

cách cho pha động di chuyển qua pha tĩnh Pha tĩnh

được rãi điều thành lớp mỏng trên tấm kính hoặc tấm kim loại Trong quá trình chuyển động qua lớp chất hấp thụ, nhờ các quá trình trong chất hấp thụ được lập đi lập lại nhiều lần từ đó thu được 1 sắc đồ trên lớp mỏng.

sự tách biệt của mực đen bởi sắc ký lớp mỏng

Sắc ký lớp mỏng được sử dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực :

Xét nghiệm độ tinh khiết của các hóa chất phóng

xạ trong dược khoa.

Xác định các sắc tố trong tế bào thực vật.

Phát hiện thuốc trừ sâu, thuốc diệt côn trùng

trong thức ăn, hoặc.

Nhận biết những hóa chất trong một chất cho

sẵn.

Giám sát các phản ứng hữu cơ.

Một số cải tiến có thể kết hợp phương pháp truyền thống để tự động hóa một vài bước, làm tăng độ dung giải của sắc ký lớp mỏng và cho số liệu

chính xác hơn Phương pháp này được gọi là sắc

ký lớp mỏng hiệu năng cao (high performance TLC

- HPTLC).

2 Pha tĩnh :

Là chất hấp phụ được chọn phù hợp

theo từng yêu cầu phân tích, được trải

thành lớp mỏng đồng nhất và được cố

định trên các phiến kính hoặc phiến kim

loại.

3 Pha động :

là một hệ dung môi đơn hoặc

đa thành phần được trộn với

nhau theo tỷ lệ quy định trong

từng chuyên luận.

.Trong quá trình di chuyển qua

lớp hấp phụ, các cấu tử trong

hỗn hợp mẫu thử được di

chuyển trên lớp mỏng, theo

hướng pha động, với những tốc

độ khác nhau.

máy phân tích sắc ký lớp mỏng

4 Kĩ thuật :

Phương pháp tiến hành giống với sắc ký giấy với lợi thế là nhanh hơn, tách hỗn hợp hiệu quả hơn, và có sự lựa chọn giữa các "pha tĩnh" khác nhau Bởi tính đơn giản và nhanh, sắc ký lớp mỏng thường được dùng để giám sát các phản ứng hóa học và phân tích chất lượng sản phẩm của phản

ứng

- Quá trình sắc ký lớp mỏng: một hỗn hợp của một hợp chất đỏ và một hợp chất lam được

tách biệt trong quá trình sắc ký (dung môi màu xanh nhạt di chuyển lên trên bản sắc ký

5 Các đại lượng đặc trưng của TLC :

a, Thời gian lưu

Trong đó: TM và TR là thời gian tương ứng để pha động và chất tan di chuyển được một quãng đường là dR

U: là tốc độ của pha động

b: hệ số dung lượng (K , )

C: là hệ số di chuyển R1

Đa số các quy trình TLC theo cơ chế phân bố, giá trị Rf trong

trường hợp lý tưởng được tính theo biểu thức sau

Trong đó: K là hệ số phân bố giữa hai pha α là tử số thể

tích của pha tĩnh và pha động

u

d

d

Ka

R f 1

1

K

R f 1

1

6 Phân tích :

Do một số hóa chất khi được tách ra sẽ trở nên không màu, một vài phương pháp được sử dụng

để quan sát những vệt này:

Thông thường, một lượng nhỏ chất huỳnh

quang, thường là maganese-activated zinc

silicate, được cho thêm vào chất hấp phụ để có thể quan sát được những vệt này dưới ánh sáng đen 

Hơi Iodine cũng là một loại thuốc thử cho màu giống nhau

Một số thuốc thử cho màu riêng biệt được

dùng để nhúng bản sắc ký vào, hoặc phun lên bản sắc ký

7 Ứng dụng :

Trong hóa học hữu cơ, phản ứng được giám sát chất lượng bởi sắc ký lớp mỏng Các mẫu thử

được thấm lên bản sắc ký bằng một ống mao

dẫn: một vệt nhỏ chất ban đầu, một vệt nhỏ từ hỗn hợp phản ứng, và một vệt nhỏ gồm cả hai chất Một bản sắc ký nhỏ (3 cm x 7 cm) sẽ mất khoảng khoảng hai, ba phút để vận hành Quá trình này phân tích chất lượng và sẽ chỉ ra nếu chất ban đầu biến mất, sản phẩm được tạo

thành, và bao nhiêu sản phẩm được tạo thành Tuy nhiên sắc ký lớp mỏng đối với các phản ứng xảy ra ở nhiệt độ thấp có thể cho ra kết quả

không đúng, bởi vì các mẫu thử sẽ được làm

ấm lên trong mao dẫn. 

Một ví dụ là sắc ký được áp dụng cho một phần

lá xanh (ở đây là rau chân vit) qua 7

bước. Carotene tách ra nhanh chóng và chỉ

quan sát được cho đến bước 2. Chlorophyll A và

B hiện rõ ở giữa bản sắc ký trong bước cuối

cùng và lutein là hợp chất đầu tiên nhuộm màu vàng lên bản sắc ký

Bước 1 Bước 2 Bước 3 Bước 4 Bước 5 Bước

6 Bước 7

CÂU HỎI LƯỢNG GIÁ

Câu 1: Cơ chế chủ yếu của sắc ký lớp mỏng là:

A Sắc ký rây phân tử

B Sắc ký ái lực

C Sắc ký hấp phụ

D Sắc ký trao đổi ion

Câu 2: Phương pháp sắc ký lớp mỏng là

phương pháp sắc ký:

A Có pha động và pha tĩnh ở thể lỏng

B Có pha động ở thể lỏng

C Chỉ có cơ chế hấp phụ

D Có pha động và pha tĩnh ở thể rắn

Câu 3: Các yếu tố ảnh hưởng đến hệ số lưu trữ

A Môi trường

B Dung môi

C Phương pháp triển khai sắc ký

D Cả A và C đúng

Câu 4: Các nhóm chức có khả năng hấp phụ tăng dần

A

OCH3<COOR<C=O<CH=CH<CHO<SH<OH

B

CH=CH<OCH3<COOR<C=O<CHO<SH<OH

C

OCH3<COOR<C=O<CHO<SH<OH<CH=CH

D

OCH3<CH=CH<C=O<CHO<SH<OH<COOR

Câu 5: Trong sắc ký lớp mỏng chất hấp phụ thường là:

A Kieselguhr, oxyd nhôm

B Than, cát biển

C Silicagel, Magnesi diphosphat

D Silicagel, cellulose

Câu 6: Ai là người đã hoàn thiện phương

pháp sắc ký lớp mỏng

A Mikhail Tsvet

B.Stahl

C.Martin & Synge

D Izmailov & Synge