enzyme Pectinase

Thu nhận pectinase * Chọn giống vi sinh vật * Môi trường nuôi cấy * Chế phẩm Pectinase thô * Tinh sạch... Yếu tố ảnh hưởng nuôi cấy thu nhận pecinase Tỷ lệ cấy giống.[r]

Trường Đại học Bách Khoa – Tp.HCM

2

Cơ chất pectin Enzyme pectinase

NỘI DUNG

CƠ CHẤT PECTIN

Cấu tạo

Là dẫn xuất của acid pectic- một polymer của

acid D-galacturonic liên kết với nhau bằng

liên kết α1,4-glucoside

Tính chất

Tan trong nước, không tan trong ethanol

Có khả năng tạo gel bền Khả năng tạo gel phụ thuộc:

o Chiều dài của chuỗi polymer

o Mức độ ester hóa (methoxyl hóa)

2

Cơ chất pectin Enzyme pectinase

NỘI DUNG

Phân loại

Cơ chế tác dụng Thu nhận

Tinh sạch Ứng dụng

E

- Enzyme xúc tác thủy phân

liên kết ester hoặc glucoside

trong mạch polymer của pectin

PECTINASE

- Sản phẩm của quá trình này là acid

galacturonic, galactose, arabinose, methanol…

transeliminase

( PTE)

Polygalacturonate – transeliminase

2 Cơ chế tác dụng

Yếu tố ảnh hưởng nuôi cấy

thu nhận pecinase

Tỷ lệ cấy giống pH đầu

Nhiệt độ

Sục khí Khuấy trộn

• Cấy sợi nấm

Sản phẩm LÊN MEN

Sản phẩm LÊN MEN SẤY

PECTINASE THÔ

PECTINASE THÔ

KẾT TỦA

KẾT TỦA

LY TÂ

M

LY TÂ

M

SẤY

NGHIỀN

BẢO QUẢN

BẢO QUẢN

Tách sợi nấm

Canh trường Pectinase

Canh trường Pectinase

CÔ ĐẶC

CÔ ĐẶC

TỦA

SẤY PHUN

SẤY PHUN

ĐÓNG

GÓI

ĐÓNG

GÓI

• Tăng hoạt tính enzyme

• Hiệu quả kinh tế  giá thành sản phẩm.

• Chế phẩm tinh khiết  mục đích nghiên

cứu, ứng dụng y học

4 Tinh sạch

Ý nghĩa

• Lựa chọn phương pháp & kết hợp chúng

• Tạo nên quy trình tinh sạch hài hòa &

hiệu quả cao

Vấn đề

• Chế phẩm trong đó chỉ chứa một loại enzyme nhất định

với hàm lượng cao

Phương pháp hiện đại tinh sạch pectinase

Khử muối: Lọc gel Biogel 100

Tách protein

• Trao đổi anion DEAE Biogel A

• Trao đổi cation CM Biogel A

Tách pectinase: bằng aginate liên kết ngang

Tinh sạch: bằng FPLC

Vi sinh vật Loại enzyme Phương pháp

tinh sạch

Hiệu suất thu hôi %

Độ tinh sạch

Tác giả

Rhizopus

stolonifer

Polygalaturonase

Endo-Siêu lọc Kết tủa với ethanol CM-sepharose 6B Sephadex G-100

89.0 77.0 62.0 55.0

2.1 9.2 77.0 82.0

Manachini P.L.cs 1987

Bacillus sp. Exo-PG CM-Toyopearl

SuperQ-Toyopearl DEAE-Bio-Gel A (pH 9) DEAE-Bio-Gel A (pH 6) Bio-gel A-0.5m

52.0 44.0 25.0 11.0 8.4

1.3 11.0 22.0 137.0 284.0

Kobayashi T cs, 2001

Acrophialop

hora

nainiana

Pectinase ngoại bào

Sepharyl S-100 DEAE-Sepharose Sephadex G-50

4.8 9.2 9.4

122.0 81.0 66.6

Celestino cs , 2006

Một số nghiên cứu tinh sạch Pectinase

Tác dụng của pectinase:

- Làm tăng hiệu suất chiết rút dịch quả.

- Làm trong dịch quả, làm giảm độ nhớt của dịch quả giúp quá trình lọc được tốt hơn.

 Công nghệ sản xuất nước ép trái cây và rượu vang

5 Ứng dụng

Quy trình sản xuất nước nho

Rửa sạch

Gia nhiệt

( 85- 90 0 C )

Làm lạnh nhanh

Bổ sung pectinase

0,03 %

Ép lọc

Dịch lọc

Bổ sung pectinase

 Hiệu suất thu dịch ép

cao hơn ( tăng 14-30%).

 Quá trình làm trong dịch quả mất nhiều thời gian.

Bổ sung pectinase Không bổ sung pectinase

SO SÁNH QUÁ TRÌNH SẢN XUẤT NƯỚC QUẢ ÉP

TẠO TẾ BÀO TRẦN

 Hiệu suất thu được tế bào thấp

 Thành phần trong tế bào dễ bị ảnh hưởng bởi lực

cơ học và hoá học mất hoạt tính sinh học.

Cơ học Hóa học Sinh học

o Cách thực hiện đơn giản

o Tế bào không mất hoạt tính

khi xử lý bằng enzyme.

Huyền phù tb (100 vòng/pLy tâm ) Thu cặn

Rửa cặn

MS

Ly tâm Thu cặn

Bổ sung Pectinase và Cellulose

Một số ứng dụng khác

• Thu được dịch quả có nồng độ

chất khô cao hơn

CẢM ƠN CÔ VÀ CÁC BẠN

ĐÃ QUAN TÂM LẮNG NGHE !

Phụ lục 1: Các bước tinh sạch cụ thể