BÁO cáo THỰC HÀNH VI SINH KỸ THUẬT môi TRƯỜNG

 Khử trùng que cấy, lây một ít mẫu vi sinh vật, phải để nguội que cấy mới tiến hành lấy vi sinh vật.Chú ý: Nếu giọt nước tràn ra ngoài lam kính thì dùng giấy thấm bớt nước hoặc dùng vae

Bộ tài nguyên & Môi trờng trờng đại học tài nguyên & môi trờng hà nội

Mục Lục

1

BÁO CÁO THỰC HÀNH:

VI SINH KỸ THUẬT MễI TRƯỜNG

Trang Bài 1: Nội quy phòng thí nghiệm và sử dụng kính hiển vi

Bài 1: Nội quy phòng thí nghiệm và sử dụng

kính hiển vi

I Nội quy

II Cách sử dụng kính hiển vi

3

1 Cấu tạo của kính hiển vi

3 Một số dụng cụ :

4

 Khử trùng que cấy, lây một ít mẫu vi sinh vật, phải để nguội que cấy mới tiến hành lấy vi sinh vật.

Chú ý: Nếu giọt nước tràn ra ngoài lam kính thì dùng giấy thấm bớt nước hoặc dùng vaelin bôi quanh mép lam kính để giọt dung dịch không bị khô.

vi quang học

thị kính và tay chỉnh ốc vi cấp ( chỉnh thô để đưa tiêu bản lên) cho tới khi nhìn thấy ảnh mờ của sinh vật cần quan sát

nhìn rõ vsv hơn

điều chỉnh sao cho vật kính chìm vào trong giọt dầu Điều chỉnh nút vi cấp sao cho nhìn thấy vsv một cách rõ nhất

IV Kết quả

Streptococus lactis : Là liên

cầu khuẩn lactic được sử dụngrộng rãi trong chế biến các sản

Tập trung,trôi theomảng

kínhcủa dạng cầu khuẩnlactic từ 0,5-1,5 μm, các tếm, các tếbào hình cầu xếp thànhtừng cặphoặc chuỗi cóchiều dài khác nhau

Kích thước tế bào trực

khuẩnLactic từ 1-8 μm, các tếm,trựckhuẩn thường đứng riêng

lẻ hoặc kết thành chuỗi

phẩm sữa như sữa chua,crem, bơ chua, phomat Khiđông tụ sữa các cụcvón chặt

và nhẵn được tạo thành

Bài 3: Quan sát tế bào vi khuẩn và nấm mốc

nhuộm đơn

I Mục đích, yêu cầu

men

III Cách tiến hành

1 Làm tiêu bản sống

 Dùng que cấy lấy một lượng mẫu vi sinh vật vừa đủ cho lên lam kính.( Đặt mẫu vi sinh vật ở giữa giọt xanh metylen ssau đó giàn đều ).

và 100X

2 Làm tiêu bản cố định

đó hơ trên ngọn lửa đèn cồn để cố định vi sinh vật

10X, 40X và 100X (với vật kính 100X khi quan sát ta phải sử dụng dầu soi)

3 Quan sát trên kính hiển vi

lại

vi không có đèn)

chỉnh thô để đưa tiêu bản lên xuống sao cho từ đó ta xác định được điểm cần quan sát

bắt đầu điều chỉnh ở nút vi cấp để thấy hình ảnh của vi sinh vật rõ hơn

chỉnh để thị kính 100X sao cho đầu kim chìm trong giọt dầu Tiến hành quansát và điều chỉnh nút vi cấp để nhìn thấy hình ảnh của vi sinh vật một cách

rõ nhất

Kích thước tế bào trực

khuẩnLactic từ 1-8 μm, các tếm,trựckhuẩn thường đứng riêng

lẻ hoặc kết thành chuỗi

Streptococus lactis : Là liên

cầu khuẩn lactic được sử dụngrộng rãi trong chế biến các sảnphẩm sữa như sữa chua,crem, bơ chua, phomat Khiđông tụ sữa các cụcvón chặt

và nhẵn được tạo thành

số cơ chất trong tự nhiên, bào

tử nấm, tế bào nấm hoặc mộtđoạn sợi nấm có thể pháttriển thành một hệ sợi nấm cóhình dạng nhất định gọi làkhuẩn lạc nấm (Hình 4)

Hình 4

- Tế bào nấmmen có kíchthước lớn gấp từ5-10 lần so với

tế bào vi khuẩn

Chiều dài9÷10μm, các tếm x chiềurộng 2÷7 μm, các tếm)

Tế bào nấm menđược cấu tạo chủ yếu

từ các phần cơ bảnsau: thành tế bào,màng nguyên sinhchất, chất nguyênsinh, nhân, khôngbào, hạt dự trữ, tythể, ribosom

Thuộc cơ thểđơn bào Nấmmen thường cóhình dáng khácnhau (hình cầu,hình elip, hìnhbầu dục, hìnhdài )

Bài 4: Quan sát tế bào vi sinh vật ( nhuộm Gram)

nhuộm kép

I Mục đích, yêu cầu:

 Cách lấy giống vsv để làm tiêu bản:

ngọn lửa đèn cồn để khử trùng

que cấy vào lấy sinh khối của vsv ra

lần nữa

 Làm vào ống nghiệm

 Lắc đều ta được dung dịch huyền phù

Làm tiêu bản:

sau đó rửa lại bằng cồn

1-1.5p Sau đo rửa lại bằng nước

2 Quan sát dưới kính hiển vi

- Đặt tiêu bản vết bôi vừa làm ở trên vào giá để tiêu bản của kính hiển vi và cố định lại

- Tiến hành quan sát ở vật kính 4X, khi thấy hình ảnh mờ của vsv ta chuyển lên vật kính 10X và 40X

- Tiếp theo sử dụng dầu soi để soi vật kính 100X

có thể liên quan đến phân bàochất di truyền tạo nênnucleotid Các tiêm mao giúpcho sự vận động của chúng.

Có thể nuôi vi khuẩn trong môi trường rắn cóagar trong các hộp petri

để từng tế bào mọc thành khuẩn lạc dễ quansát hơn

Hình 6

có oxy hay có bổ sungthêm 5% CO2.

Hình thức dinhdưỡng là hóadưỡng hữu cơ,đòi hỏi môitrường nuôi cấyphải giàu chấtdinh dưỡng,phức tạp, có khảnăng lên men vàphân huỷsaccharose

Bài 5: Quan sát tế bào vi khuẩn răng miệng



II Cách tiến hành

1 Làm tiêu bản ép giọt

2 Quan sát trên kính hiển vi

kính hiển vi và kẹp lại

III Kết quả

x chiều dài (2.0÷8.0μm, các tếm)

Vi khuẩn cónhiều hìnhdạng (hìnhcầu, hìnhque, hìnhdấu phẩy,hình xoắn,hình sao )

Vi khuẩn gây sâu răng hiện diện ởmôi trường miệng của tất cả mọingười Giống như là một dịch bệnh

mà ai cũng mắc phải, ai cũng có vikhuẫn streptococcus mutans trongmiệng, kể cả những người không sâurăng bao giờ (Gọi là caries free)trong miệng của họ cũng có vi khuẫn.Các nhà khoa học ở viện PasteurParis đã cố gắng làm thử nghiệmthuốc chủng ngừa (vaccine) trênchuột và trên khỉ nhưng đến giờ vẫn

chưa thành công

Hình 9

Bài 6: Môi trường nuôi cấy vi sinh vật

I Môi trường đặc (thạch đĩa/đĩa thạch)

Môi trường thạch : Dùng micropipet lấy mẫu cho

vàocác đĩa thạch 0,1 ml

cho vi sinh vật phát triển

có các khuẩn lạc phát triển Đếm số khuẩn lạc Mỗi 1 chấm là 1 tế bào

II Môi trường lỏng

A(CFU/ml) = N/(n1.V.f1 + n2.V.f2 + + ni.V.fi)

Trong đó:

 ni : số lượng đĩa cấy tại độ pha bảng thứ i.10-1 (3đĩa)

 fi : độ pha loãng thứ i 10,10-1, 10-2, …

Nhận xét của giảng viên hướng dẫn

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………

………