7.THUC HANH VSV SH10.ppt

Gram positive, Staphylococcus aureusCó dạng hình cầu đk: 0,8-1, đứng tụ lại thành đám như chùm nho, không có vỏ, không có lông, không di động, không sinh bào tử nhuộm màu Gram dương... N

THỰC HÀNH VSV

• 1.Quan sát vi sinh v tậ

• 2.Lên men r uượ

• 3.Lên men lactic

–Nguyên liệu khác: Bông tăm, cồn đốt, nước cất

-Ti n hành:Làm tiêu b n soi tế ả ươi

+Đặt lên phiến kính 01 giọt thuốc nhuộm

+Dung que cấy lấy một vòng que cấy dịch có VSV đã chuẩn bị trước

+Đậy lamen và quan sát ở vật kính x40, x100

1.1.Nhuộm đơn phát hiện VSV

-Chu n b nh trênẩ ị ư

-Ti n hành:ế

+Làm vết bôi từ dịch có nấm men+Cố định tiêu bản (bằng cách hơ khô vết bôi rồi đốt bằng cồn)

+Nhuôm đơn:

• Phủ lên vết bôi 1 giọt thuốc nhuộm, để 1-3 phút

• Rửa nước, làm khô tiêu bản và quan sát ở vật kính x40, x100

II.Lên men rượu

– Rót sữa vào từng bì nilon buộc kín

– Đưa vào thùng xốp hay tủ ấm để duy trì nhiệt

– Sau 6-8h, sữa sẽ đông lại Sữa chua

HÌNH DẠNG MỘT SỐ LOÀI VI KHUẨN

Streptococcus pneumoniae

Streptococcus sp1

Khuẩn lạc Streptococcus sp1

Streptococcus sp2

Streptococcus

Khuẩn lạc Streptococcus sp2

Gram positive, Staphylococcus aureus

Có dạng hình cầu đk: 0,8-1, đứng tụ lại thành đám như chùm nho, không có vỏ, không có lông, không di động,

không sinh bào tử nhuộm màu Gram dương

Streptococcus- Ảnh KHVDT quét

Staphylococcus sp.

Streptococcus và Staphylococus

(Gram+)

Neisseria gonorhoeae

Lậu cầu khuẩn có dạng hình hạt cà phê, xếp thành từng đôi, không có vỏ không có lông, không sinh bào tử bắt màu Gram âm

Neisseria meningitidisNão mô cầu không có vỏ không có lông, không sinh bào tử bắt màu

Gram âm

Corynebacterium diphteriae

Trực khuẩn bạch hầu có hình thẳng dài 1-6x0,3-8µm có một hay hai đầu phình to như chùy, không có vỏ, không có lông, không sinh bào tử bắt màu Gram dương

Clostridium tetani

Listeria monocytogenes

Bacillus anthracis

Lactobacillus sp.

Escherichia coli

Kích thước 2-3 x 0,5 µm , có vỏ, có lông, di động, không sinh bào tử, bắt màu Gram âm

Khuẩn lạc E coli

Theodor Eschrich (1857 – 1911)

1885 Escherich tìm ra vi khuẩn Escherichia coli gây ra bệnh tiêu chảy

Salmonella là những trực khuẩn dài 0,6-0,8µm, có nhiều lông xung quanh thân, rất di động không có vỏ, không sinh bào tử, nhuộm Gram bắt màu Gram âm

Trực khuẩn thương hàn

Salmonella typhi

Shigella có dạng hình thẳng dài 1-3 µ m không có lông, không di động, không có vỏ, không sinh bào tử bắt màu Gram âm

Klebsiella pneumoniae

Gram âm, thường đứng thành đôi, không có lông, không di động, không sinh bào tử, có vỏ dày > 2-3 lần so với tế bào

Pseudomonas aeruginosa

Trực khuẩn mủ xanh thẳng hai đầu tròn, dài 1-5µm, rộng 0,5-1µm

ít khi có vỏ, có một lông ở một đầu, di động, không sinh bào tử, bắt màu Gram âm

Captocytophaga sp.

Proteus vulgaris

Gram negative, Pseudomonas fluorescens

Helicobacter pylori is a Gram negative bacteria

Nhuộm Ziehl-Nielsen (M tuberculosis)

Mycobacterium tuberculosis

Clostridium perfringens

(Gây bệnh hoại thư)

Phẩy khuẩn tả: Vibrio cholerae

Kích thước 2-4x0,3-0,6 µm VK có một lông ở đầu, rất di động, không có vỏ, không sinh nha bào, nhuộm bắt màu Gram âm, hiếu khí, MT có glucose có thể phát triển được trong điều kiện kị khí, phát triển tốt trong điều kiện

ph=8,5-9,0, nồng độ NaCl cao 3%, nhiệt độ thích hợp

370C, mọc được ở t0 5-400C

Các xoắn khuẩn gây bệnh

A Borrelia burgdorferi B Treponema pallidum

(Gây bệnh sốt hồi quy) ( Gây bệnh giang mai)

Treponema pallidum bacteria

Bệnh giang mai

LÊN MEN RƯỢU

* Bản chất hóa học:

Khi phân huỷ đường trong điều kiện kị khí VSV chuyển hydro từ NADH đến axetandehyt tạo thành rượu etylic để tái tạo NAD + sản phẩm tạo thành là etylic và CO 2

NADH NAD +

C 6 H 12 O 6 → CH 3 COCOOH → CH 3 CHO C 2 H 5 OH +CO 2 +113,4 KJ

*Vi sinh vật lên men:

Quá trình lên men rượu chủ yếu là do các nấm men thuộc chi Saccharomyces (S.cerevisiae, S ellipsoideus) hay Schizosaccharomyces pombe ) Ngoài ra, một số loài nấm mốc Mucor rouxi hay vi khuẩn Sarcina ventriculi cũng có khả năng lên men rượu etylic.

Phân tích định tính quá trình lên men

rượu

1.Ph n ng v i Ba(OH) ả ứ ớ 2: (Xác nh s có m t đị ự ặ

c a CO ủ 2 trong d ch lên men) ị

-Cho vào ng nghi m 5ml d ch lên men ố ệ ị

-Thêm 1ml dung d ch Ba(OH) ị 2 10%

- un nóng nh trên ng n l a èn c n Đ ẹ ọ ử đ ồ Để ắ l ng

N u có m t c a CO ế ặ ủ 2 s t o thành k t t a màu ẽ ạ ế ủ

trắng do s t o thành BaCO ự ạ 3 theo ph n ng : ả ứ

CO2 + Ba(OH)2 BaCO3↓ + H2O

Xác định khí CO2 trong dịch LMR

Hình dạng tế bào S cerevisiae

Hình dạng tế bào nấm men dưới kính hiển vi quang học

Hình vẽ A.Giả nấm men và B.bào tử nấm men

2.Phản ứng với kali bicromat :

(Xác định sự có mặt của rượu trong dịch

II LÊN MEN LACTIC

Vi sinh vật lên men:

- Lên men lactic dạng đồng hình chuyển hoá đường tạo thành sản phẩm chủ yếu là axit lactic (95%) gồm các chi: Streptococus (S cremoris, S lactis, S thermophillus) và Lactobacillus (L bulgaricus, L acidophillus, L cucumerris, L plantarum )

Lactobacillus acidophilus

Khuẩn lạc Lactobacillus acidophilus

VK lên men lactic đồng hình

S.cremoris Leuconostoc mesenteroides S.rhemophillus

Lactococcus lactis sp lactis

-Lên men lactic dị hình: Khi lên men các vi khuẩn nhóm này chỉ tạo ra 60% axit lactic, phần còn lại là axit axetic, rượu etylic, glyxerin và một vài sản phẩm khác Gồm các loài: L brasicar fermentatae, Leuconostoc mesenteroides, E coli

Leuconostoc mesenteroides sp cremoris

VK lãn men lactic dë hçnh

K t qu :ế ả Axit lactic chuy n sang d ng axetaldehyt ể ạ

axetic(CH3CHO) bay h i g p AgNOơ ặ 3 làm en gi y l c.đ ấ ọ