Bài 41. Sinh sản vô tính ở thực vật tài liệu, giáo án, bài giảng , luận văn, luận án, đồ án, bài tập lớn về tất cả các l...
Trang 2Kỹ thuật chuyển gen
Tạo AND tái tổ hợp
*Một số khái niệm:
- Kỹ thuật tạo AND tái tổ hợp là kỹ thuật gắn gen cần chuyển vào thể
truyền
- ADN tái tổ hợp là một phân tử ADN nhỏ được lắp ráp từ các đoạn ADN
lấy từ các tế bào khác nhau
- Thể truyền là một phân tử AND nhỏ có khả năng nhân đôi một cách độc
lập với hệ gen của tế bào cũng như có thể gắn vào hệ gen của tế bào.
*Một số khái niệm:
- Kỹ thuật tạo AND tái tổ hợp là kỹ thuật gắn gen cần chuyển vào thể
truyền
- ADN tái tổ hợp là một phân tử ADN nhỏ được lắp ráp từ các đoạn ADN
lấy từ các tế bào khác nhau
- Thể truyền là một phân tử AND nhỏ có khả năng nhân đôi một cách độc
lập với hệ gen của tế bào cũng như có thể gắn vào hệ gen của tế bào.
* Nguyên liệu:
+ ADN chứa gen cần chuyển.
+ Thể truyền : Plasmit (là ADN dạng vòng nằm trong tế bào chất của vi khuẩn và có khả năng tự nhân đôi độc lập với ADN vi khuẩn) hoặc thể thực khuẩn (là virut chỉ ký sinh trong vi khuẩn).
+ Enzim cắt (restrictaza) và enzim nối (ligaza).
* Nguyên liệu:
+ ADN chứa gen cần chuyển.
+ Thể truyền : Plasmit (là ADN dạng vòng nằm trong tế bào chất của vi khuẩn và có khả năng tự nhân đôi độc lập với ADN vi khuẩn) hoặc thể thực khuẩn (là virut chỉ ký sinh trong vi khuẩn).
+ Enzim cắt (restrictaza) và enzim nối (ligaza).
Đưa ADN tái tổ hợp vào tế bào nhận
– Dùng muối CaCl2 hoặc xung điện làm
dãn màng sinh chất của tế bào để ADN
tái tổ hợp dễ dàng đi qua màng.
– Dùng muối CaCl2 hoặc xung điện làm
dãn màng sinh chất của tế bào để ADN
tái tổ hợp dễ dàng đi qua màng.
Phân lập dòng tế bào chứa AND tái tổ hợp
– Chọn thể truyền có gen đánh dấu – Bằng các kỹ thuật nhất định nhận biết được sản phẩm đánh dấu.
– Phân lập dòng tế bào chứa gen đánh dấu.
– Chọn thể truyền có gen đánh dấu – Bằng các kỹ thuật nhất định nhận biết được sản phẩm đánh dấu.
– Phân lập dòng tế bào chứa gen đánh dấu.
* Cách tiến hành:
– Tách chiết thể truyền và gen cần chuyển ra khỏi tế bào – Xử lí bằng một loại enzim giới hạn (restrictaza) để tạo ra cùng 1 loại đầu dính
– Dùng enzim nối để gắn chúng tạo ADN tái tổ hợp
* Cách tiến hành:
– Tách chiết thể truyền và gen cần chuyển ra khỏi tế bào – Xử lí bằng một loại enzim giới hạn (restrictaza) để tạo ra cùng 1 loại đầu dính
– Dùng enzim nối để gắn chúng tạo ADN tái tổ hợp