ỨNG DỤNG PHẦN MỀM NTSYSpc ĐỂ THỐNG KÊ ĐẶC ĐIỂM DI TRUYỀN TRONG KỸ THUẬT DNA TRONG HỌC PHẦN SINH HỌC PHÂN TỬ Lê Thị Thu Phương, Võ Văn Thiệp Tóm tắt.. Ngành công nghệ sinh học đòi hỏi
Trang 1ỨNG DỤNG PHẦN MỀM NTSYSpc ĐỂ THỐNG KÊ ĐẶC ĐIỂM DI TRUYỀN TRONG KỸ THUẬT DNA TRONG HỌC PHẦN SINH HỌC
PHÂN TỬ
Lê Thị Thu Phương, Võ Văn Thiệp
Tóm tắt Ngày nay với sự phát triển của công nghệ thông tin rất mạnh mẽ, nó không chỉ được sử
dụng khắp mọi nơi mà còn ở mọi ngành, qua đó việc xử lý các vấn đề diễn ra nhanh hơn, đồng thời thu được những kết quả chính xác hơn, qua đó tiết kiệm được công sức của con người Ngành công nghệ sinh học đòi hỏi sự chính xác rất cao và tất nhiên là có nhiều vấn đề rất phức tạp, chính vì vậy việc phát minh
ra các phần mềm ứng dụng trong ngành công nghệ sinh học nói chung và sinh học phân tử nói riêng là rất quan trọng Numerical Taxonomy and Multivariate Analysis System for personal computer (NTSYScp)
là phần mềm dùng để thống kê đặc điểm di truyền trong kỹ thuật Axit Deoxyribo Nucleic (DNA) Dựa vào
kỹ thuật Phản ứng chuỗi trùng hợp (Polymerase Chain Reaction – PCR) mẫu DNA và sau đó điện di Thông thường trong tự nhiên về mặt hình thái có những động vật hay thực vật có hình dáng bề ngoài rất giống nhau nhưng về bản chất di truyền thì khác nhau Nên việc thống kê tính giống và khác nhau của quần thể hay cá thể là việc rất cần thiết trong việc chọn tạo giống cho sản xuất cũng như việc phòng trừ sâu bệnh
Từ khóa: NTSYScp, đặc điểm di truyền, công nghệ DNA
1 GIỚI THIỆU
Học phần “Sinh học phân tử” (Molecular biology) là môn khoa học nghiên cứu giới sinh vật hay các hiện tượng sinh vật ở mức độ phân tử, được bố trí ở học kỳ 4 của các lớp Sinh học,
hệ Đại học Mục đích của học phần “Sinh học phân tử” là giúp người học tìm hiểu mối tương tác giữa các hệ thống khác nhau trong tế bào bao gồm cả mối liên hệ và tương tác giữa các phân tử DNA, Axit ribonucleic (RNA), quá trình tổng hợp protein cũng như tìm hiểu cơ chế điều hòa những mối tương tác này Kiến thức về các mối tương tác trong từng đối tượng tế bào, mô, cơ quan, hệ cơ quan, cơ thể giúp ta tìm hiểu sâu hơn về học thuyết trung tâm (central Dogma) trong di truyền học từ đó có những can thiệp thích hợp để đưa đến những ứng dụng trong y dược học, nông nghiệp, công nghiệp, bảo vệ môi trường [3], [5] Để khai thác tốt các kiến thức này, đòi hỏi giảng viên cần phải áp dụng các công nghệ hiện đại, khoa học kỹ thuật vào trong các bài dạy Tuy nhiên, với thực tế hiện nay ở trường Đại học Quảng Bình thì vấn đề đó là khá khiêm tốn, chính vì vậy cần phải tận dụng các phần mềm ứng dụng trong ngành công nghệ sinh học nói chung và sinh học phân tử nói riêng là rất quan trọng NTSYScp (Numerical Taxonomy and Multivariate Analysis System for personal computer) là một trong các phần mềm có thể giúp giảng viên và sinh viên trong việc thống kê đặc điểm di truyền trong kỹ thuật DNA [4] Trong bài báo cáo này, chúng tôi mạnh dạn đưa ra một số hướng dẫn trong việc vận dụng NTSYScp để
Trang 2việc thống kê đặc điểm di truyền trong kỹ thuật DNA, từ đó giúp cho các bạn sinh viên có thể tiếp cận gần hơn với mục đích của học phần
2 CÁC THỰC HIỆN
2.1 Cửa sổ chính trong NTSYSpc:
Hình 1 Giao diện của NTSYSpc
Cửa sổ chính của NTSYSpc đượ minh họa ở Hình 1, trên đó chứa các trình đơn mà bạn
có thể lựa chọn, dưới đây là danh sách các lựa chọn:
- File: trong file là các trình đơn con mà bạn có thể lựa chọn, click vào biểu tượng "file"
để tải danh sách các trình đơn cần lựa chọn, để chọn trình đơn nào bạn chỉ cần left click vào biểu tượng đó [1]
- Options: Chứa đựng danh sách các thực đơn con, từ đó bạn có thể lựa chọn cấu hình (configurations) mặc định phục hồi (stores default) mục lục cấu hình sẽ đưa ra một cổng váo của tham số cho những chương trình tùy chọn cấu hình khác nhau, mục lục mặc định phục hồi sẽ lập lại tham số cấu hình trở về trạng thái ban đầu của nó [1]
- Help: bao gồm các chương trình con tìm kiếm, gúp đỡ cách thức sử dụng, thông tin về bản quyền đăng ký [1]
2.2 Customization option:
Trang 3Customization option cho phép dưa ra các tùy chọn về các modul mà bạn muốn, click vào "customize" để tải chương trình xuống, xuất ra một cửa sổ dao diện, được thể hiện ở Hình 2, trong cửa sổ bên trái chứa các danh sách lựa chon bạn dùng chuột rê danh sách để lựa chọn click vào biểu tượng danh sách, muốn thêm vào một danh sách sử dụng trong thư mục bên trái click vào biểu tượng tương ứng để thay đổi một modul trong thư mục sử dụng right click tên của nó, chọn "add/remove" nhấn nút OK để đóng chương trình
Hình 2 Giao diện của Customization option
2.3 Ứng dụng trong việc thống kê đặc điểm di truyền trong kỹ thuật DNA
2.3.1 Sơ đồ tổng quát của việc thống kê đặc điểm di truyền trong kỹ thuật DNA
Sơ đồ tổng quát của thống kê đặc điểm di truyền trong kỹ thuật DNA được minh họa trong Sơ đồ 1
Sơ đồ 1 Tổng quát của NTSYSpc
Trang 42.3.2 Sử dụng tiến trình PCR (Polymera Chain Reaction) và điện di đọc kết quả trên bảng gel
Ví dụ ta có kết quả sau khi chạy điện di được thể hiện ở Bảng 1
Bảng 1 Kết quả điện di
1 - - - -
2 - - - -
3 - - - -
4 - - - -
5 - - - -
6 - - - -
7 - - - -
8 - - - -
9 - - - - Chú thích:
“-“: Vạch phát sáng sau khi chạy điện di hay còn gọi là Band và đó cũng chính là alen
Để sử dụng chương trình được ta phải mã hóa bảng số liệu trên thành bảng nhị phân Cụ thể: So hàng ngang mẫu nào có vạch “-“ thì đánh số 1 và mẫu nào không có vạch thì đánh số 0,
và cứ thế đánh cho đến hết số vạch của mẫu
Với cách làm như trên ta có bảng số liệu mã hóa từ bảng điện di ở Bảng 1 được minh họa bằng Bảng 2
Bảng 2 Số liệu mã hóa từ bảng điện di
2.3.3 Nhập số liệu vào Excel
Trong cửa sổ Excel chúng ta tiến hành nhập số liệu cho ví dụ trên như sau:
- Hàng 3, cột 1: nhập số 1, đó là số hiển thị một bảng chung
- Hàng 3, cột 2: nhập số vạch điện di gọi là band hay alen (số hàng của ma trận)
- Hàng 3, cột 3: nhập số cột trong bảng mã hóa hay số giống cần thống kê
Trang 5- Hàng 3, cột 4: nếu nhập số 0 có nghĩa là chúng ta xác định thống kê không có sự sai sót còn nếu nhập số 1 là có sự sai sót
- Sau khi nhập xong ta lưu tập tin ở nơi dể nhớ để thực hiên các bước tiếp theo
- Ở ví dụ này chung ta lưu với tên Thiep-NTSYSPC.xtl như Hình 3
Hình 3 Số liệu mã hóa sau khi nhập vào Excel
2.3.4 Nhập số liệu vào chương trình NTSYSpc
a Khởi động chương trình NTSYSpc
b Chạy chương trình NTSYSpc
- Từ cửa sổ NTSYSPC click chuột vào nút Similarity
- Tiếp theo chọn Qualitative data
Sau khi chọn sẻ xuất hiện cửa sổ minh họa ở Hình 4
Hình 4 Giao diện Qualitative data
Trang 6Trong đó:
- Input file: dùng để nhập tên tập tin mà ta đã nhập vào bảng Excel trên
- By row?: Nếu chúng ta nhập số liệu bằng hàng thì mới khai báo còn không thì để trống
- Output file: đặt tên và chon nơi để lưu tên tập tin sau khi chạy chương trình
- Sau khi điền đầy đủ các thông tin cửa sổ xuất hiện như minh họa trong Hình 5
Hình 5 Giao diện sau khi điền đầy đủ thông tin Qualitative data
Tiếp đó chúng ta bấm nút “Compute”, chương trình sẽ xuất hiện cửa sổ Report listing như Hình 6
Trang 7Hình 6 Giao diện cửa sổ Report listing
Từ cửa sổ Report listing vào file và chọn load notebook và chọn file NTSYSPC đã lưu ở trên
Hình 7 Giao diện Load notebook
Trang 8Sau đó sẽ xuất hiện bảng Reload notebook file (Hình 7), chúng ta chọn file đã lưu (đuôi NTS) và Open Sẽ xuất hiện bảng kết quả như Hình 8
Hình 8 Kết quả thống kê
Đây chính là kết quả thống kê theo dạng số Tuy nhiên, kết quả dạng này rất khó nhìn kết quả, để đơn giản hơn ta dùng dạng biểu đồ bằng cách sau:
Từ cửa sổ NTSYSPC chọn nút Clustering, sau khi chọn xuất hiện cửa sổ, chúng ta chọn SAHN, cửa sổ sẽ xuất hiện giao diện như Hình 9
Trang 9Hình 9 Giao diện SAHN
Khi nhập xong nhấn nút compute sẻ xuất hiện cửa sổ Report listing,sau đó quay trở lại cửa sổ NTSYSPC chọn biểu tượng hình cây (nút Plot tree) gần nút start ở phía dưới góc trái màn hình, sẽ xuất hiện như Hình 10
Trang 10Hình 10 Giao diện Plot tree
Cuối cùng xuất hiện cửa sổ thống kê dạng cây như minh họa ở Hình 11
Trang 11
Hình 11 Kết quả thống kê dạng cây
Như vậy, chúng ta đã có một kết quả thống kê dạng cây rất rõ ràng
3 KẾT LUẬN
Với sự phát triển nhanh chóng của khoa học kỹ thuật thì việc ứng dụng công nghệ thông tin vào trong việc giảng dạy ở các cấp là rất cần thiết Tùy vào từng môn, học phần khác nhau mà
có thể ứng dụng các phần mềm không giống nhau [2] Trên đây chúng tôi ứng dụng một phần trong nhiều ứng dụng của phần mềm NTSYSpc, cụ thể dụng trong việc thống kê đặc điểm di truyền trong kỹ thuật DNA Dựa vào kỹ thuật PCR mẫu DNA và sau đó điện di Kết quả cuối cùng sẽ cho chúng ta một sờ đồ hình cây, giúp cho chúng ta biết được mối quan hệ họ hàng giữa các sinh vật với nhau, làm cơ sở cho việc chọn tạo giống cho sản xuất cũng như việc phòng trừ sâu bệnh
TÀI LIỆU THAM KHẢO
[1] Nguyễn Văn Cách (2005), Tin – Sinh học, NXB Khoa học và Kỹ thuật, Hà Nội
[2] Nguyễn Phúc Chỉnh, Phạm Đức Hậu (2007), Ứng dụng tin học trong nghiên cứu khoa học giáo
dục và dạy học sinh học, NXB Giáo dục
[3] Hồ Huỳnh Thùy Dương (1997), Sinh học phân tử, NXB Giáo dục
[4] Khuất Hữu Thanh (2006), Kỹ thuật gen, nguyên lí và ứng dụng, NXB Khoa học và Kỹ thuật, Hà
Nội
[5] Lê Đức Trình (2001), Sinh học phân tử của tế bào, NXB Khoa học và Kỹ thuật, Hà Nội