Tối ưu hóa chiết xuất chất chống oxy hóa phenolic từ vỏ nho (vitis vinifera l ) với sự hỗ trợ của sóng siêu âm bằng cách sử dụng phương pháp bề mặt đáp ứng

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨMKHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Học phần: THIẾT KẾ THÍ NGHIỆM & XỬ LÝ SỐ LIỆU Bài Báo Khoa Học: Tối ưu hóa chiết xuất chất chống oxy hóa phenolic từ vỏ nho

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM

KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM

Học phần:

THIẾT KẾ THÍ NGHIỆM & XỬ LÝ SỐ LIỆU

Bài Báo Khoa Học:

Tối ưu hóa chiết xuất chất chống oxy hóa phenolic từ vỏ nho (Vitis vinifera L.) với sự hỗ trợ của sóng siêu âm bằng cách sử dụng phương pháp bề mặt đáp ứng

GVHD: Nguyễn Văn Anh SVTH: Nhóm 1

Đinh Nguyễn Huỳnh Như 2005180166 09DHTP4

Đỗ Nguyễn Trúc An 2005180439 09DHTP4 Ngô Thị Hồng Đào 2028170212 08DHDD2 Trần Lê Thanh Ngân 2005190365 10DHTP4 Nguyễn Minh Tuấn 2022190306 10DHDB2

Nội dung chính

 Chiết suất bằng sóng siêu âm

 Đo TPC và TPC-280

 Khả năng quét gốc tự do DPPH

 Thử nghiệm ORAC

 Phân tích HPLC-DAD

 Thiết kế thử nghiệm RSM

 Thí nghiệm đơn yếu tố

 Tối ưu hóa bằng RSM

 Hệ số hồi quy và phân tích bề mặt đáp ứng

 Xác nhận thử nghiệm mô hình

Cách thức tiến hành thí nghiệm

Cách thức xử lý số liệu

Cách thức tiến hành thí nghiệm

 Axit clohydric

 Ethanol RPE

 Axit gallic

 Trolox (6-hydroxy-2,5,7,8-axit tetramethylchroman-2-cacboxylic)

 DPPH (2,2-diphenyl-1picrylhydrazyl)

 Đệm phốt phát

 Fluorescein

 AAPH (2,20-azobit (2-methylpropionamidine) dihydrochloride)

 Thuốc thử folin – ciocalteu

 Nước cấp HPLC

 Axit formic

 Axetonitril cho HPLC

Hóa chất

Cách thức tiến hành thí nghiệm

Chuẩn bị mẫu

Sấy nhiệt trong bóng tối

Nghiền thành bột bằng rây 1,5mmSàng

Cách thức tiến hành thí nghiệm

Chiết suất bằng sóng siêu âm

Được thực hiện trong một thiết bị siêu âm được điều khiển kỹ thuật số (3300EP SONICA, Ý) với tần

số cố định là 40 kHz và công suất siêu âm là 200W

Cách thức tiến hành thí nghiệm

Chiết suất bằng sóng siêu âm

Các biến: Nồng độ etanol, nhiệt độ và thời gian

Cách tiến hành:

- 0,2 g bột vỏ quả được chiết với 4 ml dung môi với hàm lượng ethanol cần thiết (chứa 1% axit clohydric)

- Ba mẫu đã được chuẩn bị cho mỗi lần chạy

- Hỗn dịch chiết được ly tâm ở tốc độ 15.000 vòng/phút trong 5 phút

- Phần nổi phía trên được lọc qua một bộ lọc xenlulozơ 0,45µm

và ngay lập tức được phân tích

Cách thức tiến hành thí nghiệm

Đo TPC và TPC-280

Tổng hàm lượng phenol được xác định bằng hai phương pháp

khác nhau:

Xét nghiệm Folin – Ciocalteu (FC)

1ml nước, 0,02ml mẫu chiết, 0,2ml thuốc

thử Folin và 0,8ml dung dịch natri

cacbonat 10% được trộn và định mức đến

3ml Độ hấp thu được đo ở bước sóng

765nm sau 90 phút

Đọc trực tiếp độ hấp thu ở bước sóng 280nm.

Mẫu được pha loãng bằng dung dịch ethanol 60% chứa axit clohydric 1% và đo độ hấp thụ ở bước sóng 280 nm

Tổng số phenol được biểu thị bằng đương lượng axit gallic trên một gam vỏ nho tính theo trọng lượng khô (mgGAE/gDW) bằng cách sử dụng đường chuẩn với axit gallic chuẩn

Cách thức tiến hành thí nghiệm

Đo TPC và TPC-280

Cách thức tiến hành thí nghiệm

Đo lường khả năng quét gốc tự do DPPH

Cách thức tiến hành thí nghiệm

Thử nghiệm ORAC

Cách thức tiến hành thí nghiệm

Phân tích HPLC-DAD

Cách thức tiến hành thí nghiệm

Thiết kế thử nghiệm RSM

Cách thức xử lý số liệu

Thí nghiệm đơn yếu tố

Cách thức xử lý số liệu

Tối ưu hóa bằng RSM

Cách thức xử lý số liệu

Hệ số hồi quy và phân tích bề mặt đáp ứng

Cách thức xử lý số liệu

Xác nhận thử nghiệm mô hình