Nghiên cứu chiết tách và thành phần chất màu anthocyanin trong rau dền đỏ

Mục đích nghiên cứu: - Nghiên cứu hiệu suất chiết tách anthocyanin từ rau dền đỏ phụ thuộc vào loại dung môi, nồng độ dung môi, thời gian chiết, chế độ cô đặc.. - Xác định thành phần chấ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG

NGUYÊN THỊ THANH NHÀN

NGHIÊN CỨU CHIÉT TÁCH VÀ

THANH PHAN CHAT MAU ANTHOCYANIN

TRONG RAU DEN DO

Chuyên ngành: Hóa hữu cơ

Mã số: 60.44.27

TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC

Đà Nẵng - Năm 2011

Công trình được hoàn thành tại

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG

Người hướng dẫn khoa học: PGS TS LÊ THỊ LIÊN THANH

Phản biện 1: TS ĐOÀN THỊ THU LOAN

Phản biện 2: PGS.TS TRẢN VĂN THẮNG

Luận văn được bảo vệ tại Hội đồng bảo vệ chấm Luận văn tốt nghiệp Thạc sĩ Khoa học họp tại Đại học Đà Nẵng vào

ngày 28 tháng I0 năm 2011

Có thể tìm hiểu luận văn tại:

- Trung tâm thông tin - Học liệu - Đại học Đà Nẵng

- Thư viện trường Đại học Sư Phạm,Đại học Đà Nẵng

MỞ ĐẦU

1 Lí do chọn đề tài:

- Hiện nay trong đời sống, con người vẫn phải sử dụng các chất màu

tổng hợp, với mức độ an toàn đối với sức khỏe con người không cao

Do đó việc nghiên cứu các chất màu tự nhiên thu hút sự quan tâm của

nhiều nhà khoa học

- Ở Việt Nam nguồn nguyên liệu rau, củ Quả rất đa dạng nhưng

chưa được nghiên cứu, ứng dụng có hiệu quả cao

- Hợp chất màu anthocyanin có nhiều trong các loại thực vật, tạo nên

màu sắc khác nhau cho rau, củ, quả Chúng không chỉ có màu sắc đẹp

mà còn mang nhiều tính chất được lý có lợi cho sức khỏe con người

- Tuy nhiên mỗi loại thực vật chứa hợp chất anthocyanin có cầu trúc

khác nhau dẫn đến màu sắc khác nhau Để lý giải một phần vẻ chất

màu anthocyanin có trong rau củ quả, tôi chọn đề tài “Wghiên cứu

chiết tách và thành phan chất màu anthocyanin trong rau dén d6”

2 Mục đích nghiên cứu:

- Nghiên cứu hiệu suất chiết tách anthocyanin từ rau dền đỏ phụ

thuộc vào loại dung môi, nồng độ dung môi, thời gian chiết, chế độ

cô đặc Từ đó lựa chọn và để xuất quy trình chiết tách anthocyanin từ

rau dền đỏ trong các điều kiện tối ưu

- Xác định thành phần chất màu anthocyanin và khả năng bền màu

của anthocyanin từ rau dền đỏ theo pH, nhiệt độ

3 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu:

3.1 Đối tượng nghiên cứu:

Đối tượng nghiên cứu là dịch chiết thu được từ rau dền đỏ ở

thành phố Đà Nẵng

3.2 Phạm ví nghiên cứu:

- Nghiên cứu một số yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất chiết tách anthocyanin từ rau dền đỏ như: loại dung môi, nồng độ dung môi,

thời gian chiết, chế độ cô đặc

- Lựa chọn và đề xuất quy trình chiết tách anthocyanin từ rau đền đỏ trong điều kiện phòng thí nghiệm

- Xác định thành phan chat mau anthocyanin chiét tach tir rau dén do

- Nghién ctru d6 bén mau của anthocyanin từ rau dền đỏ phụ thuộc

vào pH và nhiệt độ

4 Phương pháp nghiên cứu:

4.1 Nghiên cứu lí thuyết:

- Tìm hiểu lý thuyết và kết quả thực nghiệm về cây rau dền đỏ

- Tìm hiểu các phương pháp chiết tách anthocyanin, các yếu tố ảnh

hưởng đến hiệu suất chiết và độ bền màu của anthocyanin cùng một

số vấn đề khác có liên quan đến nội dung đề tài

4.2 Nghiên cứu thực nghiệm:

4.2.1 Phuong phap vat li:

- Xác định độ ẩm toàn phan bằng máy đo độ âm nhanh

4.2.2 Phương pháp hóa học:

- Trích lí anthocyanin với các loại dung môi khác nhau: ethanol/ nước trong HCl, methanol/ nước trong HCIL, ethanol/ nước trong CH;COOH

- Lam sach anthocyanin bang các dung môi: petrolium ether, ethyl

acetat, diethyl ether

4.2.3 Phuong phap hoa li:

- Xac dinh ham luong anthocyanin bang phuong phap pH vi sai

- Xác định mật độ quang của dung dịch bằng máy quang phổ UV — VIS

- Xác dinh thanh phan anthocyanin bang phương pháp sắc ký lỏng

cao áp (HPLC)

- Xác định độ bền màu của anthocyanin chiết tách từ rau dền đỏ theo

pH nhiệt độ bằng phương pháp so màu

5 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài:

5.1 Ý nghĩa khoa học của đề tài:

- Xac dinh thanh phan hop chat mau anthocyanin trong rau dén đỏ

- Lý giải độ bền màu của anthocyanin theo pH và nhiệt độ

5.2, Y nghia thực tiễn của đề tài :

- Dé xuat qui trinh chiét tach anthocyanin từ rau dên đỏ với hiệu suât

cao nhất thông qua các số liệu thực nghiệm tốt nhất của các yếu tố

ảnh hưởng đã nghiên cứu

- Để xuất pH và nhiệt độ thích hợp dé duy trì độ bền màu của

anthocyanin tir rau dén đỏ nhằm tăng cường sự phối hợp trong ứng

dụng màu thực phẩm

6 Bồ cục của luận văn: Ngoài phần mở đầu, kết luận, tài liệu tham

khảo và phụ lục trong luận văn gồm 3 phan

Chuong 1 Téng quan

Chương 2 Những nghiên cứu thực nghiệm

Chương 3 Kết quả và thảo luận

CHUONG 1 : TONG QUAN

1.1 DAC DIEM THUC VAT CUA CAY RAU DEN

1.1.1 Mô tả thực vật cây rau dén

1.1.2 Vùng phân bồ 1.2 THANH PHAN HOA HOC VA TINH CHAT DUOC LY 1.3 HOP CHAT ANTHOCYANIN

1.3.1 Cấu trúc của anthocyanin 1.3.2 Dic tinh quang pho cia anthocyanin

1.4 QUY TRINH CHIET TACH ANTHOCYANIN TU THUC

VAT VA CAC YEU TO ANH HUONG DEN HIEU SUAT CHIET TACH

1.4.1 Quy trình chiết tách anthocyanin từ thực vật 1.4.2 Các yếu tố ảnh hướng đến hiệu suất chiết anthocyanin từ thực vật

1.4.2.1 Ảnh hướng của dung môi 1.4.2.2 Ảnh hướng của thời gian chiết

1.5 MOT SO YEU TO ANH HUONG DEN DO BEN MAU CUA

ANTHOCYANIN

1.5.1 Ảnh hưởng của pH 1.5.2 Ảnh hưởng của nhiệt độ 1.6 TINH HiNH NGHIEN CUU VE ANTHOCYANIN TREN THE GIOI VA TRONG NUOC

1.6.1 Tình hình nghiên cứu về anthocyanin trén thé gidi

1.6.2 Tình hình nghiên cứu về anthocynin ở Việt nam

CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

NGHIÊN CỨU 2.1.NGUYÊN LIỆU

- Tén khoa hoc: Amaranthus tricolor

- Nguyên liệu: Rau dền đỏ trên địa bàn thành phố Đà Nẵng được thu

mua, lựa chọn loại có màu đỏ đậm, làm sạch, bảo quản ở nhiệt độ từ -

15°C dén -20°C ding làm mẫu nghiên cứu

2.2 HÓA CHÁT VÀ THIẾT BỊ THÍ NGHIỆM:

2.2.1 Hóa chất

2.2.2 Thiết bị dùng trong phân tích

2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.3.1 Phương pháp hóa lý

2.3.1.1 Phương pháp xác định hàm lượng anthocyanin

- Sử dụng phương pháp pH vi sai ( the pH diffrentinal method )

- Nguyên tắc của phương pháp: dựa trên sự đổi màu và thay đổi độ

hấp thụ của anthocyanin theo sự thay đổi pH Tại pH = 1,0 các

anthocyanin ở dạng muối oxinium ( còn gọi là catlon flavinium ) có

màu đó và độ hấp thụ cực đại Ở pH = 4,5 anthocyanin có dạng

carbinol không màu nên độ hấp thụ rất nhỏ, gần như bằng không

2.3.1.2 Phương pháp xác định độ bằn màu

- Độ bền màu được xác định bằng phần trăm màu còn lại

2.3.1.3 Phương pháp xác định thành phần anthocyanin

- Sử dụng phương pháp sắc kí lỏng cao áp (HPLC)

- Cơ sở của phương pháp là sử dụng loại cột không phân cực C18 để

tách chất cần phân tích, mẫu dịch chiết sẽ được cho vào cột và chúng

sẽ được hâp thụ trên cột ở các mức độ mạnh yêu khác nhau tùy

thuộc vào tính phân cực của chúng Quá trình này còn gọi là vi chiết pha ran

Sau đó sẽ chọn lựa các dung môi có độ phân cực thích hợp

để rửa lần lượt các chất ra khỏi cột theo nguyên tắc là các chất phân

cực sẽ dễ dàng bị rữa ra khỏi cột bởi dung môi phân cực và ngược lại

Chất cần phân tích thu được đem dịnh danh trên máy sắc kí lỏng cao áp Việc định danh anthoclanin trên HPLC được dựa trên nguyên tắc:

- Sử dụng chất chuẩn đề định danh chính xác tên hợp chất

- Phân tích hỗn hợp anthocyanin chuẩn và mẫu dịch chiết trong cùng một điều kiện HPLC

- Trong cùng điều kiện phân tích, nếu trong mẫu dịch chiết xuất hiện peak có thời gian lưu trùng với thời gian lưu của peak anthicyanin

chuẩn thì ta kết luận trong dịch chiết có chứa anthocyanin

2.3.2 Phương pháp hóa học 2.3.2.1 Phương pháp định tính anthocyanin

- Dựa trên nguyên tắc anthocyanin thay đổi màu theo pH

2.3.2.2 Phương pháp pha các dung dịch đệm

2.3.2.3 Sơ đồ nghiên cứu

Nguyên liệu tươi | Xác định độ âm toàn phần

Vv

Ỳ

Xử lý > Làm sạch, để

lạnh đông từ - Nghiên

0

Định tính 20°C

Loai dung m6i

Dungmôi | Điều kiện chiết tách

Nông đô dung môi

Vv

Thoi gian chiét Xác định hàm lượng

anthocyanin

Điêu kiện cô đặc

Đề xuất

quy trình chiết tách

tir rau dén do

Ỷ

chât màu anthocyanin anthocyanin trong rau

Theo pH Theo nhiệt

độ

Hình 2.2: Sơ đồ nghiên cứu thực nghiệm

10 CHƯƠNG 3: KÉT QUÁ VÀ THẢO LUẬN

ANTHOCYANIN TU RAU DEN ĐỎ 3.1.1 Dinh tinh anthocyanin trong rau dén dé

- Tiến hành xay nhỏ nguyén liéu, loc lay 5 ml dich trong, pha loãng bằng các dung dịch đệm có pH = 1.0; 4,5 và 9,0

- Quan sát màu định tính sự hiện diện của anthocyanin

- Quét phổ trong vùng nhìn thấy (2 = 450 — 700 nm) đối với mẫu pH

= 1,0 trên máy quang phé ké UV — VIS DR4000U dé tim bước sóng

hấp thụ cực dai ( Amax )-

Két qua cho thay:

-O pH = 1,0: dich chiết có màu đỏ

- Ở pH =4.5 : dịch chiết có màu tím nhạt

- Ở pH =9,0: dịch chiết có màu xanh

- Amax = 535 nm

Tu két qua trén cho thay:

- Dịch chiết của nguyên liệu rau dén đỏ thay đôi màu phụ thuộc vào

pH đúng quy luật của sự thay đối màu anthocyanin

- Dịch chiết của nguyên liệu rau dền đỏ có bước sóng hấp thụ cực đại 1a 535 nm nam trong vùng Amax cua anthocyanin (510nm + 540nm)

Với kết quả trên chứng tỏ trong rau dền đỏ có sự hiện diện của hợp chất màu anthocyanin

3.1.2 Nghiên cứu chọn lựa điều kiện ảnh hướng đến khả năng

chiết tách chất màu anthocyanin từ rau dền đỏ 3.1.2.1 Lựa chọn dung môi chiết

- Rau dền đỏ thu mua và làm sạch, cân lay 200¢/ 1 mẫu rồi để lạnh

nhÝt

b ở nhiệt độ khoảng -15 đến -20°C

II

- Sau đó tiến hành nghiền nhỏ và ngâm trích li trong các hệ dung

môi:

+ Ethanol/nước (1/1; 1% HCI): 200ml ethanol, 200ml nước, 4ml

HCl

+ Ethanol/nước (1/1; 1% CH;COOH): 200ml ethanol, 200ml nước,

4ml CH:COOH

+ Methanol/nước (1/1; 1% HCI): 200ml methanol, 200ml nước, 4ml

HCl

- Nhiệt d6 chiét tach 30°C, thoi gian chiét tach là 60 phút

- Sau khi ngâm trích nguyên liệu trong dung môi, chúng tôi tiến hành

lọc bằng máy lọc có độ chân không 720 mmHg, dịch lọc trong thu

được đem đi cô quay chân không ở nhiệt độ 50°C Trong quá trình cô

đặc chân khéng, tang dan ap suat tir 600 mmHg = 700 mmHg, dam

bảo dung dịch luôn sôi ở nhiệt độ 50C, thời gian cô quay 4 giò, tiếp

sau quá trình cô quay chân không là thực hiện ly tâm tách cặn trên

máy ly tâm lạnh với tốc độ khoảng 6000 vòng/phút

- Dịch chiết cuối cùng thu được đem đo mật độ quang tại À„max=535

nm ở pH=1,0 va pH=4,5 Từ đó có thể xác định hàm lượng

anthocyanin chiết từ rau dền đỏ theo các hệ dung môi khác nhau dựa

vào phương pháp pH vi saI

Kết quả hàm lượng anthocyanin thu nhận được từ rau dền đỏ

được trình bày trên bảng 3.1 và kết quả lượng anthoeyanin thu được

trong mẫu được biểu diễn trên đỗ thị hình 3

12

Bảng 3.1: Ảnh hưởng của các loại dung môi đến hàm lượng

anthocyanin thu được từ rau dên đỏ

Hàm lượng

(%)

Ị Hệ dung môi ethanol/nước 0,474

( 1/1; 1% HCI )

5 Hệ dung môi ethanol/nước 0,363

(1/1; 1% CH;COOH)

3 Hệ dung môi methanol/nước 0,244

( 1/1; 1% HCI ) _, 50,000

oD

=

2 20,000 + acetic)

5

5

T

Loại dung môi

Hình 3.1: Biểu đồ về ảnh hưởng của loại dung môi đến lượng anthocyanin thu dugc tu rau dén do ( mg/100g nguyén liéu )

13

Kết quả ở bảng 3.1 và đồ thị hình 3.1 cho thấy với 3 hệ dung

môi được khảo sát có cùng tỉ lệ pha, khi bổ sung 1% HCI hầu như

đều cho hàm lượng anthocyanin cao hon bé sung 1% CH;COOH

Trong 2 hệ dung môi khảo sát có bổ sung 1% HCI thì hệ dung môi

ethanol/nước (1/1) cho hàm lượng anthocyanin chiét tach cao hon hé

dung môi methanol/nước (1/1) Nguyên nhân chính là do HCI tạo

môi trường acid, đồng thời với ion CI do acid HCI phan li ra sẽ tao

muối clorua với anthocyanin, dẫn đến anthocyanin bền và không bị

thoái hóa nhiều trong quá trình chiết tách

Với kết quả của 3 thí nghiệm trên 3 loại dung môi trên,

chúng tôi lựa chọn hệ dung môi chiết tách chất màu anthocyanin từ

rau dền đỏ trong môi trường acid theo các thông số sau:

- Hệ dung môi ethanol/nước (1/1; 1% HCI ) cho hiệu suất chiết tách

anthocyanin cao, đồng thời cũng là dung môi an toàn, rẻ tiền, dễ

kiếm Sự lựa chọn này phù hợp với các điều kiện lựa chọn hệ dung

môi khi chiết tách anthocyanin từ thực vật

3.1.2.2 Nghiên cứu ảnh hướng của nông độ dung môi chiết

cthanol/nước trong môi trường acid HCI

Tiến hành thí nghiệm như mục 3.1.2.1 nhưng thay đối dung

môi trích li là:

- Ethanol/nước (1/1; 1% HCTI): 200ml ethanol, 200ml] nước, 4ml HCI

- Ethanol/nước (7⁄3; 1% HCI): 280ml ethanol, 120ml nước, 4ml HCI

Sau khi thí nghiệm và tính toán hàm lượng anthocyanin thu

nhận được từ rau dền đỏ của các mẫu, kết quả được trình bày trên

bảng 3.2

14

Bảng 3.2: Ảnh hưởng của nông độ dung môi đến hàm lượng

anthocyanin thu được từ rau dên đỏ

antho thu được (mg/ 100g (%) nguyên liệu)

Hệ dung môi

1 ethanol/nước 0,474 47,400

(1/1; 1% HCI )

2 Hệ dung môi 0,327 32,663

ethanol/nước ( 7/3; 1% HCI )

- Kết quả ở bảng 3.2 cho thấy, với hệ dung môi ethanol/nước có bố sung 1% HCI ở tỉ lệ pha ethanol/nước là 1/1 cho ham lượng anthocyanin cao hơn ở tỉ lệ pha ethanol/nước là 7/3

- Lựa chọn hệ dung môi ethanol/nước tỉ lệ 1/1 có bổ sung 1% HCl dé thure hién chiét tach anthocyanin tir rau dén do

3.1.2.3 Nghiên cứu ảnh hướng của thời gian chiết đến hiệu suất thu héi anthocyanin thu duoc tiv rau dén đỏ trong hệ dung môi ethanol/nuéc ( 1/1; 1% HCl)

Tiến hành thí nghiệm như mục 3.1.2.1 nhưng thay đổi dung môi trích l¡ là ethanol/nước (1/1; 1% HCI) và ngâm trích li trong các thời gian khác nhau: 30 phút, 60 phút, 90 phút, 120 phút

Sau khi thí nghiệm và tính toán: hàm lượng anthocyanin thu nhận được từ rau dên đỏ của các mâu được trình bày trên bảng 3.3 và

15

tổng lượng anthocyanin thu được từ nguyên liệu được biểu diễn trên

đồ thị hình 3.2

Bảng 3.3: Ảnh hưởng thời gian chiết đến hàm lượng anthocyanin thu

được từ rau dên đỏ trong hệ dung môi ethanol/nước (1/1; 1% HCl)

Hàm lượng anthocyanin

60,000

40,000 -

30,000 ¬

200004 1125

10,000 ¬ |

30 phút 60 phút 90 phút 120 phút

Thời gian, phút

Hình 3.2: Biêu đô về ảnh hưởng của thời gian chiết đến lượng

anthocyanin thu duoc tir rau dén dé ( mg/100g nguyén liéu )

16

Từ kết quả ở bảng 3.3 và đỗ thị hình 3.2 cho thấy khi thay đối thời gian chiết từ 30 phút lên 60 phút thì hàm lượn anthocyanin

thu được tăng nhanh, nhưng khi tăng từ 60 phút lên 90 phút, 120 phút thì hàm lượng anthocyanin có tăng, tuy nhiên tăng chậm và không đáng kể, đồng thời lượng tăng giảm dẫn Vì vậy chúng tôi chọn thời gian chiết là 60 phút để chiết anthocyanin từ rau dền đỏ trong hệ dung môi ethanol/nước (1/1; 1% HCl)

3.1.2.4 Nghiên cứu điều kiện cô đặc

Sau khi ngâm trích li nguyên liệu trong dung môi:

- Lọc chân không ở 720 mmHg Cô quay ở 50C, áp suất tăng dần từ

600 mmHg + 700 mmHg Cứ 30 phút một lần, lẫy mẫu ra xác định hàm lượng chất khô, đồng thời định mức về độ pha loãng ban đầu

trong dung dịch đệm pH = 1,0 đo độ hấp thụ tại bước sóng 535 nm,

tính tổn thất màu anthocyanin (% màu anthocyanin còn lại so với ban đầu) Kết quả được trình bày trên đồ thị hình 3.4; 3.5

s

é 95 4 83

@

E¬

0 30 60 90 120 150 180 210 240 270

Thời gian, phút Hình 3.3 : Tổn thất màu anthocyanin trong quá trình cô đặc theo thời

gian

ô,

On 20 ¬

g

—

=

“SS

T

17

50

40 -

30 -

10 ¬

0

45.6

34 26.8

12.51 14,12_18:

0 30 60 90 120 150 180 210 240 270

18

Xác định độ âm toàn phân

Thời gian, phút

Hình 3.4 : Sự thay đổi hàm lượng chất khô theo thời gian

Theo kết quả đỗ thị hình 3.5 cho thấy: khi thời gian vượt quá

240 phút thì nồng độ chất khô trong dung dịch tăng lên không đáng

kể, nguyên nhân do khi nồng độ tăng dẫn thì độ nhớt của dung dịch

cũng tăng dần làm cho quá trình bay hơi nước khó khăn hơn

Theo kết quả đồ thị hình 3.4 cho thấy: sau 270 phút thì tốn

thất màu lại tăng mạnh ( chỉ còn lại 80,23 %) Nguyên nhân do dịch

chiết trong môi trường acid HCI có pH thấp ( < 3,0) nên độ bền màu

của anthocyanin tương đối cao với tác nhân nhiệt Tuy nhiên, nếu kéo

đài thời gian cô đặc trong điều kiện nhiệt độ cao sẽ làm tăng khả

năng tách các gốc đường ra khỏi anthocyanin do phân cắt các liên kết

glycoside, dan dén 1am mat mau anthocyanin nhanh hon

Từ kết quả nghiên cứu trên, chúng tôi chọn điều kiện để thực

hiện quá trình cô đặc thu nhận chất màu anthocyammn là: độ chân

không 600 mmHg + 700 mmHg, nhiệt độ 50°C; thời gian 4 giờ

3.2 ĐÈ XUẤT QUY TRÌNH CHIẾT TACH CHAT MAU

ANTHOCYANIN TỪ RAU DÈN ĐỎ TRONG PHÒNG THÍ

NGHIỆM

Nguyên liệu Làm sạch èÌ -15 200%C | Nghiền nhỏ

Ỷ

Ly tâm tách Cô đặc 600 - vee chan Trich ly

tủa, 6000 700 mmHg, 720 mmHg 30°C,60

A

Loai tinh dau va cac hop chat tan trong dung môi không phân cực lq Petrolium ether

v

Bav hoi dung m6i

v Loại flavonoid không phải

Ethyl acetat

anthocvanin

Ỷ

Bav hoi dung m6i

Vv Làm kiêt nước ‹C Dietvl ether

Vv

Bay hơi dung môi Ềt- Dịch chiết (B)

ĐỀ Bảo quản

-15°¢ +-20°c Hinh 3.5: Quy trinh chiét tach anthocyanin tir rau dén do trong

phòng thi nghiệm

19

3.3 XÁC ĐỊNH THÀNH PHÀN CHAT MAU ANTHOCYANIN

TRONG RAU DEN DO

- Dich chiét dạng B được làm sạch trên cột C18, thu được dịch chiết

chứa anthocyanin dạng tinh Sau đó làm giàu anthocynam trên cột

SPE

- Tiếp theo tiễn hành định danh anthocyanin trong dịch chiết thu

được trên máy sắc kí lỏng cao áp (HPLC) trên cơ sở dựa vào các

peak của anthocyanin chuẩn

Kết quả phân tích cho các sắc đồ như ở hình 3.7 và hình 3.8

20

ba/ef Name Dịch chiet ra den đo fnjection Vokume: 15.0

bameke Type: unknown %⁄@/©fergtl: 520.9 Ponto! Program: Anthocianin Bandvedth 4 Quanta Methoo Anthocianin Dilution Factor 1.0000

Recording Time 7/14/2011 16:05 Samide Weight 1.0000

Run Tere {run} 25.00 Samet Amount 1.0000

ANTHOCIANIN #3 [modified by CAN) Dich chiet ra den do @W WS 1

5 43.40)

50-

40 +

20 4

10 -

H19 — ¬ ¬—————————

No | Ret.Time Peak Name Height Area RelArea Ameunt Type

Hình 3.8: Sắc đô của mẫu dịch chiết từ rau dễn đỏ

Từ hình 3.7, ta có kết quả phân tích hỗn hợp chất chuẩn

Sample NaMme: Mix anthicianin chuan injection Volume: 10.0

Quantff Method Anthocianin Difution Factor 1.0000

Recording Time 74 4/2011 15:34 Sample Weight: 1.0000

80 ANTHOCIANIN #2 [modified by CA] Mix arthioianin chuan UY MS_1

604

l 40-

20¬

mn

0.0 28 5.0 75 10.0 125 16.0 179 20 ñ 225 250

Mo | Ret.Time Peak Name Height Area RelArea Amount Type

Hình 3.7: Sắc kí đồ của hỗn hợp chất chuẩn anthocyanin

14,283 Mavidin-3-Glucoside