BÁO CÁO THỰC TẬPĐỊNH TÍNH CÁC CYCLIN & ĐỊNH TÍNH PENICILLIN Bài 1: ĐỊNH TÍNH CÁC CYCLIN: A.. Nêu các phản ứng định tính chung của nhóm Cyclin: 3 phản ứng 1.. Nêu các phản ứng định danh
Trang 1BÁO CÁO THỰC TẬP
ĐỊNH TÍNH CÁC CYCLIN & ĐỊNH TÍNH PENICILLIN
Bài 1: ĐỊNH TÍNH CÁC CYCLIN:
A KIỂM TRA ĐẦU GIỜ:
1 Nêu các phản ứng định tính chung của nhóm Cyclin: 3 phản ứng
1 Phản ứng màu với FeCl3:
1.Tetracyclin HCl → Nâu sẫm
2 Oxytetracyclin HCl → Nâu sẫm
3 Doxycyclin HCl → Nâu sẫm
4 Clotetracyclin HCl → Vàng
2 Phản ứng khử với thuốc thử Fehling:
1.Tetracyclin HCl → Nâu
2 Oxytetracyclin HCl → Nâu
3 Doxycyclin HCl → Nâu
4 Clotetracyclin HCl → Xanh
3 Phản ứng phát huỳnh quang:
1.Tetracyclin HCl → Vàng
2 Oxytetracyclin HCl → Vàng
3 Doxycyclin HCl → Vàng
4 Clotetracyclin HCl → Xanh lơ
2 Nêu các phản ứng định danh của các kháng sinh thuộc nhóm cyclin?
Phản ứng màu với H2SO4 đđ:
1.Tetracyclin HCl → tím + H2O → Vàng
2 Oxytetracyclin HCl → Đỏ thắm + H2O → Vàng
3 Doxycyclin HCl → Vàng + H2O → Vàng
4 Clotetracyclin HCl → Xanh dương chuyển tím đậm + H2O → Vàng
3 Nêu các phản ứng định danh của nhóm penicillin:
1 Phản ứng màu với H2SO4đđ:
Penicillin G: → Vàng nhạt
Amoxicillin: → Vàng
2 Phản ứng với formaldehyde trong acid H2SO4:
Trang 2 Penicillin G: → Nâu đỏ
Amoxicillin: → Vàng nhạt
3 Phản ứng với thuốc thử Fehling:
Penicillin G: → Xanh thẫm
Amoxicillin: → Đỏ tím
4 Phản ứng với acid Cromotropic:
Penicillin G: → Nâu
Amoxicillin: → Đỏ tía sau đó chuyển sang tím
B KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM
Tên mẫu kiểm định: CÁC CYCLIN
ĐỊNH TÍNH CHUNG ( Đúng / không đúng )
1.Tạo màu với FeCl 3 Tetracyclin.HCl
Oxytetracyclin.HCl → Nâu sẫm.
Doxycyclin.HCl Clotetracyclin → Vàng
Vàng trong Vàng trong → nâu sẫm Vàng trong
Vàng đục → vàng đục
Đúng Đúng Đúng Đúng
2.Với thuốc thử Fehling Tetracyclin.HCl
Oxytetracyclin.HCl → Nâu Doxycyclin.HCl
Clotetracyclin → Xanh lá
Tủa đỏ Tủa đỏ → Nâu Xanh lá cây đậm
Tủa đỏ → xanh lá
Đúng Đúng Đúng Đúng
ĐỊNH TÍNH PHÂN BIỆT ( Đúng / không đúng )
Với H 2 SO 4 đậm đặc
Tetracyclin Đỏ tím + H 2 O → Vàng nâu đậm Đỏ tím + H 2 O→ Nâu vàng Đúng Oxytetracyclin Đỏ thắm + H 2 O → Vàng cam Đỏ thắm + H 2 O → Vàng cam Đúng Doxycyclin Vàng → Vàng Vàng + H 2 O → Vàng đen Đúng Clotetracyclin Xanh dương đậm → tím đậm + H 2 O → vàng cam Vàng + H 2 O → Vàng
tươi
Đúng
C CÂU HỎI CHUẨN BỊ CHO BÀI THỰC TẬP:
1 Các tiêu chuẩn kiểm tinh khiết doxycyclin hydroclorid theo DĐVN IV?
Tạp hấp thụ ánh sáng và các tạp liên quan
Kim loại nặng
Tro sulfat
Nước
Ethanol: 4,3-6%
Nội độc tố vi khuẩn
2 Phương pháp định lượng tetracyclin hydroclorid và doxycycline hydroclorid theo DĐVN IV?
Sắc ký lỏng hiệu năng cao ( HPLC)
Đo quang
Trang 3 3 Đề nghị các phương pháp khác để định lượng chloramphenicol?
Sắc ký lỏng hiệu năng cao ( HPLC)
Phương pháp vô cơ hóa : Clo toàn phần, đo Nitrit …
Phương pháp vi sinh
Đo quang (� max: 278nm) ( sách trình bày)
4 Đề nghị cơ chế phản ứng định tính chloramphenicol trong kiềm NaOH
Do có nhóm nitro thơm trong công thức cloramphenicol nên trong môi trường kiềm (NaOH) dưới xúc tác là nhiệt độ sẽ xuất hiện màu vàng → tiếp tục đun màu
sẽ chuyển dần sang màu cam
BÀI 2: ĐỊNH TÍNH PENICILLIN
A KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM:
Tên mẫu kiểm định: Kháng sinh Amoxicillin & Kháng sinh Penicillin G
ĐỊNH TÍNH CHUNG ( Đúng/ không đúng)
Phản ứng với Hydroxylamin hydroclorid
(NH 2 OH.HCl)
P: Tủa xanh ngọc A: Tủa xanh rêu
P: Tủa xanh ngọc A: Tủa xanh rêu
Penicillin Amoxicillin
ĐỊNH TÍNH PHÂN BIỆT ( đạt / không đạt )
A: màu vàng đậm P: Màu vàng nhạt A: Màu vàng Penicillin Amoxicillin
2.Phản ứng với Formaldehyd trong acid
H 2 SO 4
( HCHO/ H 2 SO 4 )
P: Nâu đỏ A: Vàng nhạt P: Nâu đỏ A: Vàng nhạt Penicillin Amoxicillin
A: Đỏ tím P: Xanh A: Đỏ tím Penicillin Amoxicillin
B CÂU HỎI CHUẨN BỊ CHO BÀI THỰC TẬP:
1 Đề nghị cơ chế phản ứng giữa amoxicillin với thuốc thử Fehling?
Amoxcillin tạo phức với Cu2+ → tạo phức màu tím (các nhóm chức tham gia tạo phức: amin bậc 1 và O của khung beta-lactam)
Màu của phản ứng thay đổi theo thời gian:
Tím → tím đỏ → đỏ tím → xanh đen → xanh lục (màu sắc thay đổi tùy lượng chế phẩm cho vào ban đầu
Ngoài ra do amoxicillin có tính khử , còn Cu2+ có tính oxi hóa → nên khi để lâu ammoxicillin bị oxy hóa thành các sản phẩm có màu
2 Giải thích phản ứng định tính chung các penicillin và Hydroxylamin?
Trang 4 Penicillin + Hydroxylamin → acid hydroxamic
acid hydroxamic + FeCl3 → màu đỏ
acid hydroxamic + CuSO4 → màu xanh lục
3 Các tiêu chuẩn kiểm tinh khiết amoxcicillin
PH
Gốc quay cực riêng
Tạp chất liên quan:
N,N-dimethylanilin
Acid 2-ethylhexanoic
Kim loại nặng
Nước
Nội độc tố vi khuẩn