Khảo sát thành phần hóa học cao ethyl acetate của lá cây sú trắng aegiceras floridum roem schult họ sú aegicerataceae

TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2015 - 2016 ĐỀ TÀI

TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN

BÁO CÁO TỔNG KẾT

ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2015 - 2016

ĐỀ TÀI

KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO

ETH ACETATE CỦA Á C SÖ TRẮNG

AEGICERAS FLORIDUM ROEM.& SCHULT

HỌ SÖ AEGICERATACEAE)

TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN

BÁO CÁO TỔNG KẾT

ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2015 – 2016

ĐỀ TÀI

KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO

ETH ACETATE CỦA Á C SÖ TRẮNG

AEGICERAS FLORIDUMROEM.& SCHULT

HỌ SÖ AEGICERATACEAE)

Sinh viên thực hiện: Mai Thị Tuyết Nam/ Nữ : Nữ

Dân tộc: Kinh Năm thứ: 4/ Số năm đào tạo: 4 Lớp D12HHHC – Khoa Khoa Học Tự Nhiên

Ngành học: Hóa Học

Người hướng dẫn: ThS Lưu Huỳnh Vạn Long

THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI

1 Thông tin chung:

- Tên đề tài: Khảo s t thành ph n hóa học cao ethyl acetate c a l cây s tr ng

Aegiceras floridum Roem.& Schult Họ S Aegicerataceae)

- Sinh viên thực hiện: Mai Thị Tuyết

- Lớp: D12HHHCKhoa: Khoa Học Tự Nhiên Năm thứ: 4 Số năm đào tạo:4

- Người hướng dẫn: ThS Lưu Huỳnh Vạn Long

Aegiceras floridum (cây Sú tr ng) này

4 Kết quả nghiên cứu:

- Kết quả c a đề tài s góp ph n sung vào đ c đi m Hóa- Thực v t c a chi

- Báo cáo t ng kết đề tài

5 Đóng góp về mặt kinh tế - xã hội, giáo dục và đào tạo, an ninh, quốc phòng và khả năng áp dụng của đề tài:

- Đề tài này cung cấp cho sinh viên khoa Ho học những kiến thức về: phương

ph p cô l p tinh chế c c hợp chất có nguồn gốc thiên nhiên phương ph p x c định cấu tr c c c hợp chất thông qua c c phương ph p ph hiện đại IR NMR-1D 2D và khối ph MS

UBND TỈNH BÌNH DƯƠNG CỘNG HÕA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM

Kết quả c a đề tài này dự kiến s được công ố trên c c tạp ch hóa học

6 Công bố khoa học của sinh viên từ kết quả nghiên cứu của đề tài (ghi rõ họ tên

tác giả, nhan đề và các yếu tố về xuất bản nếu có) ho c nh n xét đ nh gi c a cơ s

đã p dụng c c kết quả nghiên cứu (nếu có):

Ngày tháng năm 2016

Sinh viên chịu trách nhiệm chính

thực hiện đề tài

(ký, họ và tên)

Nhận xét của người hướng dẫn về những đóng góp khoa học của sinh viên thực

hiện đề tài (phần này do người hướng dẫn ghi):

………

………

………

……… Ngày tháng năm 2016

Xác nhận của lãnh đạo khoa

(ký, họ và tên)

Người hướng dẫn

(ký, họ và tên)

THÔNG TIN VỀ SINH VIÊN CHỊU TRÁCH NHIỆM CHÍNH THỰC HIỆN ĐỀ TÀI

I SƠ ƯỢC VỀ SINH VIÊN:

Họ và tên: Mai Thị Tuyết

Sinh ngày: 12 th ng 10 năm 1994

Nơi sinh: Quảng Nam

Lớp: D12HHHC Khóa: 2012-2016

Khoa: Khoa Học Tự Nhiên

Địa chỉ liên hệ: Ph Hòa - TP Th D u Một- Bình Dương

Điện thoại: 01685751291 Email: maituyet1210@gmail.com

II QUÁ TRÌNH HỌC TẬP kê khai thành t ch c a sinh viên từ năm thứ 1 đến năm

Ảnh 4x6

Trong quá trình làm việc để hoàn thành đề tài nghiên cứu khoa học này

em đã nhận được sự giúp đỡ, hướng dẫn tận tình của Thầy Lưu Huỳnh Vạn Long cũng như các Thầy Cô trong bộ môn hóa hữu cơ, khoa Khoa học tự nhiên của trường Đại Học Thủ Dầu Một

Qua đây em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Thầy Lưu Huỳnh Vạn Long , người đã trực tiếp hướng dẫn em làm đề tài nghiên cứu khoa học này, rèn luyện cho em cách thức thực hiện - quản lý công việc trong hoạt động NCKH Qua việc hoàn thành đề tài giúp em hiểu sâu hơn các kiến thức cơ bản cũng như các ứng dụng khoa học của môn Hóa Hữu Cơ trong cuộc sống của chúng ta

Trong khoảng thời gian nghiên cứu ngắn ngủi, kiến thức của em còn nhiều

bỡ ngỡ Do vậy, không tránh khỏi những thiếu sót là điều chắc chắn, em rất mong nhận được những ý kiến đóng góp quý báu của quý Thầy, Cô giúp cho đề tài nghiên cứu khoa học hoàn thiện hơn

Cuối lời em xin chúc quý Thầy Cô dồi dào sức khỏe, hạnh phúc và niềm tin

để tiếp tục là người truyền đạt kiến thức ươn mầm cho thế hệ mai sau

Sinh viên

Mai Thị Tuyết

MỤC ỤC

MỤC LỤC i

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU iii

DANH MỤC BẢNG BIỂU iv

DANH MỤC SƠ ĐỒ iv

DANH MỤC HÌNH iv

MỞ ĐẦU 1

1 T ng quan tình hình nghiên cứu thuộc lĩnh vực đề tài 1

2 Lý do chọn đề tài 1

3 Mục tiêu đề tài 2

4 Phương ph p nghiên cứu 2

5 Đối tượng, phạm vi nghiên cứu 2

5.1 Đối tượng 2

5.2 Phạm vi nghiên cứu 2

6 Bố cục chính c a đề tài 2

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN 3

1.1 Đ c tính thực v t 3

1.1.1 Mô tả thực v t 3

1.1.2 Phân bố 3

1.2 Nghiên cứu về dược tính 4

1.2.1 Nghiên cứu về dược tính trên cây cùng chi Aegiceras corniculatum 4

1.3 Nghiên cứu về hóa học 5

1.3.1 Nghiên cứu về hóa học trên cây cùng chi Aegiceras corniculatum 5

1.3.2 Cấu trúc những hợp chất đã cô l p được trong cây S đỏ - Aegiceras corniculatum 6

CHƯƠNG 2 THỰC NGHIỆM 10

2.1 Hóa chất và thiết bị 10

2.1.1 Hóa chất 10

2.1.2 Thiết bị 10

2.2 Nguyênliệu 10

2.2.1.Nh n danh 10

2.2.2 Thu h i mẫu 11

2.3 Điều chế c c loại cao 11

2.4 Ly tr ch và cô l p một số hợp chất hữu cơ từ cao ethyl acetate c a l cây Aegiceras floridum 12

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 15

3.1 Khảo sát cấu trúc hóa học c a hợp chất AF.EA1 15

3.2 Khảo sát cấu trúc hóa học c a hợp chất AF.EA2 17

3.3 Khảo sát cấu trúc hóa học c a hợp chất AF.EA3 18

3.4 Khảo sát cấu trúc hóa học c a hợp chất AF.EA4 20

CHƯƠNG 4 KẾT UẬN 22

TÀI LIỆU THAM KHẢO 24 PHỤ LỤC

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU

d : Dou let m i đôi)

dd : Doublet-dou let m i đôi-đôi)

DMSO : Dimethyl sulfoxide (CH3)2SO

NMR : Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy

ppm : Part per million (ph n triệu)

DANH MỤC BẢNG BIỂU

Bảng 2.1 Khối lượng và thu suất các loại cao c a c c nguyên liệu……….11

Bảng 2.2 Kết quả s c k cột nhanh silica gel trên cao ethyl acetate (350,0 g) 13

Bảng 3.1 So s nh dữ liệu ph NMR c a hợp chất AF.EA1 với quercetin………… 16

Bảng 3.2 So s nh dữ liệu ph NMR c a hợp chất AF.EA2 với acid protocatechuric……… 18

Bảng 3.3 So s nh dữ liệu ph NMR c a hợp chất AF.EA3 với acid vanillic……… 20

Bảng 3.4 So s nh dữ liệu ph NMR c a hợp chất AF.EA4 với acid 4-hydroxibenzoic……… ……….21

Bảng 4.1 Cấu tr c và tên gọi c c hợp chất đã cô l p được từ cao ethyl acetate cây Aegiceras floridum……… …23

DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1 Qui trình điều chế các loại cao trên l S tr ng Aegiceras floridum) bằng phương ph p tr ch pha r n trên silica gel……… ……… 12

DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cây sú tr ng - Aegiceras floridum……… 3

Hình 2.2 SKLM các hợp chất cô l p được từ cao ethyl acetate 14

Hình 3.1.Cấu tr c hóa học c a quercetin (AF.EA1) 16

Hình 3.2.Cấu tr c hóa học c a acid protocatechuric (AF.EA2) 17

Hình 3.3 Cấu tr c hóa học c a acid vanillic (AF.EA3) 19

Hình 3.4 Cấu trúc hóa học c a acid 4-hydroxibenzoic (AF.EA4)……… 21

MỞ ĐẦU

1 Tổng quan tình hình nghiên cứu thuộc lĩnh vực đề tài

Hiện nay trên thế giới, các nghiên cứu về hoạt tính sinh học cho thấy cao

methanol c a l cây c ng chi A.corniculatum cây S đỏ) có hoạt tính kháng sốt rét

(IC50 29.3 g/mL) Hai hợp chất 5-O-methylembelin và 5-O-ethylembelin, cô l p từ thân, cành c a loài A corniculatum, có hoạt tính ức chế vài dòng tế ào ung thư như

HL-60, Bel 7402, Hela, U937…Tiên phong trong lĩnh vực này trên thế giới là các nhà khoa học Hàn Quốc, Trung Quốc, Ấn Độ như M Minjuan Xu, K Venkateswara Rao, Daojing Zhang, Jun Wu, Si Zang, Jianshe Huang …Các công trình khoa học liên quan

đến nghiên cứu về hoạt tính sinh học c a cây c ng chi A.corniculatum cây S đỏ) trên

thế giới đã được trích dẫn trong ph n tài liệu tham khảo

Hiện nay việc định hướng đ u tư nghiên cứu các hợp chất thiên nhiên là một trong những lĩnh vực quan trọng Việt Nam Cho đến nay chưa có một nghiên cứu nào trên thế giới c ng như Việt Nam nghiên cứu về thành ph n hóa học và hoạt t nh

chống ung thư c a loài Aegiceras floridum (cây Sú tr ng)

2 Lý do chọn đề tài

Hiện nay cùng với sự phát tri n c a nền khoa học thì việc định hướng đ u tư nghiên cứu các hợp chất thiên nhiên đã và đang đóng góp những thành tựu quý báu cho ngành hóa học c ng như ngành sinh học và dược học Trong đó các bài thuốc y học c truyền ngày càng thuyết phục con người b i một số hoạt tính kháng vài dòng ung thư mà nó mang lại rất b ích Cho đến nay chưa có một nghiên cứu nào trên thế giới c ng như Việt Nam nghiên cứu về thành ph n hóa học và hoạt t nh chống ung

thư c a loài Aegiceras floridum (cây Sú tr ng) Tuy nhiên, các nghiên cứu về hoạt tính sinh học cho thấy cao methanol c a l cây c ng chi A.corniculatum cây S đỏ) có hoạt

tính kháng sốt rét (IC50 29.3 g/mL) Hai hợp chất methylembelin và ethylembelin, cô l p từ thân, cành c a loài A corniculatum,có hoạt tính ức chế vài

5-O-dòng tế ào ung thư như HL-60, Bel 7402, Hela, U937

Trong đề tài này chúng tôi tiến hành khảo s t thành ph n hóa học c a cao ethyl acetate c a l cây S tr ng và sau đó s thử nghiệm một số hoạt tính kh ng vài dòng ung thư Hela c tử cung) MCF-7 ung thư vú), NCI H460 ung thư ph i ), Bel7402 ung thư gan) c a c c hợp chất cô l p Chúng tôi hy vọng kết quả thử hoạt t nh c c dòng

ung thư s làm tiền đề cho việc nghiên cứu tạo chế phẩm có hoạt tính sinh học sau này

3 Mục tiêu đề tài

- Khảo s t thành ph n hóa học c a cao ethyl acetate l cây S tr ng

4.Phương pháp nghiên cứu

- Phương ph p nghiên cứu thực nghiệm

- C c phương ph p x c định cấu tr c IR NMR 1D 2D khối ph phân giải cao)

- Phương ph p thử hoạt t nh sinh học với c c dòng ung thư

- Nghiên cứu thành ph n hóa học c a c c cao ethyl acetate

- Thử một vài hoạt t nh chống ung thư Hela c tử cung) MCF-7 ung thư vú), NCI H460 ung thư ph i ), Bel7402 ung thư gan) c a c c chất cô l p được nếu có

th )

6 Bố cục chính của đề tài

- Gồm ph n m đ u, chương 1 chương 2 chương 3 chương 4 tài liệu tham khảo và phụ lục

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN

1.1 Đặc tính thực vật

Cây Sú tr ng có tên khoa học là Aegiceras floridum, là một trong những loài cây thuộc chi Aegicerasthuộc họ S Aegicerataceae)

Hình 1.1 Cây sú tr ng - Aegiceras floridum

Chi Aegiceras thuộc họ S Aegicerataceae) ao gồm hai loài Aegiceras corniculatum

và Aegiceras floridum

Theo Phạm Hoàng Hộ,[3] Việt Nam chi Aegiceras c ng có hai loài Aegiceras

corniculatum còn gọi là S đỏ) và Aegiceras floridum S tr ng)

1.1.1 Mô tả thực vật

Cây sú tr ng (Aegiceras floridum ) (hình 1.1)

Ti u mộc không lông L có phiến hình mu n thường vào 5.5 x 2.7 cm dày cứng không lông ìa uốn xuống gân phụ không r 35 c p đ y từ từ h p thành cuống Ch m tụ t n ngọn nh nh đài v n vành v n ti u nhụy 5 ao phấn có ngăn ngang thành nhiều uồng phụ Tr i khô hột không phôi nh m m mọc thành móc ngay

1.1.2 Phân bố

Cây sú tr ng - Aegiceras floridum mọc ch yếu các khu rừng ng p m n đi n

hình rừng ng p m n C n Giờ, TP Hồ Chí Minh

1.2 Nghiên cứu về dược tính

1.2.1 Nghiên cứu về dược tính trên cây cùng chi Aegiceras corniculatum

Cây S đỏ - Aegeceras corniculatum là một cây nhỏ ho c cây bụi mọc c c đ m

l y ng p m n Châu Á và Australia Loài cây này đã được sử dụng một cách truyền thống đ điều trị hen suyễn, ti u đường, viêm và thấp khớp Trước đó các nghiên cứu dược lý cho thấy tác dụng chống viêm, chống oxy hóa, và tyrosine phosphatase 1B hoạt tính ức chế c a cây này.[11]

Theo V Văn Chi [14] vỏ cây A corniculata có tác dụng thuốc c có nơi d ng vỏ

ho c lá nấu nước s c miệng trị ướu c

Theo Edgardo Gomez và cộng sự[1] hợp chất 5-O-methylem elin có khả năng gây

độc cho c nồng độ 1 ppm trong khoảng thời gian 75 ph t

Theo M Minjuan Xu và cộng sự [6] vỏ và hạt cây d ng trị ệnh vảy c C c thử

nghiệm in vitro cho thấy 5-O-ethylembelin và 5-O-methylembelin có t c dụng chống

lại sự ph t tri n c a c c dòng tế ào HL-60, Bel7402, U937 và Hela

Theo Ahsana Dar và cộng sự [2] đã chiết xuất từ cành c a cây A.corniculatum

bằng các dung môi n-hexane, ethyl acetate và methanol có tác dụng chống oxi hóa, chống viêm và khả năng ảo vệ gan nhờ tác nhân anion superoxide(O2• -) và các gốc hydroxyl (OH•)

Theo Sundaram Ravikumar và cộng sự [4] đã chiết xuất từ lá c a cây A

Corniculatum bằng dung môi methanol s có tác dụng ức chế các loài kí sinh trùng

ho c virus b i spiro benzofuran (Spiro [benzofuran-2 (3 H), 1'- (3 cyclohexane) -2', 3-

dione, 7 -chloro-4 ', 6])

Axit éo được tìm thấy trong cây S đỏ đóng một vai trò quan trọng trong nhiều chức năng c a da.[12] Một số axit éo không no đa chức như acid linoleic acid linolenic, và acid arachidonic là thành ph n c a vitamin F, rất c n thiết cho sự phát

tri n và bảo vệ da

1.3 Nghiên cứu về hóa học

1.3.1 Nghiên cứu về hóa học trên cây cùng chi Aegiceras corniculatum

Cho đến nay chưa có một công trình nghiên cứu nào trong nước và thế giới công

bố khoa học về thành ph n hóa học c a cây Cây Sú tr ng - Aegiceras floridum C c nghiên cứu chỉ t p trung vào loài Aegiceras corniculatum cây S đỏ) Chính vì thế

chúng tôi tiến hành tìm hi u c c nghiên cứu các thành ph n hóa học c a cây cùng chi

và kết quả cho biết:

Năm 2003, Nhóm tác giả Minjuan Xu đã cô l p đượcdẫn xuất hydroquinone là

5-O- methylembelin (3), 5-5-O-ethylembelin (4), 5-O-acetyl-5-5-O-methylembelin (5),

2-Dehydroxy-5-O-methylembelin (6), 2-Methoxy-3-nonylresorcinol (7),

3-Undecylresorcinol (8), 3,7-Dihydroxy-2,5- diundecyl naphthoquinone (9), Dihydroxy-8-methoxy-3,6-diundecyldibenzofuran-1,4-dione (10), 2,8-Dihydroxy-7- methoxy-3,9-diundecyldibenzofuran-1,4-dione (11), 10-Hydroxy -4-O-methyl-2,11-

2,7-diundecylgomphi- lacton (12) từ thân và cành cây Aegiceras corniculatum.[6] Vào năm 2008, 5 năm sau ) nhóm tác giả Jun Wu c ng đã cô l p được những chất nêu trên.[1]

Năm 1961 T c giả K Venkateswara Rao và các cộng sự đã cô l p được Aegiceradiol C30H48O2: 3β,28-Dihydroxyl olean-12,15-diene (21) từ vỏ cây Aegiceras

corniculatum.[7]

Năm 2004 Tác giả Daojing Zhang Jun Wu Si Zang Jianshe Huang đã cô l p

được 16α-Hydroxy-13,28-epoxyoleanan-3-one (14), Isorhamnetin (26), Isorhamnetin

3-O- -L-rhamnofuranosyl- (16) – -D-glucopyranoside (27) , acid syringic (22) và

acid gallic (23) từ thân và vỏ cây Aegiceras corniculatum.[10]

Năm 2008 Tác giả Jun Wu và cộng sự đã cô l p thêm được hai hydroquinones là

rapanone (2,5-3-tridecyl-1,4-benzoquinone) (1), Embelin (2,5- 3-undecyl-1,4-benzoquinone) (2) và cáctriterpen: 3-Hydroxy-13:28-epoxy-16-oxo-

Dihydroxy-18-oleanane (13), Protoprimula- genin (15), Aegicerin (16), Embelinone (17), Schimpefinone (18) và Primulagenin A (19), 28-Norolean-12,17-dien-3-ol (20) và acid protocatechuic (24), acid vanillic (25).[1]

Năm 2011 Tác giả M Gowri Ponnapalli và các cộng sự đã cô l p được bốn đồng phân mới dạng phân tử vòng lớn c a chất chacombretastatin D-2 : Isocorniculatolide

A (28), 11-O-methylisocorniculatolide A (29), 11- Omethylcorniculatolide A (30), và

12-Hydroxy-11-O-methylcorniculatolide A (31) và chất đã iết Corniculatolide A (32)

đƣợc cô l p từ chiết CHCl3 c a vỏ cây Aegiceras corniculatum.[11]

Năm 2008 Tác giả M Chandrasekaran, A Senthil Kumar, K Kannathasan, V Venkatesalu đã cô l p đƣợc thành ph n axit béo trong lá c a tám loài cây rừng ng p

m n: Avicennia officinalis L (Avicenniaceae), Bruguiera cylindrica (L.) Blume,

Ceriops decandra (Griff) Ding Hou, Rhizophora mucronata Blume và Rhizophora Lamk (Rhizophoraceae), Aegiceras corniculatum (L.) Blanco (Myrsinaceae), Lumnitzera racemosa Willd (Combretaceae), và Acanthus ilicifolius L (Acanthaceae)

nhƣ myristic, pentadecanoic, palmitic, heptadecanoic, oleic, linoleic và acid linolenic …[12]

1.3.2 Cấu trúc những hợp chất đã cô lập đƣợc trong cây Sú đỏ (Aegiceras corniculatum)

QUINONE

1 Rapanone (2,5-Dihydroxy-3-tridecyl-1,4-benzoquinone)

2 R1=OH R2=OH: Embelin (2,5-Dihydroxy-3-undecyl-1,4-benzoquinone)

3 R1=OH R2=OCH3 :5-O- methylembelin

4 R1=OH R2=OCH2CH3 : 5-O-ethylembelin

5 R1=OCOCH3 R2=OCH3 : 2-O-acetyl-5-O-methylembelin

6 R1=H R2=OH : 2-Dehydroxy-5-O-methylembelin

7 2-Methoxy-3-nonylresorcinol

và được làm khan bằng Na2SO4 nếu sử dụng lại

 Thuốc thử: đ hiện hình các vết hữu cơ ằng s c ký lớp mỏng, phun xịt bằng dung dịch acid sulfuric 30 %, dung dịch vanilin soi đèn UV

 Silica gel Si – 60 (Merck) và Li Chroprep Rp – 18 (25 – 40 m) loại dùng cho

2.2 Nguyênliệu

2.2.1 Nhận danh

Cây S tr ng được nh n danh b i TS Phạm Văn Ngọt – Khoa Sinh học Trường

ĐHSP Hồ Ch Minh có tên khoa học là Aegiceras floridum Roem & Schult họ S

(Aegicerataceae)

Một mẫu cây ép khô ký hiệu số US-C015 được lưu trong quy n s ch lưu giữ tiêu bản thực v t tại bộ môn Hóa hữu cơ Trường Đại học Khoa học tự nhiên Thành phố

Hồ Chí Minh

2.2.2 Thu hái mẫu

Cây S tr ng được thu hái rừng ng p m n C n Giờ, Tp Hồ Chí Minh, vào

th ng 6 năm 2014

Cây tươi sau khi thu h i loại bỏ những lá sâu bệnh, vàng úa, rửa sạch đ ráo, sấy khô nhiệt độ 60oC cho đến khô xay nhuyễn thành ột đ làm nguyên liệu cho nghiên cứu

2.3 Điều chế các loại cao

Bột khô c a l cây S tr ng 15 5 kg) được tr ch kiệt ằng phương ph p ngâm d m với dung môi methanol nhiệt độ phòng 2 ngày/l n x 10 l n) Lọc ph n dịch trích, cô quay và thu hồi dung môi Thực hiện nhiều l n thu được cao methanol (1500 g) Sử dụng phương ph p tr ch pha r n silica gel trên cao methanol, giải ly l n lượt bằng c c đơn dung môi với độ phân cực tăng d n: hexane, ethyl acetate và methanol Dung dịch giải

li được cô quay thu hồi dung môi dưới áp suất thấp, kết quả thu được là 3 loại cao tương ứng

Toàn bộ qui trình điều chế các loại cao được tóm t t Sơ đồ 2.1 Khối lượng và thu suất các loại cao thu được t nh trên khối lượng nguyên liệu khô an đ u được trình bày trong Bảng 2.1

Bảng 2.1 Khối lượng và thu suất các loại cao c a c c nguyên liệu

Loại cao Kí hiệu ượng cao (g) Thu suất (%)

Sơ đồ 2.1 Qui trình điều chế các loại cao trên l S tr ng - Aegiceras floridum bằng

phương ph p tr ch pha r n trên silica gel

2.4 Ly trích và cô lập một số hợp chất hữu cơ từcao ethyl acetate của lá

 Ngâm d m, t n trích bằng methanol

 Lọc, cô quay thu hồi dung môi

Á C TƯƠI

 Rửa sạch sấy khô xay nhuyễn

 Trích pha r n trên silica gel, giải ly l n lượt bằng hexane ethyl acetate và methanol

 Cô quay thu hồi dung môi