(Luận văn thạc sĩ) xác định giá trị sử dụng của các phương pháp xét nghiệm vi sinh vật ứng dụng trong kiểm nghiệm thịt đông lạnh nhập khẩu

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang	90
Dung lượng	2,7 MB

Các công cụ chuyển đổi và chỉnh sửa cho tài liệu này

Cấu trúc

TRANG BÌA
MỤC LỤC
TRÍCH YẾU LUẬN VĂN
PHẦN 1. MỞ ĐẦU
- 1.1. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI
- 1.2. MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU
- 1.3. PHẠM VI NGHIÊN CỨU
- 1.4. Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI
PHẦN 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
- 2.1. XÁC ĐỊNH GIÁ TRỊ SỬ DỤNG CỦA PHƯƠNG PHÁP
  - 2.1.1. Một số khái niệm
  - 2.1.2. Các thông số kỹ thuật cần xác định trong thẩm định phương pháp
- 2.2. MỘT SỐ CÁCH TIẾP CẬN ĐỂ XÁC ĐỊNH GIÁ TRỊ SỬ DỤNG CỦAPHƯƠNG PHÁP TỪ CÁC TỔ CHỨC CÓ UY TÍN
- 2.3. LUẬT AN TOÀN THỰC PHẨM VÀ CÁC QUY PHẠM PHÁP LUẬTQUI ĐỊNH GIỚI HẠN MỨC ĐỘ Ô NHIỄM VI SINH VẬT TRONG THỊT,SẢN PHẨM THỊT
  - 2.3.1. Trên thế giới
  - 2.3.2. Tại Việt Nam
- 2.4. HỆ VI SINH VẬT GÂY MẤT VỆ SINH, AN TOÀN TRONG THỊT VÀCÁC SẢN PHẨM THỊT
  - 2.4.1. Tổng số Vi sinh vật hiếu khí
  - 2.4.2. E.coli
  - 2.4.3. Salmonella
- 2.5. NGỘ ĐỘC THỨC ĂN DO THỊT NHIỄM KHUẨN
  - 2.5.1. Ngộ độc và nhiễm bệnh do vi khuẩn
  - 2.5.2. Ngộ độc do độc tính của vi khuẩn
- 2.6. CÁC PHƯƠNG PHÁP KIỂM NGHIỆM VI SINH VẬT TRONG THỊTVÀ SẢN PHẨM THỊT
  - 2.6.1. Một số phương pháp định lượng tổng số VSVHK
  - 2.6.2. Một số phương pháp định lượng E.coli
  - 2.6.3. Phương pháp phát hiện Salmonella
PHẦN 3. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
- 3.1. ĐỐI TƯỢNG, ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU
  - 3.1.1. Đối tượng nghiên cứu
  - 3.1.2. Địa điểm nghiên cứu
- 3.2. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU
  - 3.2.1. Xác định giá trị sử dụng của phương pháp
  - 3.2.2. Ứng dụng Kiểm nghiệm một số mẫu thịt đông lạnh nhập khẩu
- 3.3. NGUYÊN LIỆU
  - 3.3.1. Chủng chuẩn vi sinh vật
  - 3.3.2. Các mâũ thịt đông lạnh
  - 3.3.3. Các thiết bị trong phòng thí nghiệm
  - 3.3.4. Môi trường chính nuôi cấy vi sinh vật
- 3.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
  - 3.4.1. Phương pháp thẩm định tiêu chuẩn
  - 3.4.2. Phương pháp kiểm nghiệm một số chỉ tiêu vi sinh vật trong thịt
  - 3.4.3. Phương pháp phân tích số
PHẦN 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
- 4.1. KẾT QUẢ THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP
  - 4.1.1. Kết quả đánh giá hiệu suất môi trường sử dụng trong thẩm địnhphương pháp
  - 4.1.2. Kết quả kiểm tra nền mẫu đánh giá
  - 4.1.3. Kết quả kiểm tra đặc tính sinh hóa, đặc tính nuôi cấy của chủng chuẩn
  - 4.1.4. Kết quả xác định nồng độ vi khuẩn gây nhiễm
  - 4.1.5. Kết quả thẩm định phương pháp định lượng tổng số VSVHK
  - 4.1.6. Kết quả thẩm định phương pháp định lượng E.coli tổng số
  - 4.1.7. Kết quả xác nhận giá trị sử dụng của TCCS 03: 2016/TYV2-CĐ
- 4.2. KẾT QUẢ KIỂM NGHIỆM MỘT SỐ MẪU THỊT ĐÔNG LẠNHNHẬP KHẨU
  - 4.2.1. Kết quả kiểm nghiệm mẫu thịt bò đông lạnh
  - 4.2.2. Kết quả kiểm nghiệm mẫu đùi gà
  - 4.2.3. Kết quả kiểm nghiệm trên mẫu gà nguyên con
PHẦN 5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
- 5.1. KẾT LUẬN
- 5.2. KIẾN NGHỊ
TÀI LIỆU THAM KHẢO
- Tài liệu tiếng Việt
- Tài liệu tiếng Anh

Nội dung

Xây dựng và phát triển các phương pháp xét nghiệm trong lĩnh vực sinh học vi sinh thực phẩm là việc làm cần thiết nhằm đáp ứng yêu cầu pháp luật trong lĩnh vực an toàn thực phẩm ATTP, cụ

Vật liệu và phương pháp nghiên cứu

Đối tượng, địa điểm nghiên cứu

3.1.1 Đối tượng nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu là một số vi khuẩn gây ô nhiễm trong thịt đông lạnh nhập khẩu (quy định trong QCVN 8-3/ BYT) và các tiêu chuẩn sử dụng để xét nghiệm

- Salmonella spp – TCCS 03/TYV2/2016-CĐ

Phòng Vi sinh thực phẩm - Tổ Vệ sinh thú y - Trạm Chẩn đoán xét nghiệm bệnh động vật, Cơ quan Thú y vùng II

Thời gian thực hiện đề tài: từ tháng 8/2016 đến tháng 6/2017.

Nội dung nghiên cứu

3.2.1 Xác định giá trị sử dụng của phương pháp

- Thẩm định phương pháp đinh lượng tổng số VSVHK trong thịt theo TCVN 9977-2013

- Thẩm định phương pháp đinh lượng vi khuẩn E.coli trong thịt theo TCVN 9975-2013

- Thẩm định (xác nhận giá trị sử dụng) phương pháp phát hiện Salmonella spp trong thịt theo TCCS 03/2016/TYV2-CĐ

3.2.2 Ứng dụng Kiểm nghiệm một số mẫu thịt đông lạnh nhập khẩu

- Kiểm nghiệm các lô thịt bò đông lạnh

- Kiểm nghiệm các lô thịt đùi gà đông lạnh

- Kiểm nghiệm các lô thịt gà nguyên con đông lạnh

Nguyên liệu

3.3.1 Chủng chuẩn vi sinh vật

- Salmonella enterica subsp enterica serovar Enteritidis ATCC® 49223™*,

- Staphylococus aureus subsp aureus ATCC ® 29213 TM

3.3.2 Các mâũ thịt đông lạnh:

⚠️The Pollinations legacy text API is being deprecated for **authenticated users**.Please migrate to our new service at https://enter.pollinations.ai for better performance and access to all the latest models.Note: Anonymous requests to text.pollinations.ai are NOT affected and will continue to work normally.

3.3.3 Các thiết bị trong phòng thí nghiệm

- Tủ âm sâu(-20 0 C), tủ ấm các loại, tủ sấy, tủ lạnh, nồi hấp cách thủy, cân, buồng cấy an toàn sinh học, máy dập mẫu stomatcher

- Hệ thống định danh Vitek 2 compact

3.3.4 Môi trường chính nuôi cấy vi sinh vật

Bảng 3.1 Môi trường chính dùng để thẩm định phương pháp và phân tích các chỉ tiêu VSV

TT Chỉ tiêu phân tích/Phương pháp

(TCVN9977:2013) Đĩa đếm vi sinh vật hiếu khí 3M Petrifilm TM Aerobic count plate

2 E.coli (TCVN9975:2013) Đĩa đếm 3M Petrifilm TM E coli/coliform count plate

Buffer peptone water (BPW), Iris Salmonella supplement(BS 07708), Iris Salmonella agar, confirm’ Salmonella (BT01108)

MKTTn - Tetrathionat/novobioxin Muller kauffman, RVS - Rappaport Vassiliadis, thạch XLD -

Phương pháp nghiên cứu

3.4.1 Phương pháp thẩm định tiêu chuẩn

Thẩm định, xác nhận giá trị sử dụng của phương pháp thử nghiệm được thực hiện theo:

- Trần Cao Sơn 2010, TCVN 9332:2012 Các thông số cần xác định:

P R: Hiệu suất môi trường đánh giá

N S: Số khuẩn lạc trung bình trên môi trường kiểm tra

- Môi trường dùng để kiểm tổng số VSVHK 3M TM Petrifilm TM Aerobic count plate với môi trường dinh dưỡng Plate count agar (PCA)

- Môi trường dùng để kiểm Coliform và E.coli 3M TM Petrifilm TM E.coli/Coliform count plate với môi trường Plate count agar (PCA)

- Môi trường Iris Salmonella agar với môi trường Tryptic Soy agar (TSA) B2: Kiểm tra nền mẫu

Kiểm tra tổng VSVHK theo TCVN 4884-1: 2015

Kiểm tra E.coli trong các nền mẫu theo TCVN 7924-2: 2008

Kiểm tra Salmonella trong các nền mẫu theo TCVN 4829: 2005

B3: Kiểm tra chủng chuẩn phục vụ cho việc gây nhiễm

Trước khi tiến hành gây nhiễm chủng vào mẫu, các chủng bao gồm

B4: Xác định mật độ vi khuẩn để phục vụ cho việc gây nhiễm vào mẫu thẩm định

Sử dụng phương pháp xác định nồng độ vi sinh vật mục tiêu trong các ống pha loãng từ 10 0 , 10 -1 ….10 -n bằng cách thăm dò từng ống trong dãy pha loãng:

10 0 , chuyển 1ml sang ống chứa 9ml buffer peptone water được ống có nồng độ

10 -1 , thực hiện liên tiếp đến nồng độ 10 -7 , 10 -8

B5 Gây nhiễm vi sinh vật vào các mẫu

Với phương pháp định lượng:

Thực hiện thẩm định phương pháp định lượng E.coli theo TCVN 9975:

Với phương pháp định tính:

Ngày đăng: 17/07/2021, 06:40

Nguồn tham khảo

Tài liệu tham khảo	Loại	Chi tiết
30. TTXVN (2017). Công bố báo cáo quản lý nguy cơ ATTP Việt nam- Những thách thức và cơ hội. Bản tin Giáo dục- Y tế - Sức khỏe ngày 17/3/2017. Truy cập ngày 20/3/2017 http://cadn.com.vn/news/119_163756.Tài liệu tiếng Anh	Link
33. Commission regulation (EC) No 2073 (2005). Microbiological criteria for foodstuffs. Official Journal of the European Union 22/12/2005. Retrived on 10 january 2017 at http://extwprlegs1.fao.org/docs/pdf/eur61603.pdf	Link
34. FDA (2013). Guidance for Industry Bioanalytical Method Validation. Retrived on 10 January 2017 at https://www.fda.gov/downloads /Drugs/Guidances /ucm368107.pdf	Link
35. Food sanitation in Japan (2006). Japan external trade organization. Retrived on 12 January 2017 at http://nafiqad.gov.vn	Link
42. Kenneth Todar (2005). Todar’s Online Textbook of Bacteriology University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology (Staphylococcus). Kenneth Todar University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology. Retrived on 10 Mar 2017 at http://www.textbookofbacteriology.net/staph.html	Link
45. NMKL (2009). Protocol for the validation of alternative microbiological methods. Retrived on 14 Mar 2017 athttp://www.nmkl.org/dokumenter/nordval/NordValProtocol.pdf	Link
46. OIE (2013). Principles and methods of validation of diagnostic assays for infectious diseases.chapter1.1.2. Retrived on 14 Mar 2017 athttp://www.oie.int/fileadmin/Home/eng/Health_standards/aahm/current/chapitre_validation_diagnostics_assays.pdf	Link
48. The pure food Act. 1908 No 31. Retrived on 14 Mar 2017 at http://www.austlii.edu.au/au/legis/nsw/num_act/pfa1908n31140/	Link
29. Nguyễn Vĩnh Phước (1976). Các phương pháp bảo quản thú sản và thực phẩm. Vi sinh vật Thú y. NXB Đại học và Trung học chuyên nghiệp, 3	Khác
31. AOAC (2012). Methods Committee Guidelines for Validation of Microbiological Methods for Food and Environmental Surfaces. Retrived on 20 January 2017 at	Khác
37. Helrick A.C (1997). Association of Official Analytical Chemists. 16 th edition. Vol.1. Published by Ins. Washington. Virginia. USA	Khác
38. Ingram M. and Simonsen J. (1980). Microbial ecology on food. Publish by Academic press. New York	Khác
39. Iso 16140 (2003). Microbiology of food and animal feeding stuff – Protocol for the validation of al ternative methods. Centrer for Standards, metrology and quality, Ha noi. pp. 2-17	Khác
40. ISO/IEC 17025 (2005). General requirement for the competence of testing and calibration laboratory	Khác
41. Joseph A. Odumeru and Carlos G. León (2012). Salmonella Detection Methods for Food and Food Ingredients. Salmonella – Adangerous foodborne pathogen.Velarde University of Guelph. Guelph. Ontario Canada. pp.373-392	Khác
43. Lowry and Bates (1989). Identification of Salmonella in the meat industry biochemical and serological procedures. Meat. Ind. Red, Inst. No 2. bub. No 860	Khác
44. Naomi Balaban and Avraham Rasooly (2000). Staphylococcal enterotoxins. International Journal of Food Microbiology 61. pp. 1-10	Khác
47. Spearman C (1908). The method of 'right and wrong cases' ('constant stimuli') without Gauss's formulae. Br J Psychol. pp. 227–242	Khác
49. Yves Le Loir. Florence Baron and Michel Gautier (2003). Staphylococcus aureus and food poisoning. Genetic and Molecular Research 2. pp.63-76	Khác