Thẩm định quy trình định lượng hoạt chất viên nén Paracetamol 500mg bằng phương pháp đo quang

Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình viên và nghiền thành bột mịn Cân chính xác một lượng bột viên tương ứng khoảng 0,075g Paracetamol vào bình định mức 100ml, thêm 25ml dd NaOH 0,1M và 50ml H2O, lắc 15 phút, thêm nước đến định mức. Lắc đều, lọc qua giấy lọc khô, bỏ 20ml dịch lọc đầu thu được dd A Lấy chính xác 5ml dd A cho vào bình định mức 50ml. Thêm nước vừa đủ đến vạch, lắc đều thu được dd B Lấy chính xác 5ml dd B cho vào bình định mức 50ml, thêm 5ml NaOH 0,1M, Thêm nước đến định mức, lắc đều Đo độ hấp thụ của dung dịch thu được ở bước sóng 257nm, dùng cốc dày 1cm. Mẫu trắng là dung dịch NaOH 0,01M Tính hàm lượng Paracetamol, C8H9NO2 theo A(1%,1cm). Lấy 715 là giá trị A (1%,1cm) ở bước sóng 257nm Yêu cầu: Hàm lượng của Paracetamol , C8H9NO2 từ 95,0105,0% so với hàm lượng ghi trên nhãn Pha dd NaOH 0,1M: Cân 2,00 g NaOH cho vào ống đong 500 ml, thêm nước vừa đủ, khuấy đều thu được dd NaOH 0,1M Pha mẫu trắng: Lấy 5 ml dd NaOH 0,1M vừa pha cho vào bình định mức 50 ml, thêm nước vừa đủ, lắc đều thu được dd NaOH 0,01M Pha mẫu chuẩn: Cân chính xác 0,075 g paracetamol mcân thực tế = 0,0754 g Tiến hành tương tự như phần định lượng đến khi thu được dd B Lấy chính xác lần lượt 3,5 ml ; 4,5 ml; 5 ml; 6 ml; 6,5 ml cho vào 5 bình định mức 50ml riêng biệt. Thêm vào mỗi bình 5ml dd NaOH 0,1 M. Thêm nước vừa đủ đến vạch, lắc đều thu được các dd chuẩn có nồng độ tương ứng là 70%, 90%, 100%, 120%, 130%. Pha mẫu placebo: Cân lần lượt tá dược tương ứng với 20 viên, trộn đều, đồng nhất. Mỗi viên chứa 0,5 g paracetamol có 0,153 g tá dược => Với 0,075g paracetamol tương ứng có 0,02295 g tá dược Cân chính xác 0,02295 g tá dược mtá dược cân thực tế= 0,2230 g Tiến hành tương tự như phần định lượng thu được mẫu placebo. Pha mẫu tự tạo: Cân chính xác 0,075 g paracetamol và 0,02295 g tá dược mpara cân thực tế= 0,0776 g mtá dược cân thực tế= 0,0230g Tiến hành tương tự như phần định lượng đến khi thu được dd A Cho lần lượt vào 3 bình định mức 50ml mỗi bình chính xác 5ml dd A, thêm nước đến định mức, lắc đều thu được dd B1, B2 , B3 Lấy chính xác lần lượt 4 ml, 5ml, 6ml cho vào 3 bình định mức 50 ml riêng biệt. Thêm vào mỗi bình 5ml dd NaOH 0,1 M. Thêm nước vừa đủ đến vạch, lắc đều thu được các dd tự tạo có nồng độ tương ứng là 80%, 100%, 120%. Làm tương tự với các dd B2 và B¬3. 3.1. Tính đặc hiệu Thực hiện trên các mẫu: Mẫu trắng Mẫu placebo Mẫu chuẩn Paracetamol 7,5 gml Mẫu thử Mẫu tự tạo

BÁO CÁO THỰC HÀNH Bài 6: Thẩm định quy trình định lượng hoạt chất viên nén Paracetamol 500mg bằng phương pháp đo quang

Công thức viên nén Paracetamol 500mg

Paracetamol Lactose Tinh bột sắn Dextrin Talc

Mg stearat

500,00 mg 79,00 mg 65,50 mg 5,00 mg 3,00 mg 0,50 mg

1 Định lượng Paracetamol trong viên nén Paracetamol 500mg bằng phương pháp đo quang

Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình viên và nghiền thành bột mịn

Cân chính xác một lượng bột viên tương ứng khoảng 0,075g Paracetamol vào bình định mức 100ml, thêm 25ml dd NaOH 0,1M và 50ml H2O, lắc 15 phút, thêm nước đến định mức Lắc đều, lọc qua giấy lọc khô, bỏ 20ml dịch lọc đầu thu được dd A Lấy chính xác 5ml dd A cho vào bình định mức 50ml Thêm nước vừa đủ đến vạch, lắc đều thu được dd B

Lấy chính xác 5ml dd B cho vào bình định mức 50ml, thêm 5ml NaOH 0,1M, Thêm nước đến định mức, lắc đều

Đo độ hấp thụ của dung dịch thu được ở bước sóng 257nm, dùng cốc dày 1cm Mẫu trắng là dung dịch NaOH 0,01M

Tính hàm lượng Paracetamol, C8H9NO2 theo A(1%,1cm) Lấy 715 là giá trị A (1%,1cm) ở bước sóng 257nm

Yêu cầu: Hàm lượng của Paracetamol , C8H9NO2 từ 95,0-105,0% so với hàm lượng ghi trên nhãn

* Kết quả:

4 0,5966 9 0,6032 14 0,5867 19 0,5916

mtb = 0,5947 g => mcân theo lý thuyết = 0,0892g

mcân thực = 0,0894g => mpara thực = 0,0752 g

¿>A T = 0,545217

Ta có:

A= A1 %1 cm l C => C A = A1 %1 cm l = 715

A T

C T = C A = 715 => C T = A T

715

=> C bđ = C T 100 = A T 100

715

m paracetamol= C bđ 100

100 = A T 100

715 = 0,545217 100715 = 0,0763 (g)

=> H% = m m paracetamol

parathực

.100 % = 0,07630,0752 100% = 101,46%

Vậy chế phẩm đạt yêu cầu về định lượng theo TCCS

2 Chỉ tiêu và yêu cầu

ST

Paracetamol ( có cực đại hấp thụ trong khoảng 257 + 2nm)

- Độ hấp thụ của mẫu Placebo < 2% so với mẫu có hoạt chất

thống

- Cực đại hấp thụ trong khoảng 257 + 2nm

- RSD giá trị mật độ quang < 2%

3 Độ tuyến tính - Hệ số tương quan r > 0,995

- RSD tỷ lệ thu hồi < 2%

độ đúng

lại)

- % Hàm lượng mẫu thử đạt như trong chuyên luận

- RSD < 2%

3 Cách tiến hành

* Pha dd NaOH 0,1M:

Cân 2,00 g NaOH cho vào ống đong 500 ml, thêm nước vừa đủ, khuấy đều thu được dd NaOH 0,1M

* Pha mẫu trắng:

Lấy 5 ml dd NaOH 0,1M vừa pha cho vào bình định mức 50 ml, thêm nước vừa đủ, lắc đều thu được dd NaOH 0,01M

* Pha mẫu chuẩn:

Cân chính xác 0,075 g paracetamol

mcân thực tế = 0,0754 g

Tiến hành tương tự như phần định lượng đến khi thu được dd B

Lấy chính xác lần lượt 3,5 ml ; 4,5 ml; 5 ml; 6 ml; 6,5 ml cho vào 5 bình định mức 50ml riêng biệt Thêm vào mỗi bình 5ml dd NaOH 0,1 M Thêm nước vừa đủ đến vạch, lắc đều thu được các dd chuẩn có nồng độ tương ứng là 70%, 90%, 100%, 120%, 130%

* Pha mẫu placebo:

Cân lần lượt tá dược tương ứng với 20 viên, trộn đều, đồng nhất

Mỗi viên chứa 0,5 g paracetamol có 0,153 g tá dược

=> Với 0,075g paracetamol tương ứng có 0,02295 g tá dược

Cân chính xác 0,02295 g tá dược

mtá dược cân thực tế= 0,2230 g

Tiến hành tương tự như phần định lượng thu được mẫu placebo

* Pha mẫu tự tạo:

Cân chính xác 0,075 g paracetamol và 0,02295 g tá dược

mpara cân thực tế= 0,0776 g

mtá dược cân thực tế= 0,0230g

Tiến hành tương tự như phần định lượng đến khi thu được dd A

Cho lần lượt vào 3 bình định mức 50ml mỗi bình chính xác 5ml dd A, thêm nước đến định mức, lắc đều thu được dd B1, B2 , B3

Lấy chính xác lần lượt 4 ml, 5ml, 6ml cho vào 3 bình định mức 50 ml riêng biệt Thêm vào mỗi bình 5ml dd NaOH 0,1 M Thêm nước vừa đủ đến vạch, lắc đều thu được các dd tự tạo có nồng độ tương ứng là 80%, 100%, 120%

Làm tương tự với các dd B2 và B3

3.1 Tính đặc hiệu

Thực hiện trên các mẫu:

- Mẫu trắng

- Mẫu placebo

- Mẫu chuẩn Paracetamol 7,5 g/ml

- Mẫu thử

- Mẫu tự tạo

=> Kết quả:

- Mẫu placebo

- Mẫu chuẩn Paracetamol 7,5 g/ml

- Mẫu thử

- Mẫu tự tạo

Phổ UV mẫu thử tương tự phổ UV của mẫu chuẩn Paracetamol ( đều có cực đại hấp thụ tại bước sóng 257 nm)

=> Độ hấp thụ của mẫu Placebo < 2% so với các mẫu có hoạt chất

Vậy chỉ tiêu về tính đặc hiệu đạt

3.2 Độ thích hợp hệ thống

Thực hiện trên mẫu chuẩn Paracetamol 7,5 g/ml

=> Kết quả:

A Lần 1

Lần 2

¿>A tb = 0,536868 SD = 1,6215.10−4

tb = 1,6215.10−4

0,536868 = 0,0302 % < 2%

Vậy chỉ tiêu về độ thích hợp hệ thống đạt

3.3 Độ tuyến tính

Thực hiện trên mẫu chuẩn ở 5 nồng độ tương ứng 70%, 90%, 100%, 120%, 130%

=> Kết quả:

70%

0,370267

90%

0,485853

100%

0,536734

120%

0,645295

130%

0,708119

60% 70% 80% 90% 100% 110% 120% 130% 140%

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

0.8

f(x) = 0.56 x − 0.02 R² = 1

Linear ()

r2 = 0,9994 => Hệ số tương quan r = 0,9996 > 0,995

Vậy chỉ tiêu về độ tuyến tính đạt

3.4 Độ đúng

Thực hiện trên mẫu tự tạo 80%, 100%, 120% (mỗi nồng độ 3 mẫu)

=> Kết quả:

Ta có:

mpara cân thực tế= 0,0776 g

A= A1 %1 cm l C => C A = A1 %1 cm l = 715

A T

C T = C A = 715 => C T = A T

715 => C bđ = C T 100 = A T 100

715

m paracetamol= C bđ 100

100 = A T 100

715

100ml dd chứa 0,0776g paracetamol tương ứng với nồng độ 100%

=>100 ml dd chứa m paracetamol tương ứng với nồng độ X%

=> C đo = X = m paracetamol 100

0,0776 (%)

Tỷ lệ thu hồi = C C đo

thực 100%

80%

1

0,443190

0,443386 0,443392 2

0,443699

0,443715 0,443714 3

0,448137

0,448075 0,448063

0,547334 0,547315

0,546275

0,546264 0,546333 3

0,556104

0,556188 0,556015

120%

1

0,659502

0,659498 0,659424 2

0,668431

0,668197 0,668166 3

0,669962

0,669950 0,669841 Tất cả các mẫu tự tạo đều có tỷ lệ thu hồi trong khoảng 98-102%

RSD = TLTH SD

tb = 0,876799,8 = 0,878 % < 2%

Vậy chỉ tiêu về độ đúng đạt

3.5 Khoảng xác định

Thực hiện trên mẫu tự tạo 80%, 100%, 120% (mỗi nồng độ 3 mẫu)

=> Kết quả:

Khoảng xác định (80%-120%) nằm trong khoảng tuyến tính (70%-130%) và đạt độ đúng

Vậy chỉ tiêu về khoảng xác định đạt

3.6 Độ chính xác (Độ lặp lại)

Thực hiện trên 6 mẫu thử nồng độ 100%

=> Kết quả:

mpara thực = 0,0752 g

Ta có:

A= A1 %1 cm l C => C A = A1 %1 cm l = 715

A T

C T = C A = 715 => C T = A T

715 => C bđ = C T 100 = A T 100

715

m paracetamol= C bđ 100

100 = A T 100

715

=> H% = m m paracetamol

parathực

.100 % = A T 100

0,0752 715 100%

1

0,545186

0,545294 0,545170 2

0,536254

0,536303 0,536392 3

0,541152

0,541403 0,541286 4

0,541749

0,541817 0,541800 5

0,541242

0,541251 0,541218 6

0,540345

0,540348 0,540378 Tất cả 6 mẫu thử đều có hàm lượng đạt như trong chuyên luận (từ 95,0-105,0%)

RSD = H % SD

tb = 0,5298100,62 = 0,526 % < 2%

Vậy chỉ tiêu về độ chính xác (độ lặp lại) đạt