Đánh giá khả năng ức chế enzyme α glucosidase của cao chiết nấm cordyceps militaris

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH MÔI TRƯỜNG TÓM TẮT ĐỀ TÀI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Tên đề tài ĐÁNH GIÁ HẢ N NG ỨC CHẾ ENZYME α-GLUCOSIDASE CỦA CAO CHIẾT NẤM Cordyceps militaris Họ tên si

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM

KHOA SINH MÔI TRƯỜNG



KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG ỨC CHẾ ENZYME α-GLUCOSIDASE

CỦA CAO CHIẾT NẤM Cordyceps militaris

TRẦN THỊ TÂM ẨN

Đà Nẵng, năm 2020

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM

KHOA SINH MÔI TRƯỜNG



KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG ỨC CHẾ ENZYME α-GLUCOSIDASE

CỦA CAO CHIẾT NẤM Cordyceps militaris

Ngành: Công nghệ sinh học Khóa: 2016-2020

Sinh viên: Trần Thị Tâm Ẩn Người hướng dẫn: TS Bùi Thị Thơ

LỜI CAM ĐOAN

Tôi cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi

Các số liệu, kết quả nêu trong khóa luận là trung thực và chưa từng được ai công

bố trong bất kỳ công trình nào khác

Sinh viên thực hiện

Trần Thị Tâm Ẩn

LỜI CẢM ƠN

Để hoàn thành tốt khóa luận tốt nghiệp này tôi đ nhận được rất nhiều sự quan tâm và gi p đ từ cá nhân và tập thể trong suốt thời gian thực hiện

Đầu tiên tôi xin bày t l ng biết n chân thành tới TS i Thị Th và TS Trịnh

Đ ng Mậu đ t o mọi điều kiện và luôn gi p đ tôi thực hiện và hoàn thành tốt khóa luận tốt nghiệp

Tôi xin chân thành cám n CN khoa c ng toàn thể qu thầy cô giáo khoa Sinh – Môi Trường, trường Đ i học Sư ph m – Đ i học Đà N ng đ gi p đ tôi trong xuyên suốt quá trình học tập và nghiên cứu, xây dựng thành công khóa luận

Tôi cũng xin cám n tập thể lớp CNSH các b n sinh viên NC H t i ph ng Công nghệ sinh học nấm đ luôn đ ng viên và gi p đ tôi trong suốt quá trình thực hiện đề tài

Cuối c ng tôi xin g i lời cám n tới gia đình đ luôn lo lắng, ch m sóc và t o mọi điều kiện cho tôi trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu và hoàn thành tốt khóa luận tốt nghiệp này

Đà N ng, ngày tháng n m

Trần Thị Tâm Ẩn

MỤC LỤC

LỜI CAM ĐOAN I LỜI CẢM ƠN II DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT V DANH MỤC ẢNG IV DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ IIV TÓM TẮT ĐỀ TÀI IIIV

MỞ ĐẦU 1

1 TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI 1

2 MỤC TIÊU ĐỀ TÀI 3

3 Ý NGHĨA CỦA ĐỀ TÀI 3

3.1 Ý nghĩa khoa học 3

3.2 Ý nghĩa thực tiễn 3

4 NÔI DUNG NGHIÊN CƯU 3

CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4

1.1 NẤM Cordyceps militaris 4

1.2 SƠ LƯỢC VỀ ỆNH TIỂU ĐƯỜNG TYPE II 5

1.3 POLYSACCHARIDES 6

1.4 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRÊN THẾ GIỚI VÀ TRONG NƯỚC 7

1.4.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới 7

1.4.2 Tình hình nghiên cứu trong nước 8

CHƯƠNG V T LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 9

2.1 V T LIỆU 9

2.2 PHƯƠNG PHAP NGHIÊN CƯU 9

2.2.1 Xác định hàm lượng polysaccharides tổng số 10

2.2.2 Đánh giá khả n ng ức chế enzyme α-glucosidase của cao chiết nấm C.militaris 10

Phư ng pháp x l số liệu 11

CHƯƠNG ẾT QUẢ VÀ THẢO LU N 12

3.1 XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG POLYSACCHARIDES TỔNG S CÓ TRONG CAO CHIẾT NẤM Cordyceps militaris 12

3.2 ĐÁNH GIÁ HẢ N NG ỨC CHẾ ENZYME α-GLUCOSIDASE CỦA CÁC LOẠI

CAO CHIẾT NẤM Cordyceps militaris 14

3.2.1 Đánh giá khả n ng ức chế enzyme α-glucosidase của cao chiết nước 14

3.2.2 Đánh giá khả n ng ức chế enzyme α-glucosidase của cao chiết ethanol 15

3.3 ĐÁNH GIÁ S TƯƠNG QUAN GIỮA HÀM LƯỢNG POLYSACCHARIDES VÀ HẢ N NG ỨC CHẾ ENZYME α-GLUCOSIDASE CỦA CÁC LOẠI CAO CHIẾT NẤM Cordyceps militaris 18

ẾT LU N VÀ IẾN NGHỊ 21

1 ẾT LU N 21

2 IẾN NGHỊ 21

TÀI LIỆU THAM HẢO 22

PHỤ LỤC 26

DANH MỤC BẢNG

Số hiệu

bảng

3.1 Giá trị IC50 của các mẫu cao chiết nấm

C.militaris đối với enzyme α-glucosidase

17

DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ

Số hiệu

hình vẽ

2.1 Mẫu hệ sợi và quả thể nấm C.militaris được

nhân giống t i ph ng nghiên cứu khoa Sinh – Môi trường, trường Đ i học Sư ph m – Đ i học Đà N ng

3.2 Ho t đ ng ức chế enzyme α-glucosidase của

cao chiết từ dung môi nước

14

3.3 Ho t đ ng ức chế enzyme α-glucosidase của

cao chiết từ dung môi ethanol

16

3.4 Mối tư ng quan gi a hàm lượng

polysaccharides và khả n ng ức chế enzyme của cao chiết nước

19

3.5 Mối tư ng quan gi a hàm lượng

polysaccharides và khả n ng ức chế enzyme của cao chiết ethanol

19

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM

KHOA SINH MÔI TRƯỜNG

TÓM TẮT ĐỀ TÀI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Tên đề tài ĐÁNH GIÁ HẢ N NG ỨC CHẾ ENZYME

α-GLUCOSIDASE CỦA CAO CHIẾT NẤM Cordyceps militaris

Họ tên sinh viên Trần Thị Tâm Ẩn

Mã SV 315043161102 Khóa 2016 - 2020

Lượng đường huyết sau b a n không ổn định chính là vấn đề của nh ng người mắc bệnh tiểu đường type II, vì vậy điều h a lượng đường huyết đ trở thành mục tiêu chính của việc kiểm soát lo i bệnh này Đường huyết sau b a n có thể được kiểm soát thông qua ho t

đ ng ức chế enzyme hấp thu glucose – enzyme α-glucosidase Nghiên cứu này đánh giá hiệu

quả ho t đ ng ức chế enzyme α-glucosidase của nấm Cordyceps militaris (C.militaris Cao

chiết được khảo sát ở các nồng đ từ , đến mg mL c ng với đối chứng acarbose ở các

nồng đ tư ng ứng ết quả chứng minh r ng cao chiết nấm C.militaris có khả n ng h

đường huyết thông qua khả n ng ức chế enzyme lên tới , , , đồng thời khả n ng

này cũng t ng tuyến tính theo nồng đ cao chiết p < 0,05) IC50 của cao chiết quả thể ở loài nấm này khi chiết b ng dung môi ethanol đ t tới giá trị tư ng đư ng với thuốc điều trị tiểu

đường acarbose p = , ết quả thí nghiệm cũng chỉ ra mối tư ng quan chặt chẽ gi a hàm lượng polysaccharides và khả n ng ức chế enzyme α-glucosidase của C.militaris (p

, , thông qua đó cho thấy được tiềm n ng ứng dụng h trợ điều trị bệnh tiểu đường của loài nấm này

MỞ ĐẦU

1 TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI

ệnh tiểu đường, c n gọi là đái tháo đường hay bệnh dư đường Diabetes mellitus , là m t nhóm bệnh rối lo n chuyển hóa cacbohydrate khi hormone insulin của tụy bị thiếu hay bị giảm tác đ ng trong c thể, biểu hiện b ng mức đường trong máu người mắc bệnh luôn cao ệnh tiểu đường xảy ra khi c thể không sản xuất đủ insulin, hoặc c thể giảm đáp ứng với tác dụng của insulin đề kháng với insulin Có hai c chế chính gây nên bệnh tiểu đường đó là sự t ng cao nồng đ đường huyết do sự thiếu hụt insulin type I hoặc do sai h ng trong ho t đ ng của insulin type II gây ảnh hưởng đến các quá trình chuyển hóa carbonhydrate, chất b o và protein Có nhiều yếu tố quyết định bệnh tiểu đường như gen, môi trường, n uống, vận đ ng thể lực, stress, (Parsamanesh và cs, 2018)

Trong nh ng n m gần đây, bệnh tiểu đường ngày càng trở nên phổ biến, có tỉ lệ gia t ng nhanh chóng và trở thành m t vấn đề đáng quan tâm của nền y học hiện nay ệnh được chia thành type chính: tiểu đường type I, tiểu đường type II và tiểu đường trong thai kì Theo thống kê, hiện có khoảng triệu người đang mắc bệnh tiểu đường trên toàn thế giới, trong đó có tới người bệnh thu c type II T DM abadi và cs,

2012 Đặc biệt, bệnh l này c n được nh ng chuyên gia n i tiết xếp ở vị trí thứ gây t vong cho toàn nhân lo i Hiện nay, bệnh đái tháo đường được kiểm soát b ng nhiều phư ng pháp khác nhau như s dụng thuốc duy trì lượng glucose trong máu ổn định (Sulfonylurea , chất ức chế tiêu hóa và hấp thu tinh b t Glucobay , thuốc cảm ứng đ nha y của insulin Các thuốc điều trị tiểu đư ng thư ng có giá thành cao và nhiều tác dụng phụ như b o phì, vàng da, suy đường huyết, gây nhiều khó kh n trong quá trình điều trị

và ch m sóc bệnh nhân Với xu hướng hiện nay trên thế giới và Việt Nam, nghiên cứu và phát triển các lo i thuốc h đường huyết, có nguồn gốc thực vật được s dụng phổ biến trong dân gian, nh m tìm nh ng lo i thuốc mới hiệu quả và không gây tác dụng phụ so với các thuốc hóa dược là rất cần thiết Đồng thời, tận dụng được nguyên liệu s n có, r tiền, s dụng tiện lợi để người bệnh và thầy thuốc có thêm lựa chọn Trong dân gian, m t

số loài thảo dược được cho là có công dụng h trợ điều trị đái tháo đường ch ng h n như

đậu bắp Abelmoschus esculentus , rễ cây hoàng liên Coptis teeta Wall , h t methi (Trigonella foenum-graecum L.), trà ombucha, Tuy nhiên, hiện nay nh ng nghiên

cứu đề cập đến khả n ng h đường huyết của các lo i thảo dược trên ở Việt Nam vẫn c n

h n chế Xuất phát từ thực tế trên, nhiều nhà nghiên cứu đ tiến hành nghiên cứu khảo sát khả n ng h trợ điều trị bệnh của các chiết xuất cao cồn từ trái đậu bắp, h t methi, rễ cây hoàng liên và trà ombucha trên mô hình chu t b ch Mus musculus var Albino bị bệnh đái tháo đường bởi tác nhân hóa chất Alloxan A , Sigma nh m t o tiền đề cho việc nghiên cứu phát triển nh ng bài thuốc dân gian có tác dụng h trợ điều trị bệnh tiểu đường

Trong nền y học Trung Quốc truyền thống, C.militaris hay Đông tr ng h thảo là

m t lo i nấm k sinh, được s dụng r ng r i để điều trị rất nhiều các lo i bệnh lí khác nhau như thanh lọc c thể ph ng và điều trị các bệnh gan, thận giảm lượng cholesterol

t ng sức đề kháng Các phân tích hoá học cho thấy trong sinh khối của C.militaris có

17 acid amin khác nhau, lipid và nhiều nguyên tố vi lượng khác Các nghiên cứu trước

chứng minh r ng các hợp chất có ho t tính sinh học trong nấm C.militaris có thể thay đổi

phản ứng miễn dịch và ức chế sự phát triển của khối u Cheung và cs, , iho và cs,

Các nghiên cứu trước đây cũng chỉ ra r ng C.militaris có thể bảo vệ các tế bào

thông qua các c chế liên quan đến glucokinase gan, hexokinase và glucose- -phosphate dehydrogenase iho và cs, Tác dụng h trợ điều trị bệnh tiểu đường type II cũng

đ được chứng minh trên đối tượng đ ng vật trong rất nhiều nghiên cứu trước đây như nghiên cứu của Dong và cs , hay trong bài báo của Liu và cs Trong các nghiên cứu trên các đối tượng khác như lá b ng l ng tím Miura và cs, , hay lá dâu

t m Habeeb và cs, , khả n ng điều h a đường huyết đ được đánh giá thông qua

ho t đ ng ức chế enzyme α-glucosidase Trong m t báo cáo của Zhu và cs , khả

n ng ức chế enzyme α-glucosidase của nấm Cordyceps militaris được đánh giá là nhờ tác

dụng của hàm lượng polysaccharides có trong hệ sợi nấm Chính vì vậy, để làm r h n về

khả n ng h đường huyết của loài nấm này, ch ng tôi đ tiến hành nghiên cứu đề tài

“Đánh giá khả năng ức chế enzyme α-glucosidase của cao chiết nấm Cordyceps

militaris”

ết quả của đề tài sẽ dẫn liệu khoa học về khả n ng ức chế enzyme α-glucosidase

của cao chiết nấm C.militaris, từ đó t o tiền đề cho việc mở r ng hướng nghiên cứu phát

triển nh ng bài thuốc dân gian có tác dụng h trợ điều trị bệnh tiểu đường

3.2 Ý nghĩa thực tiễn

ết quả của đề tài sẽ cung cấp thêm d liệu về việc ứng dụng loài nấm C.militaris

trong h trợ điều trị bệnh tiểu đường

4 N I DUNG NGHIÊN CỨU

- hảo sát hàm lượng polysaccharides có trong các lo i cao chiết nấm C.militaris

- Đánh giá khả n ng ức chế enzyme α-glucosidase của các lo i cao chiết nấm

C.militaris

- Đánh giá sự tư ng quan gi a hàm lượng polysaccharides và khả n ng ức chế

enzyme α-glucosidase của các lo i cao chiết nấm C.militaris

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

- Tên khác: Tr ng thảo, Đông tr ng h thảo

Đặc điểm nhận d ng: C.militaris khi c n sống, người ta có thể trông r hình con

sâu, với đuôi là m t cành nh , mọc lá hi sấy khô, nó có m i tanh như cá, đốt lên có

m i th m Phần thân có hình d ng giống ngón tay, dài khoảng – cm do sợi nấm mọc dính liền vào đầu sâu non mà thành Đầu sâu non giống như con t m, dài chừng – cm, đường kính khoảng , – , cm ên ngoài có màu vàng sẫm hoặc nâu vàng với khoảng – v n khía, v n khía ở gần đầu nh h n Phần đầu có màu nâu đ , đuôi giống như đuôi con t m, có tất cả tám cặp chân, nhưng đôi ở gi a là r nhất Chất đệm nấm hình que cong mọc ra từ mình sâu non, dài h n sâu non m t ch t Sâu non dễ b g y, ru t bên trong c ng đầy, màu trắng h i vàng chất đệm nấm khá dai và bên trong ru t h i r ng, có màu trắng ngà

Sinh học và hình thái: Nấm được tìm thấy vào m a h v ng n i cao trên m

ở cao nguyên Thanh T ng (Thanh Hải – Tây T ng) và Tứ Xuyên (Trung Quốc)

Phân bố: Các loài nấm này phân bố r ng ở châu Á và châu Úc với trung tâm đa

d ng là v ng Đông Á, đó là các cao nguyên cao h n mặt biển từ đến m như: Tây T ng, Tứ Xuyên, Thanh Hải, Cam T c, Vân Nam

Giá trị: Các phân tích hoá học cho thấy trong sinh khối của C.militaris có 17 acid

amin khác nhau, D-mannitol, lipid, nhiều nguyên tố vi lượng Al, Si, , Na v.v Quan

trọng h n là trong sinh khối C.militaris có nhiều chất ho t đ ng sinh học mà các nhà

vitamin trong g nấm có 0,12 g vitamin B12; 29,19 mg vitamin A; 116,03 mg

vitamin C, ngoài ra còn có vitamin B2, vitamin E, vitamin K

1.2 SƠ LƯỢC VỀ BỆNH TIỂU ĐƯỜNG TYPE II

hái niệm: ệnh tiểu đường, hay c n gọi là đái tháo đường, là m t c n bệnh về

n i tiết gây ra bởi sự rối lo n chuyển hóa đường trong máu khiến cho lượng đường trong máu luôn ở mức cao ệnh tiểu đường type II là bệnh m n tính, nguyên nhân chính của bệnh là do c thể không s dụng insulin đ ng cách và mặc d vẫn c n khả n ng sản xuất insulin nhưng không đủ đáp ứng nhu cầu c thể Thay vì chuyển đổi đường thành n ng lượng, nó lưu l i trong d ng máu và gây ra m t lo t các triệu chứng cho c thể người bệnh Rối lo n glucose trong thời gian dài sẽ gây nên nh ng rối lo n chuyển hóa carbohydrate, protide, lipide, gây tổn thư ng ở nhiều c quan khác nhau, đặc biệt ở tim

và m ch máu, thận, mắt, thần kinh Tiểu đường type II không gây nguy hiểm đến tính

m ng ngay lập tức trừ khi có biến chứng cấp tính nhưng về lâu dài sẽ gây ra nhiều biến chứng m n tính, gây tổn thư ng nhiều c quan quan trọng của c thể m ch vành, thận,

c quan tiêu hóa Nếu bệnh nhân bị tiểu đường mà mắc thêm các bệnh lí khác như nhiễm tr ng, chấn thư ng, nhồi máu c tim thì tình hình bệnh sẽ chuyển biến xấu h n nhiều so với người không mắc tiểu đường

Nguyên nhân: ệnh tiểu đường type II có thể được gây ra bởi nhiều yếu tố: tình

tr ng thừa cân, c thể ít vận đ ng, hoặc c thể không có khả n ng s dụng insulin đ ng cách Ngoài ra, nh ng người đ được xác định trước đó là có glucose l c đói IFG hoặc giảm dung n p glucose IGT cũng có nguy c mắc bệnh

Triệu chứng: Nh ng người có bệnh tiểu đường type II thường xuyên gặp các triệu chứng nhất định, bao gồm:

- Thường hay khát nước

- Đi tiểu thường xuyên

- Nhìn mờ

- Dễ bị kích thích

- Ngứa ran hoặc tê ở bàn tay hoặc bàn chân

- Nhiễm tr ng da thường xuyên

- Vết thư ng không lành

- Mệt m i nhiều

M t số ít trường hợp bệnh nhân mắc bệnh tiểu đường type II không có nh ng triệu chứng kể trên Trong trường hợp này, người có thể sống trong nhiều tháng, thậm chí nhiều n m, mà không biết họ đang có bệnh

Các biến chứng thường gặp: Nh ng bệnh nhân mắc bệnh tiểu đường type II trong thời gian dài sẽ k o theo các biến chứng có h i cho c thể Đặc biệt phải kể đến các d ng biến chứng nghiệm trọng ở m t số b phận của c thể như:

1.3 POLYSACCHARIDES

Định nghĩa: Polysaccharide là m t đ i phân t có kích thước lớn, được cấu thành bới các phân t monosaccharide nhờ liên kết glycoside

Phân lo i:

- Polysaccharide đồng hình: chỉ được cấu thành từ mổ lo i monomer duy nhất

- Polysaccharide dị hình: là m t polymer phức t p, được t o thành từ nhiều lo i monomer khác nhau, hoặc các dẫn xuất của monomer và các chất khác Đây là polymer rất thường gặp trong tự nhiên

Công dụng: Polysaccharides được đánh giá là m t chất kích thích miễn dịch m nh nhất từng được biết đến theo đánh giá của Scott và cs Nó có tác dụng như là m t chất ph ng chống rất m nh mẽ các khối u, làm giảm cholesterol và chất b o trung tính, điều h a lượng đường trong máu, ch a lành vết thư ng, tr hóa làn da, Ngoài ra

có rất nhiều nghiên cứu chứng minh r ng hợp chất này có khả n ng h trợ điều trị rất nhiều lo i bệnh Tiêu biểu như trong nghiên cứu của Yu và cs của mình , khả n ng

tiêu diệt gốc tự do của CPS trong nấm C.militaris đ t giá trị IC50 là 0,548 mg/mL, hay trong nghiên cứu của Wang c ng c ng sự , CPS đ được cho thấy có khả n ng làm

t ng cường miễn dịch, ho t hóa ho t đ ng của các tế bào lympho ở chu t đồng thời CPS cũng gi p t ng cường khả n ng chống oxi hóa cho nh ng cá thể chu t Nghiên cứu của Liu và cs đ chỉ ra được khả n ng chống khối u của polysaccharides có trong hệ sợi và quả thể nấm Ngoài ra, Zhang và cs cũng đ báo cáo r ng polysaccharides

có trong loài nấm này thực sự có nh ng khả n ng điều trị bệnh thông qua ho t đ ng kháng oxi hóa và kháng viêm Về khả n ng điều trị tiểu đường của nhóm chất này, Liu và

cs đ chứng minh CPS có trong nấm C.militaris thực sự có khả n ng điều h a

đường huyết trên mô hình chu t M t nghiên cứu khác của Choi và các c ng sự của

mình, các cao chiết từ nước của nấm C.militaris có tác đ ng đến khả n ng bài tiết insulin

ở c thể chu t Choi và cs, 2014)

1.4 T ÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRÊN THẾ GI I VÀ TRONG NƢ C

1.4.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới

Hiện nay các nghiên cứu trên thế giới về khả n ng h trợ điều trị bệnh tiểu đường

của nấm C.militaris khá phổ biến Theo m t nghiên cứu của Dong và cs , chiết xuất nấm C.militaris làm suy giảm đáng kể nồng đ glucose trong máu b ng cách th c

đẩy chuyển hóa glucose và ức chế m nh nồng đ cholesterol và triglyceride trong huyết thanh Các tác dụng ức chế đối với nit urê máu, creatinine, axit uric và protein đ cho

thấy tác dụng của chiết xuất C.militaris chống l i bệnh đái tháo đường M t nghiên cứu

khác của Liu và cs , thí nghiệm được thực hiện trên mô hình chu t mắc bệnh tiểu đường được b ng cách giảm glucose huyết tư ng, thức n và nước uống, và lượng nước

tiểu Ho t đ ng h đường huyết của C.militaris được xác định b ng cách bình thường hóa

cholesterol toàn phần, triglyceride và cholesterol, lipoprotein ở chu t mắc bệnh tiểu đường Tác dụng ức chế albumin niệu, creatinine, nit urê và n-acetyl-d-glucosaminidase

đ chứng minh được ho t đ ng bảo vệ thận của C.militaris ở chu t mắc bệnh tiểu đường

H n n a, C.militaris gây ra sự điều biến có lợi của các yếu tố gây viêm và các enzyme oxy hóa So với chu t bị tiểu đường không được điều trị, C.militaris làm giảm biểu hiện

phospho-AKT và phosphor-GSK- β ở thận

Tuy nhiên tới nay chỉ có m t vài chứng minh ho t đ ng ức chế enzyme

α-glucosidase của loài nấm này Zhu và cs đ nghiên cứu về các đặc tính cấu tr c và

sự ức chế ho t đ ng α-D-glucosidase của polysaccharides trọng lượng phân t thấp

(LCMPs-II thu được từ quá trình thủy phân acid C.militaris ết quả cho thấy các

polysaccharides của LCMPs-II có khả n ng ức chế enzyme cao h n so với các polysaccharides tự nhiên M t nghiên cứu mới nhất của D Stojkovic và cs , khi so

sánh tác dụng ức chế enzyme này của lo i nấm khác nhau, trong đó có C.militaris ết quả cho thấy ở nấm C.militaris, khả n ng ức chế enzyme α-glucosidase đ t , ở nồng

đ mg mL Song và cs của mình cũng đ thực hiện m t nghiên cứu chứng minh r ng cao

chiết từ nấm C.militaris có khả n ng ức chế lo i enzyme này , c ng với đó đ

chứng minh được r ng khi CPS có sự thay đổi về mặt cấu tr c, khả n ng ức chế enzyme cũng từ đó thay đổi theo Từ các nghiên cứu trước đây, có thể thấy đây là m t hướng nghiên cứu có triển vọng trong việc ứng dụng loài nấm này để điều trị các bệnh về đường huyết

1.4.2 Tình hình nghiên cứu trong nước

Mối tư ng quan gi a khả n ng ức chế lo i enzyme nói trên và khả n ng h trợ điều trị bệnh tiểu đường đ được th nghiệm và chứng minh trên nhiều đối tượng khác nhau như nghiên cứu của Đái Thị Xuân Thu và cs thực hiện trên cao chiết lá ổi, hay m t nghiên cứu trên m t số loài cây dược liệu của Lê Quốc Duy và cs Tuy

nhiên đối với khả n ng h trợ điều trị bệnh tiểu đường của nấm C.militaris, các nghiên

cứu trong nước chỉ chủ yếu tập trung vào hướng th nghiệm trên đ ng vật, ch ng h n như th nghiệm trên mô hình chu t bị gây bệnh bởi Streptozotocin Lao Đức Thuận và

cs, Như vậy, cần phải có nh ng nghiên cứu mới về khả n ng ức chế enzyme để làm r h n về khả n ng h trợ điều trị bệnh tiểu đường của loài nấm này

CHƯƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 VẬT LIỆU

- Hệ sợi t và quả thể nấm C.militaris được nhân giống t i khoa Sinh - Môi trường,

trường Đ i học Sư ph m - Đ i học Đà N ng

Hình 2.1 Mẫu hệ sợi và quả thể nấm C.militaris được nhân giống

t i ph ng nghiên cứu khoa Sinh – Môi trường

- Enzyme α-glucosidase được cung cấp bởi h ng Sigma – Aldrich

2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Quy trình thí nghiệm được thực hiện theo s đồ ở Hình bên dưới

Hình 2.2 S đồ bố trí thí nghiệm