KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược học FULL (DL và DLS) khảo sát khả năng ức chế vi khuẩn gây bệnh mụn trứng cá propionibacterium acnes của cao chiết từ cây trứng cá

TRƯỜNGĐẠIHỌCTÂY ĐÔKHOADƯỢC-ĐIỀUDƯỠNG KHOÁLUẬNTỐTNGHIỆPĐẠIHỌCC HUYÊN NGÀNH DƯỢC... GiátrịMICcủacaochiếttừláT rứngcáđốivớidòngvikhuẩnP.acnes134Nlà10mg/ ml.Đồngthờitiếnhànhđịnhtínhcáchợpchấ

TRƯỜNGĐẠIHỌCTÂY ĐÔKHOADƯỢC-ĐIỀU

DƯỠNG

KHOÁLUẬNTỐTNGHIỆPĐẠIHỌCC HUYÊN NGÀNH DƯỢC

LỜICẢMƠN

Quaquátrìnhthựchiệnkhoáluậntốtnghiệp,emđãhọchỏiđượcrấtnhiềukiếnth ứ c, kỹnăngvàkinhnghiệmquýbáutừquýThầy,CôvàBạnbè.Emxin gửilờicảmơ n sâusắcđến:

XingửilờicảmơnchânthànhđếnHộiđồngchấmkhóaluậntốtnghiệpgồmThầyPGS.TSTrầnCôngLuận,ThầyPGS.TSNguyễnVănBá,ThầyThs.ĐỗVănMãiđãnhậnxétvàđưaraýkiếngiúpemhoànthiệnbàikhóaluận

XingửilờicảmơnchânthànhnhấtđếnChamẹvànhữngngườithânyêuđãđ ộ n

g viên,tiếpsứcemtrongsuốtquátrìnhhọctập

CảmơncácbạntrongtậpthểlớpĐHDược7Bvàtấtcảmọingườiđãgiúpđỡv à đónggópýkiếnchomìnhtrongsuốtquátrìnhhọctập

Cuốilời,xin kính chúcquýThầy,Cô,Cha,Mẹ, Anh,Chịvàcácbạnluônkhoẻmạnhvàthànhcôngtrongcuộcsống

Chânthànhcảmơn!

LỜICAMKẾT

Emxincamđoanđâylànghiêncứucủabảnthântôi.Cácsốliệu,kếtquảtrìnhbàytrongbàikhóaluậnnàylàtrungthựcvàchưađượcaicôngbốtrongbấtkỳkhóaluậnnàotrướcđây

TÓMTẮTNỘIDUNG

Khángsinhtổnghợpđượcsửdụngtrongđiềutrịbệnhtrứngcáhiệnnaythườngdẫnđếnk

h ả n ă n g đ ề k h á n g t h u ố c Trongn h ữ n g n ă m g ầ n đây,câyT r ứ n g c á ( Muntingi

nhiềuhợpchấtsinhhọccókhảnăngk h án g khuẩn,khángviêmvàchốngoxyhoácao.Vìvậyvớim ụctiêuđềtàilàđánhgiávàsosánhkhả năngứcchếvikhuẩnPropionibacteriumacnestừ cácbộphậncâyTrứngcárấtc ầ n thiết.Lá,vỏthân,quảchínvàquảnoncâyTrứngcá(Muntingiacalabu raL.)đượcchiếtx u ất bằnghệthốngđunhồilưuvớidungmôiethanol96%thuđược

bốnloạicaochiết.Khản ăn gkhángkhuẩncủacaochiếttừcâyTrứngcáđượckhảosátbằngphươ

ngphápkhuếchtán trêngiếngthạchtrêndòngvikhuẩnP.acnes134Nlưutrũtạiphòngthínghiệm

VisinhtrườngĐạihọcTâyĐô.Kếtquảthínghiệmhoạttínhkhángkhuẩnchothấytấtcảcácloại

cao chiếttừbộphậncâyTrứngcáđềucóhoạttínhứcchếdòngvikhuẩnPropionibacteriuma cn es 134

caochiếttừláTrứngcácókhảnăngứ c chếdòngvikhuẩnP.acnes134Ncaonhấttrongbốnloạic

aokhảosát,ởnồngđộ200mg/ml;100mg/mlvà50mg/

mllầnlượtlà23±1,732mm;19±0,000mm;16,33±2,082m m GiátrịMICcủacaochiếttừláT

rứngcáđốivớidòngvikhuẩnP.acnes134Nlà10mg/

ml.ĐồngthờitiếnhànhđịnhtínhcáchợpchấtsinhhọctrongcaochiếttừláTrứngcá,k ếtquảthuđư ợccaochiếtethanoltừláTrứngcácóchứahợpchấtsinhhọcnhưflavonoid,saponin,tanin.Từkếtq uảđềtàichothấy,caochiếtethanoltừlá,vỏthân,quảchínvàquản o n Trứngcálàmộtnguồnnguyê nliệutựnhiên,tiềmnăngchonhữngnghiêncứusâuhơntrongđiềutrịbệnhtrứngcá,đặcbiệtlànguyên nguyênliệutừláTrứngcá

Từkhóa:câyTrứngcá,Propionibacteriumacnes,tínhkhángkhuẩn

MỤCLỤC

Trang

LỜICẢMƠN i

LỜICAMKẾT ii

TÓMTẮTNỘIDUNG iii

MỤCLỤC iv

DANHSÁCHBẢNG vii

DANHSÁCHHÌNH viii

DANHMỤCTỪVIẾTTẮT ix

CHƯƠNG1:MỞĐẦU 1

CHƯƠNG2:TỔNGQUANTÀILIỆU 3

2.1 TỔNGQUANVỀBỆNHTRỨNGCÁ 3

2.1.1 Phânloạibệnhtrứngcá 3

2.1.2 Cơ chếgâybệnhtrứngcá 4

2.1.3 Những phươngphápđiềutrịbệnhtrứngcáhiệnnay 5

2.2 VIKHUẨNPROPIONIBACTERIUMACNES 9

2.2.1 Đặcđiểmcủavi khuẩnPropionibacteriumacnes 9

2.2.2 Cơchếgâybệnh trứngcávikhuẩnPropionibacteriumacnes 10

2.3 TỔNGQUANVỀCÂYTRỨNGCÁ 12

2.3.1NguồngốccâyTrứngcá 12

2.3.2 Phânloạicâytrứngcá 13

2.3.3 Thànhphần hoáhọcvàcáchợpchất tiêubiểucủacâyTrứngcá 13

2.3.4 TácdụngdượclýcâyTrứngcá 15

2.4 TÌNHHÌNHNGHIÊNCỨUVÀỨNGDỤNGCAOCHIẾTTỪCÂYTRỨNGCÁTRONGVÀ NGOÀINƯỚC 18

2.4.1 TìnhhìnhnghiêncúuvàứngdụngcaochiếttừcâyTrứngcá trênthếgiới 18

2.4.2 TìnhhìnhnghiêncúuvàứngdụngcaochiếttừcâyTrứngcáởViệtNam 19

CHƯƠNG3PHƯƠNGTIỆNVÀPHƯƠNG PHÁPNGHIÊN CỨU 20

3.1 THỜIGIANVÀĐỊAĐIỂM 20

3.2 PHƯƠNGTIỆNNGHIÊNCỨU 20

3.2.1 Nguyênvậtliệu 20

3.2.2 Dụngcụvàthiếtbịthínghiệm 20

3.2.3 Hóachấtvàmôi trường 20

3.3 PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU 21

3.3.1 Thiết kếnghiêncứu 21

3.3.2 Cỡ mẫu 21

3.3.3 Phươngphápchọnmẫu 21

3.3.4 Nội dungnghiêncứu 22

3.4 PHƯƠNGPHÁPXỬLÝSỐLIỆU 31

3.5 SƠĐỒNGHIÊNCỨU 31

3.6.VẤNĐỀYĐỨC Error!Bookmarknotdefined. 3.7.BIỆNPHÁPKHẮCPHỤCSAISỐ 31

CHƯƠNG4:KẾTQUẢVÀTHẢOLUẬN 32

4.1 KẾTQUẢ 32

4.1.1 Chiếtcao 32

4.1.2 Nuôicấyvà định danhvikhuẩnPropionibacterium acnes 32

4.1.3 KhảosátkhảnăngứcchếvikhuẩnPropionibacteriumacnescủacaochiếtcâyT r ứ n g cá. 36 4.1.4XácđịnhnồngđộứcchếtốithiểucủacaolácâyTrứngcátrênvikhuẩn Propionibacteriumacnes 38

4.1.5.ĐịnhtínhmộtsốhợpchấtthiênnhiêntrongcaochiếttừláTrứngcá 40

4.2 THẢOLUẬN 41

4.2.1 Chiếtcao 41

4.2.2 Phânlậpvàđịnhdanhvikhuẩn 41

4.2.3 KhảosátkhảnăngứcchếvikhuẩnPropionibacteriumacnescủacaochiếtcâyt r ứ n g cá 42 4.2.4 Xácđịnhnồngđộứcchếtốithiểucủacaolátrứngcátrênvikhuẩn Propionibacteriumacnes 43

4.2.5 ĐịnhtínhmộtsốhợpchấtthiênnhiêntrongcaochiếtethanolláTrứngcá 44

CHƯƠNG5KẾTLUẬNVÀĐỀNGHỊ 46

5.1 KẾTLUẬN 46

5.2 ĐỀNGHỊ 46

TÀILIỆUTHAMKHẢO 47

PHỤLỤC 56

Phụlục1: Tổnghợpsốliệuthínghiệm 56

Phụlục2: Kếtquảphântíchthốngkê 57

DANHSÁCHBẢNG

TrangBảng2.1.Tácdụngcácchấtsửdụngtrongđiềutrịmụntrứngcá

Bảng2.2.SảnphẩmngoạibàoP.a cnes

Bảng2.3.KhảosátsơbộthànhphầncáchợpchấtcóchứatrongquảTrứngcá Bảng3.1:CôngthứcmôitrườngT

YEGagar Bảng3.2.Địnhtínhmộtsốhợpchấ

ttrongdịchchiếtethanolcaochiếttrứngcá Bảng4.1.KếtquảđộẩmcaocâyTr

ứngcá Bảng4.2.Kếtquảhiệusuấtchiếtc

aotừcâyTrứngcá Bảng4.3.Khảnăngứcchếvikhu

ẩnP.acnescủacácloạicaoethan

olcâytrứngcábằngphươngphápkhuếchtántrêngiếngthạch Bảng4.4.Kếtquảnồngđộứcchế

vikhuẩntốithiểu(MIC)củacaoc

hiếtláTrứngcáđốivớivikhuẩnP.

acnes

Bảng4.5.KếtquảđịnhtínhmộtsốhợpchấttrongdịchchiếtethanolcủaláTrứngcá

40

DANHSÁCHHÌNH

TrangHình2.1.Nangtuyếnbãnhờn

Hình2.2.VikhuẩnP.acnes

Hình2.3.Câytrứngcá Hình2.4 Quảnon

vàquảchíncâyTrứngcá Hình3.1 Sơđồ

bốtríchiếtcaotừcácbộphận câyTrứngcá Hình3.2.Sơđồnuôicấyvàphânlập

vikhuẩnProionibacteriumacnest ừmẫulưutrữ

26Hình3.3.Sơđồkhảosátkhảnăngứ

cchếvikhuẩnP.acnescủacaochiết

Hình3.4 Sơđồ

bốtrítổngquátthínghiệm Hình4.1.Khuẩnlạcdòngvikhuẩn

phânlậptrênmôitrườngTYEGagarcóbổsung0,002%bromocresolpurple Hình4.2 Hìnhtháitế

bàovikhuẩnP.acnesdướikínhhiể

nvi Hình4.3

Thửnghiệmcatalasetrêndòngvi khuẩn134N Hình4.4 Kiểmtrakhảnăngsinh

indoltrêndòngvikhuẩn134N Hình4.5.Kiểmtra

khảnăngphảnnitrathóatrêndòngvikhuẩn134N Hình4.6.Kiểmtrakhả

nănglàmdịchhóagelatintrêndòngvikhuẩn134N

Hình4.7.KhảnăngứcchếvikhuẩnP.acnescủacaochiếteth

anolcácbộphâncâyTrứngcáởnồngđộ200mg/

ml;100mg/ml;và50mg/ml Hình4.8.VòngvôkhuẩncủacaochiếtethanolláTrứngcáức

chếvi

khuẩnP.acnesởn ồ n g độ200mg/ml;100mg/mlvà50mg/

ml Hình4.9.GiátrịMICcủacaochiếtláTrứngcáứcchếvikhuẩn

P.acnes

CHƯƠNG1:MỞĐẦU

Bệnhtrứngcálàbệnhlývềdathườnggặpởlứatuổithanhthiếuniên,đặcbiệtlàgiaiđoạndậythì,cókhoảng80%thanhniênViệtNambịbệnh

trứngcávớimứcđộn ặn g nhẹkhácnhau(Phạm

VănHiển,1997).Bệnhtrứngcáthườngxuấthiệnvùngdamặt,lưngvàngực.Tuyítảnhhưởngsứckhoẻnhưngảnhhưởngkhálớnđếntâmlý,th ẩm mỹvàgiaotiếpxãhộicủabệnhnhân.Nghiêncứuởthanhthiếuniênbịbệnhtrứngcáchothấymứcđộlolắng,ngạigiaoti

ếpcaohơnsovớingườibệnhđộngkinhhayhensuyễn(Mallonetal.,1999).Cónhiềunguyênnh

ângâybệnhtrứngcánhưmấtc â n bằngnộitiếttố,nhiễmkhuẩn,docăngthẳng,chếđộd

inhdưỡnghaymỹphẩm(Parketal.,2004).VikhuẩnP.acnesđượcxemlàmộttrongcá

cnguyênnhânchínhgâybệnhtrứngcá(Jappe,2002).TạibệnhviệnDaLiễuthànhphốHồChíMinhkhảosát87 trường hợpbệnhnhântrứngcácó42trườnghợp(chiếm48,3%)

phânlậpđượcv i khuẩnP.acnes(NguyễnThanhHùng,2013)

Khángsinh,retinoidvàmộtsốchấtkhácnhưbenzoylperoxid,acidsalicylic,a c i

d a z e l a i c v à a n p h a

-h y d r o x y c -h o t á c d ụ n g đ i ề u t r ị b ệ n -h t r ứ n g c á t -h ô n g t -h ư ờ n g (Leyden,2003).Tuynhiêncácthuốcnàykèm

CâyTrứngcáhaycòngọilàMậtsâmtrongnhữngnămgầnđâyđượccácnhàkh oahọcquantâmdochứanhiềuhợpchấtsinhhọccókhảnăngkhángkhuẩn,khángviêmvàchốngoxyhóacao.Lá, vỏthân,quảvàrễsửdụngnhưmộtphươngthuốcdângi an điềutrịsốt,cảmlạnh, bệnhtiêu hoá,thuốckhángkhuẩnở khuvựcĐông NamÁ.C á c nghiêncứuđãchứngminhnhữnghợp

ĐôngNamÁ(Chin,1989),dễthuháivàrẻtiềnlànguồnnguyênliệusẵncódễtìm

Vớinhững l ídot rê n đ ề tà i“ K h ả o sát kh ả n ă n g ứcchế vi khuẩngây b ệ n h mụn t

rứngc á P r o p i o n i b a c t e r i u m a c n e s c ủ a c a o c h i ế t t ừ c â y T r ứ n g c

á ( Muntingiacalabura L.)”đãđượcthựchiệnvớimụcđíchcụthểsau:

1) XácđịnhvàsosánhkhảnăngứcchếvikhuẩnPropionibacteriumacnescủacaochiếttừlá, vỏthân,quảchínvàquảnoncâyTrứngcá(MuntingiacalaburaL.)

2) ĐịnhtínhmộtsốhợpchấtthiênnhiêncótrongcaochiếttừCâyTrứngcáchoh o ạ t tínhkhángkhuẩncaonhất

CHƯƠNG2:TỔNGQUAN TÀILIỆU2.1 TỔNGQUANVỀBỆNHTRỨNGCÁ

Bệnhtrứngcá đượcmôtảsớmnhấttrongcácbàiviếtHyLạp cổđại củabácsĩByzantineAetiusAmidenus.Từ“acne”xuấtpháttừacmetrongtiếngHyLạpcónghĩal à “điểm

”h o ặ c “ t ạ i c h ỗ ” , acmev i ế t s a i t h à n h a c n e v à đ ư ợ c s ử dụngđ ế n ngàynay(Humgara

etal.,2013).

Bệnhtrứngcálàbệnhvềdaphổbiếnnhấtđặcbiệtởlứatuổithanhthiếuniên.B ện htrứngcákhôngthểđịnhnghĩalàbệnhtruyềnnhiễmvìvikhuẩngâymụnkhôngc h ỉ hiệndiệntrêndangườibệnhmàcòntrêndangườikhoẻmạnh.Bệnh

trứngcáđượchìnhthànhdosựtăngtiếtchấtnhờn,tếbàophễubịsừnghoálàmtắcnghẽncổnanglông, sựgia tăngmậtđộvi khuẩn bêntrong nang lông và sửdụng tếbào chết cùngvớichấtnhờnpháttriểntạothànhnhânmụnnhỏ(microcomedone)khôngthểpháthiệnbằngmắtthường(PlewigvàKligman,2000)

2.1.1 Phânloạibệnhtrứngcá

TheoPhạmHoàngKhâm(2011)bệnhtrứngcáđượcchiathành2dạnglàtổnthươngkhôngviêmnhưmụnđầutrắng(whitehead)vàmụnđầuđen(blackhead)vàd ạ

n g viêmbaogồmsẩn,mụnmủ, mụnbọc,mụnnang

- Mụnđầuđenhìnhthànhdochấtbã

bàitiếtvàtếbàochếtlàmtắclỗnanglôngnhưngb ề mặtdahởnênnhânmụnbịkhôngkhíoxyhoátạomàuđen.Nhìnvàonanglôngthấymàuđennêngọilàmụnđầuđenhaymụncócấutrúcmở

- Mụnđầutrắnghìnhthànhkhicó quá nhiềuchấtdầuvàtế bàochếtgâybíttắclỗnanglôngvàkhônghởrada,nêngọilà“nhânđóng”

2.1.2 Cơchếgâybệnhtrứngcá

Nhữngyếutốchínhgâybệnhtrứngcálànộitiếttốkíchthíchtiếtbãnhờn,sựsừnghoá(Keratinhoá)bấtthườngcủaphễunanglông,tăngsốlượngvisinhvậttrêndavàphảnứngviêmcủatếbàochủ.Trongđósựtăngtiếtbãnhờnđượccoilàđiềukiệncần,phảnứng

viêmđượcxemlàyếutốthenchốt,cònvikhuẩnP.acnesđóngvait r òquantrọnggâyrabệnhtrứn gcá(Loveckovaelal.,2002).Ngoàiracòncácyếutốk h á c nhưyếutố di truyền,chế độ

lạmdụngmỹp h ẩ m c ũ n g c ó liênq u a đ ế n t ì n h t r ạ n g b ệ n h t r ứ n g c á ( N g u y ễ n T h a

n h H ù n g v à NguyễnTấtThắng,2013)

2.1.2.1 Sựtăngsinhtiếtbãnhờn

Bãnhờnđượcsảnxuấtbởituyếnnhờn,chúngcóởmọinơitrêncơthểđặcbiệtở trán,cằmvàlưng,córấtítởtayhoặcchân,khôngcóởlòngbàntayvàlòngbànchân.Cóhaiquátrìnhliênquanđếnsựtổnghợpchấtbéocủabãnhờn:quátrìnhtổnghợptriglycerid,acid

trìnhtổnghợpsqualenvàcholesterol(Downieetal.,2004).Hầuhết cáctuyếnbãnhờnđổvàonanglôngtrênbềmặtdađểgiữẩmcholànda.Nhữngngườibịbệnhtrứngcáthườngcótuyếnbãnhờntiết nhiềuchấtnhờntrênmứccầnthiết.Chấtnhờnsẽtíchtụtronglỗchânlôngdẫnđếntắclỗchânl ôn g hìnhthànhnhântr ứn g cá.Thànhphầnchấtnhờntrênda bệnhn h ân bệnhtrứngcáthườngcósqualenvàwaxestercaohơnbìnhthườngvàcácacidbéotựdo (như linoleic) thấp hơnbình thường Sự thiếu hụtacid

ius,1996).

Propionibacterium acnesthuộcchủngvi khuẩnkỵkhíbắt buộc,khuẩn

lạcmàuv à n g nhạthoặcvàngđậm(dokhảnăngsinhacidpropionic)trênmôitrườn

gTYEGag ar (cóbổ sungbromocresolpurple),tếbàohình que,dươngtínhvớicatalase.Trong

dòngvikhuẩnthuộcgiốngPropionibacteriumthìP.granulosumvàP.avidumkhôngcó khảnăngsinhtryptophan,trongkhiP.acneschokếtquảdươngtính.Đâylàmộttro ng nhữngđặcđiểmquantrọnggiúpphânlậpđượccácdòngP.acnes(Kishishitaetal.,1980).

-

Khiđiềutrịkhángsinhtạichỗthấtbại(6-8tuần),nênphốihợpkhángsinhtoànthâncùngvớikhángsinhtạichỗnhư:tetracyclin:500mgx2lần/ngày;erythromycin5 0 0 mgx2lần/ngày;roxithromycin150mgx2lần/ngày;levofloxacin500mgx2lần/ngày

ngsinh20%năm1978vàlên68%năm1996.Theomộtsốđiềutragầnđây,cácnướcĐịa

TrungHảicótỷlệđềkhángcủaP.acnescaonhất vớierythromycinvàclindamycin.ỞTâ

yBanNhatỷlệkhángvớihailoạikhángsinhnàylầnlượtlà91%và92,4%.ỞHyLạp,tỷlệ

P.acnesđềkhángcảhailoạierythromycinvàclindamycinlà75,3%vàởItalialà59,5% (Rossetal.,2002).TheoDrenoetal.,2001côngbốtỷlệdòngvikhuẩnP.acnesphânlậptừbệnh

nhânchủyếul à bịtổnthươngkèmtheoviêm,khánglạierthromycin52%.Nhữngloạikhángsinhđ i ều t r ị b ệ n h t r ứ n g n h ư a m p i c i l i n , e r y t h r o m y c i n , r o x i t h romycin,c

l i n d a m y c i n đ ư ợ c khuyếncáokhôngsửdụngđiềutrịdàihạn(quá3tháng)

(Nishijima,2000).Khảnăngk h á n g thuốccủavikhuẩngâymụnkhôngchỉlâylangiữacácdòngvikhuẩntrêndang ười bệnhmàcònlâytruyềnquangườithânvà

nhữngngườimàhọtiếpxúc(Sheafere t al.,2001).Khảnăngđềkhángthuốckhángsinhcủ aP.acnescóliênquanđếnđộtbi ến gentrên16Svà23S-

rRNA,đượcphânlậpởcácnướcNhậtBản,Úc,HoaKỳvàCh âu Âu(Rossetal.,2002).Độtbiế

ngen23-rRNAkhánglạikhángsinhthuộcnhómmacrolid-lincosamidestreptograminB,đặcbiệtlàerythromycinvàclindamycin(Rosse t al,.2002).T

ạiViệtNam,khảosát87bệ nh nhânt ha mgianghiêncứutạophòngk h á m bệnhviệnDaLiễuthànhphốHồChíMinhtỷlệđềkhángkhángsinhnhưsaulindamycin88,1%;azthromycin16,7%;tetracyclin0%,doxycylin0%;minocyclin0 % ; t r i m e t h r o p r i

m / s u l f a m e t h o x a z o l 9 5 , 2 %

(NguyễnT h a n h H ù n g v à N g u y ễ n T ấ t Thắng,2013).Bêncạnhkhảnăngkhángkhángsinhtrongđiềutrịbệnhtrứngcá,cácl o ạ i khángsinhthườnggâymộtsốtácdụngkhôngmongmuốnnhưkíchứngda,mẫnngứa,khôda, d a m ẫ n cả m vớiánh s á n g (Nguyễn H ữ

u Sáu, 2010).Vìvậyviệclự a chọnthuốcphảiphùhợpvớitừngbệnhnhân,từngthểbệnhvàtuânthủtheođiềutrịcủathầythuốcmớiđạtkếtquảmongmuốn

2.1.3.2 CácPeroxid

Làl o ạ i t h u ố c s á t k h u ẩ n c ó t á c d ụ n g c h ố n g v i k h u ẩ n gâymụn,k h á n g v i ê

m ,benzoylp e r o x i d l à m g i ả m n h a n h s ố l ư ợ n g P.a c n e s t ạ i v ù n g t h ư ơ n g t ổ n đ ồ n

g t h ờ i t huốc làmgiảmlượngacidbéotrênbềmặtdavàứcchếtạonhântrứngcá.Benzoylperoxidcótácdụngtốtđốivớitrứngcácóviêmởmứcđộnhẹhaytrungbình.Nêndùngthuốccónồngđộtừ2,5-5%bôivùngmặt,vùnglưngcóthểdùngthuốcvớinồngđộcao hơn từ5-10%, khởi đầucó thểbôingày2lần, khibệnh giảmtuầnbôi 1

-

2lần.Nênsửdụngcôngthứccóchấtnềnlànước(water-basedformulation)vìítkíchứ n g dahơnloạicồn.Thuốcnàythườnggâykíchthíchdavàlộtda.Cầntránhnắngtrongthờigiansửdụngthuốcvìánhnắnglàmchodacháyđỏ,đen

sạm(SimonartvàDramaix,2005).Nếu dùngđồngthờivới kemchốngnắngcóchứa

acidp a r a a m i n o b e n z o i c sẽlàmdasậmmàumộtthờigian(LêKimDuệ,2000)

2.1.3.3 DẫnchấtvitaminAacid(tretionid,isoteinoin)

Ngàynayđượcdù ng nhưmộtliệuphápđiềutrịcáctrườnghợpbệnhtrứngcánặnghoặctrứngcáđềkhángtrịliệuthôngthường.Thuốcbôiretinoid:tretionin,adapalenevàisotretinoinlàloạithuốccóhiệuquả.Thuốccótácdụngmềmda,ứcchếsựpháttriểnvikhuẩ

nP.acnesvàtạođiềukiệnchocácthuốckhángkhuẩntạichỗpháthuytácdụngtốthơn.

Mộtsốtácdụngkhôngmongmuốncủathuốc:

- Khảnănggâyquáithailàtácdụngkhông mongmuốncầnlưuýnhất.Thuốccóthể gâydịdạngtrênhệthốngthầnkinhtrungương,cơquanthínhgiác,tuyếnứcvàhệthốngtimmạchthainhi(NguyễnHữuSáu,2010).Cácthuốcretinoidc h ố n g chỉ

định chophụ nữmangthaivàphụnữtrong độtuổi sinhsản(Yentzeret al.,2009).

- Khôdavàniêmmạc,làmdavàniêmmạcdễbịtổnthươngvàkíchứng,bệnhnhâncảmgiácbỏngrátdatrởnênđỏ,bongvẩy

- Điềutrịbằngcôngnghệánhsángtialaser:sửdụngliệuphápquang,ánhsángphổrộng.Tialaserchothấykếtquảgiảmmụntrongthờigianngắnnhưngcầncóthêmn hiề

u nghiêncứulâudàivàsosánhliệuphápcũ(Sakamotoetal.,2010)

- Bêncạnhđóthảodượcđượcdùngđiềutrịmụntrứngcákhôngchỉcókhảnăngnhưmộtchấttiêudiệtvisinhvậtmàcònlànhữngchấtcókhảnăngứcchếsảnsinhsảnp h ẩm ngoạibà

ocủaP.

acnes.Thảodượcdùngđiềutrịmụntrứngcáchothấytácdụngk h án g khuẩn,khángviêm,chốn goxyhoávàứcchếhormonandrogen(Sasiingetal.,2 0 1 2 ) Mộtsốnghiêncứuvềhoạtc hấttừthảodượccótácdụngứcchếvikhuẩnP.acnes:

+Bằngphươngphápkhuếchtángiếngthạch,dịchchiếtethanolcủalácâyLiễuđ ỏ Exco ecaria c ochinchinensisL o u r vàl á câyXôthơmSalvia o f f i c i n a l i s L o ur ( Họ hoam ôi)nồngđộ5%ứcchếP.acnesvớiđườngkínhvòngvôkhuẩnlầnlượtlà20,5mmvà20,83mm MIClầnlượtlà1,56mg/mlvà6,25mg/ml(Brovellietal.,2005)

Tácdụngcủacácchấtsửdụngtrongđiềutrịmụntrứngcáđượctrìnhbàyởbảng2.1n hưsau:Bảng2.1.Tácdụngcácchấtsửdụngtrongđiềutrịmụntrứngcá

Bàitiếtc hấtnhờn

Sừng hoáphễuna

P.acnescónhiềudạngkhácnhau.Dựavàoquátrìnhlênmen,sửdụngđườngr ib os e,erythritolvàsorbitol,quansátđược5typeP.acneskhácnhau.Dựatrênxétn g h i ệm huyếtthanhvàphântíchthànhphầnđườngtrênthànhtếbào,chiaP acnest h à n hha

idạng:typeI(đườngglactosethamgiacấutạothànhtếbào)vàtypeII(chỉcóđư ờn g manosetrongcấutạothànhtếbào)

(JohnsonvàCummins,1972).TheoMcDowel(2005)P.acnesđượcchiathànhhaitypeIvà

IIdựavàokhácbiệtvềkiểugendựatrênbiếnthểvềkiểugen(reca,hly).Gầnđây,mộtdạngmớiđượcmôtảlàtypeIIItrêndangườidịứng

2.2.2 CơchếgâybệnhtrứngcávikhuẩnPropionibacteriumacnes

P.acneslàmộttrongnhữngthànhphầncủahệvisinhvậtbìnhthườngtrênda(Holde maneta l ,1977) Ở những n gư ời bệnht r ứ n g cá, vi kh uẩ n n à y pháttriển rấ tmạnh

dosựbíttắclỗchân lôngtạomôi trườngyếmkhí, tạo điều kiệnthuậnlợicho

huỷmôdocáccácsảnphẩmchuyểnhoá(acetat,propionat,indol,porphyrin),enzymvàcácsảnphẩmthoáidưỡngcủaglucosevàfructose.Histamin,tryptaminvàn h ữ n g chuỗiaci

dbéongắnđượctìmthấytrongmôitrườngnuôicấyP.acnes,cácchấtnàycóthểgâyratìnhtrạn gviêm(Csukasetal.,2004).Cácenzymngoạibàovàcácsản phẩmcóhoạttínhsinhhọclàh aiyếutốquyếtđịnhđộnglựccủaP.acnes.

SốlượngP.acnesbêntrongnanglôngtăngmạnhquátrìnhbiếndưỡngdiễnras ả n sinh

nhiềuacidbéotựdo,cácchấtnàykhuếchtánquathànhnanglôngkíchthíchh o ạt đ ộ n g c ủ

a h ệ t h ố n g miễnd ị c h t ự n h i ê n v à c h u ỗ i

p h ả n ứ n g v i ê m k í c h h o ạ t (LoveckovavàHalikova,2002).Ngoàirachúngcókhảnăngphávỡcácnanglôngbởicácenzymthuỷphânlysosomgâyraphảnứngviêmhạbì

VikhuẩnP.acnescókhảnăngchốnglạithựcbàovàcóthểtồntạitrongđạit h ự c bàomộtth

ờigiandàidocấutrúcthànhtếbàocủavikhuẩnnàycóthểtồntạithờig ian dàitrongmô,kíchthíchp

hảnứngviêmmiễndịchliêntụcvàlâudài,gâyviêm(Westeretal.,1985).Coatesetal.,2002chorằ ngthànhtếbàoP.acneschúngđượcb ả o vệbởikhángsinhvàhệthốngmiễndịchtếbàochủ(Coat esetal.,2002)

Bảng2.2.SảnphẩmngoạibàoP.acnes

Lipase Triglyceride Dinhdưỡng,sảnxuất

acidbéotựdo, tăngkếtdínhvớiPhospholipaseC Phospholipid Gâyrốiloạnchứcnăng

mangtếbàoProteases Collagen,keratin Dinhdưỡng,tănghoạt

tính,sảnsinhchemotaxins,phânhu ỷprotein,xâm lấnmôlân

Hyaluronidase,

neruaminidase

Mucopolysaccharides Xâmlấnmôlâncận,xuất

huyếtdưới daAcidphosphatase Đườngphosphat Dinhdưỡng

Eadyetal.,1994

a c u r u c o , t a p a b o t i j a , n i g u a ( V e n e z u e l a ) CâyT rứngc á c ó n g u ồ n g ố c từmiềnnamMexico,Caribe,TrungMỹ,miềntâyNamMỹvềphíanam

củaPeruv à BoliviavàkhuvựcchâuÁ(Chin,1989).CâyTrứngcácóthểphát triểntốttrênvùngđ ấ t n g h è o d i n h d ư ỡ n g c ó k h ả n ă n g c h ị u cá c đ i ề u k i ệ n c h u a mặnv à k h

ô h ạ n Đư ợ c trồngrộngrãiphổbiếnlàloạicâyvenđườngtạiViệtNam,Malaysia,Phillipines.Hạtcủacâyđượccácloàichimvàdơiănquảpháttán,giúpcảithiệncácđ i ề u kiệnđấtvàgópphầngiúpcácloàithựcvậtkháccóthểsinhsốngđượcởvùngđấtnghèodinhdưỡng.Tuynhiên,

4cm,đầulánhọn,mépkíarăngcưa,haimặtcólông,màutrắngnhạtmặtdưới,gângốc4,cuốngládài3-5cm,cólông;lákèmhìnhkim,gấpkhúc.Hoamọcđơnđộc,tụhọpthành2-3cáiởkẽlá,cuốnghoadàihơncuốnglá,cánhhoahìnhxoanmàutrắng,đàicó5răngcólôn

gdàyởhaimặt,tràng5cánhhìnhbầudục,thắtlạiởmóng;nhịnhiềuđínhtrêntrụđĩabaoquanhbầu,chỉnhịmảnh;bầu

hìnhtrứng cól ôn g

tuyến,5-7 ôchứan hi ều noã n Quả nạc tr òn nh ẵn, đư ờn g

kínhkhoảng1-1,5cm,khicònnonmàuxanhchuyểnvàngrồiứngđỏvàbónglángkhic h í n , vịngọtvàmọngnướccómùithơm

đặctrưng,bêntrongchứanhiềuhạtnhỏ(0,5m m) màuvàngtrongnhưtrứngcá(VõVănChi,2004)

-hydroxyflavone,i s o k a e m f e r i d e , 3,3’-d im eth ox y- dimethoxy-5,7,4’-trihydroxyflavone,7-h y d r o x y iso fl av o n , 7 , 3 ’ , 4 ’ -

5,7,4’-trihydroxyflavone,3,8-trimethoxyisoflavone,( 2 S ) -

5’-hydroxy-7,8,3’,4’-t e 5’-hydroxy-7,8,3’,4’-t r a m e 5’-hydroxy-7,8,3’,4’-t h o x y f l a n v a n (Mahmoode5’-hydroxy-7,8,3’,4’-tal.,2013).

Cáchợpchấtkhác:acid3,4,5-trihydrobenzoic,lupenon,acid2,3

2.3.3.2 Quả

QuảTrứngcárấtđượctrẻemưathíchcóthểănquảngaykhiháihoặclàmmứtvớimùithơmđặctrưng

KếtquảkhảosátsơbộthànhphầncácchấtcóchứatrongquảTrứngcátheonghiêncứu củaVijayanand(2015)đượcthểhiệnbảng2.3

Bảng2.3.KhảosátsơbộthànhphầncáchợpchấtcóchứatrongquảTrứngcá

Dungmôi Hợpchất Ethanol Methanol Chloroform Nước

100gkhốilượngquảtươi.Từngkếtquảđóchothấylượngphenolic/

flavonoiddồidàotrongquảTrứngcálàtiềmn ăn g nghiêncứuchấtchốngoxyhoávàkhángkhuẩn.TheoGomathi(2013)dịchchiếtquảTrứngcáđịnhlượngbằngphươngphápquangp h ổ chokếtquảchứamộtlượngđángkểvitaminC(33,6AAE/gd ị c h chiết),vitaminE(14,7mgTE/

gdịchchiết),anthocyanin(82,4mgCGE/gdịchchiết),flavonoid( 1 7 3 , 2 mgRE/

gdịchchiết).Ngoàiramộtsốchấtkhácnhưphytol(26,26%),acidn-h ex an acetic

(11,97%),acidcyclopropaneotanoic(10,26%),γ-sitosterol(11,15%),stigmasterol (7,20%)vàcampesterol(4,47%)làthànhphầnchínhtrongchiết

15xuất.KếtquảchothấyquảTrứngcálànguồnbổsungchấtdinhdưỡngcótiềmnăng

8,4’-dihydroxy-7,3’,5’-dimethoxyflavon; 3,5-dihydroxy-6, 7-dime thoxyflavan;(2S)-5’-hydroxy-7,8,3’,4’-tetramethoxyflavanH ợpc h ấ t k h á c :-

sitistenon;6 --gydroxystigmast-4-en-3-one,sitosterol;a c i d syringic;a c i d v a n i l l i c , 3 - h y d r o x y - 1 - ( 3 , 5 - d i m e t h o x y - 4 -

-h y d r o x y p -h e n y l ) p r o p a n - 1 - o n ,

tetracosylferulate;hexacosanol(Mahmoodetal.,2013)

2.3.4 TácdụngdượclýcâyTrứngcá

Trongsuốtnhiềuthậpkỉquacácnhàkhoahọctrênkhắpthếgiớicốgắnkhámpháv ànghiêncứunhiềutácdụngdượclímàcâyTrứngcámanglạichoconngười.CâyT rứngc á đ ã c

h o thấyn h i ề u t i ề m n ă n g d ư ợ c p h ẩ m m ớ i t r o n g t ư ơ i l a i T h e o k i n h nghiệmdângianngườidânPerudùnglásắcvớinướcsửdụnggiảmđaudạdày,sưngtuyếntiềnliệtvàhạsốtgiảmđauđầu(Morton(1987),Zakaria(2007b).Vỏthânsửdụngnhưthuốcgiảmsưngviêm(Zakaria,2006).TạiColombiahoasửdụngnhưloạithuốcanthần,chốngcogiật,trầmcảm.ỞMexico,câytrồngsửdụngđiềutrịbệnhsởi,nhọtmiệngvàđaudạdày

ộctínhcấpcủaláM.calaburat h u h á i t ạ i S e l a n g o r , M a l a y s i a t h ự c h i ệ n b ở i I r

a h i m ( 2 0 1 2 ) D ị c h c h i ế t ethanolláliềuthửnghiệm2000và5000mg/

kgdùngđườnguốngởchuột.Tỷlệtửv o n g ghinhậnđếnngày14saukhiuốngdịchchiếtlà0%,khôngnhìnthấydấuhiệulâm sàng về sựsuyyếucủa độngvật, quansátcấp độtếbàovềmôhọc,sinh

hoámáu,cô n g thứcmáuchothấykhôngcósựbấtthườngnàoởchuột.Nhữngpháthiệnnàychothấ

ydịchc h i ế t l á M c a l a b u r a k h ô n g gâyran g ộ đ ộ c c ấ p t í n h d ù ở l i ề u c a o ( 5 0 0 0 m

g/kg)

Karthyainivà Suresh(2012) n g h i êncứuđộc t ín h cấpcủaquả M ca la bu ra liề u th

ử n g h i ệ m giớihạn1000mg/kgvà2000mg/

kgkhôngcódấuhiệuđộctínhcấphoặctửv o n g ghinhậncảhaimứcliều

2.3.4.2 Hoạttínhgâyđộctếbào

NhữngnămgầnđâyChenetal.,2004nghiêncứuđộctínhtếbàocủaM.calabura,tro

ngđó15hợpchấtphânlậptừdịchchiếtmethanolvỏthânđãđượckiểmtrabằngcácthínghiệmgâyđộctếbào.HoạtđộngchốnglạitếbàoP-388,A549,vàHT-

V er aceuz, Mexico cho khả năngkháng hai chủngvikhuẩnErcherichia

coli(C600)v à S t a p h y l o c o c c u s a u r e u s ( 2 0 9 P ) ở n ồ n g đ ộ 1 0 0 mg/ml.K ế t q u ả

M I C t h u đ ư ợ c h a i l o ạ i c a o c h i ế t methanoll á v à m e t h a n o l q u ả l à t r ê n ha

id ò n g v i k h u ẩ n Ercherichiacoli,Staphylococcusaureuslầnlượtlà512/1024μg/g/

mlvà128/256μg/g/ml.Mộtn g h i ê n c ứ u k h á c c ủ a Z a k a r i a ( 2 0 0 6 ) v ề h o ạ t t í n h k h á n g k h u ẩ n c ủ

hiệuquảhơnsovớicaochiếtnướcvàmethanol.Ởtấtcảcác nồngđộthửnghiệm, dịchchiết

nướcứcchếsựpháttriểncủaS.a u r e u s vàK.rhizophilatrongkhidịchchiếtmethanolkhánglạiv ikhuẩnS.flexneri,B.cereus,S.aureus,P.vulgaris,A.hydrophilavàK.rhizophila.Ởnồng

là5μg/g/ml;1,25μg/g/mlvà2,5μg/g/ml.Năm2010,Zakariatiếptụccácnghiên cứu3loạ

id ị c h chiếtTrứngcákhảosátkhảnăngkhángcácchủngvikhuẩnkhácnhưS.aureus

ATCC25923[nhạy cảmmethicilin],S aureusATCC 33591[khángmethicilin],E c

o l i ATCC10536,PseudomonasaeruginosaATCC27853,CandidaalbicansATC C10231,vàMicrosporumcanisATCC36299bằngphươngphápkhuếchtánđĩathạch.K

ế t quả t hu được chỉ ca o ch iế t m e t h a n o l ứcchế s ựp há tt ri ển của S aureus AT CC 25923v à S a u r e u s A T C C 3 3 5 9 1 v ớ i g i á t r ị M I C l à 1 2 5 0 μg/g/

2.3.4.4.Hoạttínhchốngoxyhoá

Gốctựdolàmộtsảnphẩmtấtyếucủacácquátrìnhsinhlýsinhhoátrongcơt h ể Trongcơthểluôncósựcânbằngmậtđộgốctựdo.Khinồngđộgốctựdotăngquácaogâymấtcânbằng,dẫntớinhữngtổnthươngtếbào,pháhuỷprotein,DNAđẩyn h a n h quátrìnhlãohoávàg

âyungthư.ĐểxácđịnhtiềmnăngchốngoxyhoácủaM.c a l a b u r a đ ư ợ c t h ự c h i ệ n b ở i Z

a k a r i a e t al.,2 0 0 7 b N h ữ n g l á T r ứ n g c á t h u h á i t ừ Selan go r , Malaysiaphơikh

ôvàchiếtvớidungmôinước.Tiếnhànhthửnghiệmbằngp hư ơn gphápDPPHvàsuperoxidanionkếtquảchothấydịchchiếtnướccókhoảng9 4 ,8 1,14%và83,702,05%khảnăngchốngoxyhoákhiđobằng2phépthử

(2007b)đểđiềutrịviêmcấpdocarrageenangâyr a sửdụngdịchchiếtnướcláTrứngcávớinồngđộ10%,50%,100%(tươngđươngvớiliều27mg/kg,135mg/kgvà270mg/

kgtươngứng).Kếtquảthuđượcchứngminhr ằngdịchchiếtnướctừláTrứngcácóhoạttínhchốngviêm.Hoạttínhviêmởmôdoc a r a g e e n a n gâyramấthoàntoànsau7giờởnồngđộ10%và50%dịchchiếtnước,sau6giờđốivớinồngđộ100%.Đặcbiệttạicácnồngđộdịchchiếtkhảnăngchốngv i ê m caohơnnhiềusovớithuốcđốichứngASA(100mg/kg)

Báocáokhảnăngbảovệtimmạchlátrứng cáthực hiệnbởi Nivethetha(2009).DịchchiếtláTrứngcávớidungmôilànướccókhảnăngbảovệtimbằngcáchlàmg

i ảmnguyênnhângâynhồimáucơtim(AST,ALT, LDH, C K , aciduric)ởchuột.HoạttínhmộtsốenzymgiảmkhisửdụngdịchchiếtnướcláTrứngcáởnồngđộ200và300mg/kg

2.3.4.7.Hoạttínhchốngbệnhđáitháođường

TheoSirdhar(2011)caochiếtmethanolláTrứngcácókhảnăngchốnglạibệnhđáitháođườngvớiliều300mg/kgvà500mg/kg.Liều500mg/

kgcaomethanollàmg i ảmlượngđườnghuyếttừ83,19mg/

dl(lúc0giờ)xuống62,62mg/dl(cuối6giờ).Hiệuquảđốivớikhảnăngdungnạp

glucoseđường uốngcũngđượckhảosát.Kếtquảc h o thấyl i ều5 0 0 m g / k g l à m g i ảml ư ợ n g đ ư ờ nghuyếtt r o n g 1 giờ( 1 1 6 , 4 6

 6,94mg/dl)trongkhinhómchỉsựdụngkẹocaosu( 1 4 4 , 7 3 7,86mg /

d l) Nghiêncứuk h á c vềkhảnăngtăngđườnghuyếtsaukhisửdụngAlloxan.Vớiliều500mg/kgchot h ấykhảnănggiảmđườnghuyết37%sovớithuốcđốichứngglipizide5mg/kg

2.4 TÌNHHÌNHNGHIÊNCỨUVÀỨNGDỤNGCAOCHIẾTTỪCÂYTRỨN

GCÁTRONGVÀNGOÀINƯỚC

2.4.1 TìnhhìnhnghiêncúuvàứngdụngcaochiếttừcâyTrứngcátrênthếgiới

TheoZakaria(2006)tiếnhànhthửnghiệmkhảosátkhảnăngkhángkhuẩncủadịchchiếttừláTrứngcálầnbằng3dungmôikhácnhaunước,methanol,chloroformb ằngphươngp

hápkhuếchtángiếngthạch.KếtquảthuđượcdịchchiếtnướccókhảnăngchốnglạiStaphy lococcusaureus,Kosuriarhizophila,dịchchiếtmethanolcókhản ă n g c h ố ngl ạiS h i g e l l

a f l e x n e r i ,B a c i l l u s c e r e u s ,S t a p h y l o c o c c u s a u r e u s ,P r o t e u s vulg aris,Aeromonashydrophila,Kosuriarhizophila;cáckhảnăngkhángkhuẩnnàyk h

ô n g tìmthấyởdịchchiếtchloroform

TheoZakaria( 2 0 1 1 ) , t i ếnhànhth ửnghiệmcáchoạtđộngc h ốngoxyhoávà t

ăn g s i n h t ế b à o t ừdịchc h i ết láT r ứng cábằng3d u n g môin ư ớ c,chloroform,methanolđượcthựchiệntrong nghiêncứunày.ĐánhgiábằngphươngphápthửMTT( ( 2 , 4 , 5 - d i m e t h y l t h i a z o l - 2 - y l ) - 2 , 5 -

d i p h e n y l t e t r a z o l i m ) Dịchc h i ếtn ư ớ cv à methanolc h o kếtquảứcchếsựpháttriểncáctếbàoungthưMCF-7,HeLa,HT-29,HL-60vàK-

562trongkhidịchchiếtchloroformchỉứcchếpháttriểntếbàoungthưMCF-

7,HeLa,HL-60vàK-562.Bêncạnhđótấtcảdịchchiếttừcácdungmôikhôngứcchếsựgiatăngcáctếbàobìnhthường3T3,chothấysựantoànkhisửdụng.Tấtcảcácdịchchiếtởnồngđộ(20g/

ml,100g/ml,500g/

ml)đềucóhoạttínhchốngoxyh o á , trongđódịchchiếtnướcvàmethanolcóhoạttínhchốngoxyhoácaohơndịchchiếtchloroform.Tổnghàmlượngphenolictrong3dungmôinước,methanol,

TheoZ a k a r i a ( 2 0 1 0 ) n g h i ê n c ứux á c địnhh o ạtt í n h k h á n g k h u ẩni n v i t r o củadịchchiếttoànphầnvàphânđoạncủaláTrứngcá.Látrứngcáđượcchiếtvới3loạidu ngmôilànước,chloroformvàmethanolvớitỷlệ1:20(w/v)trong72giờvớiquyt r ì n h

sátlàStaphylococcusaureus,Escherichiacoli,P s e u d o m o n a s a e r u g i n o s a ,C a d i d a

a l b i c a n s v à M i c r o s p o r u m c a n i s D ịchc h i ếtmethanolứcchếStaphylococusaur eus(MIC=1250g/ml,MBC=1250g/

tìmnăngđiềutrịbệnhtimmạch,tiểuđường,goutvàchốngoxyhóacủacácchấtchiếttừcâyTrứngcálàvôcùngphongphúnhưngvẫnc h ư a khaithácmạnhmẽtrongnước.VìvậyviệctiếptụcnghiêncứuđặctínhdượcliệucủachiếttừcâyTrứngcácóýnghĩatolớntrongphòngvàđiềutrịmộtsốbệnhhiệnnaylàrấtcầnthiết

CHƯƠNG3 PHƯƠNGTIỆNVÀ PHƯƠNGPHÁPNGHIÊN CỨU3.1 THỜIGIANVÀĐỊAĐIỂM

inhtrườngĐạihọcTâyĐô

- Lá,vỏthân,quảnon,quảchíncâyTrứngcáthuháitạiphườngThườngThạnh,quậnCáiRăng,thànhphốCầnThơvàotháng12năm2016.LávàvỏthânTrứngcárửas ạch , sấykhô,bảoquảnởnhiệtđộphòngtrongtúinylonđượcxaynhỏtrướckhisửd ụ n g chonghiêncứu.Quảnon,quảchínđượcrửasạch,nhặtbỏcuống,đểráonướcx ay nhuyễntrướckhisửdụngchonghiêncứu

Cácthiếtbịvàdụngcụkhác:máyvitínhlưutrữdữliệu,máychụphình,kínhhiểnviOlympusCX-21(NhậtBản)…

- MôitrườngTrypticasesoyarbrothdùngđểkiểmtrakhảnăngsinhindol.

- MôitrườngTrypticasesoyarbrothagardùngđểkhảosáthoạttínhkhángkhuẩnvànồngđộứcchếtốithiểu

- Môitrườngpeptondùngđểthửkhảnănglàmdịchhóagelatinvàkhảnăngphảnnitrathóa