Kháng sinh được dùng không ử dụng bất hợp pháp đối với các chất cấm ụng cụ thiết bị và hóa chất.. ương pháp.ng Pháp s c kí l ng kh i ph đắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ỏe của ối v
Trang 1XÁC Đ NH HÀM L ỊNH HÀM LƯỢNG ƯỢNG NG KHÁNG SINH CHLORAMPHENICOL
GVHD:
I Đ t v n đ ặt vấn đề ấn đề ề.
II Đ i t ối tượng và phương pháp thực hiện ượng và phương pháp thực hiện ng và ph ương pháp thực hiện ng pháp th c hi n ực hiện ện.
1 Đ i t ối tượng ượng ng.
2 Ph ương pháp thực hiện ng pháp th c hi n ực hiện ện.
2.1 D u hi u nh n bi t Chloramphenicol.ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ệu nhận biết Chloramphenicol ận biết Chloramphenicol ết Chloramphenicol
2.2 D ng c thi t b và hóa ch t.ụng cụ thiết bị và hóa chất ụng cụ thiết bị và hóa chất ết Chloramphenicol ị và hóa chất ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol
2.3 Đi u ki n qui trình và quá trình th c hi n.ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ệu nhận biết Chloramphenicol ực hiện ệu nhận biết Chloramphenicol
2.3.1 Đi u ki n qui trình.ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ệu nhận biết Chloramphenicol
2.3.2 Quá trình th c hi n.ực hiện ệu nhận biết Chloramphenicol
2.4 Quá trình phân tích trên máy
III Tính toán k t qu ết quả ả.
1 L p đận biết Chloramphenicol ường chuẩn.ng chu n.ẩn
2 Đ chính xác.ộ chính xác
3 Hi u xu t thu h i c a phệu nhận biết Chloramphenicol ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ồi của phương pháp ủa phương pháp ương pháp.ng pháp
IV K t lu n ết quả ận
V Tài li u tham kh o ện ả.
Trang 2I Đ t v n đ ặt vấn đề ấn đề ề.
S phát tri n nhanh chóng và n đ nh c a ngành chăn nuôi nực hiện ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ị và hóa chất ủa phương pháp ước ta đã và c ta đã và đang ch u s nh hị và hóa chất ực hiện ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ng r t l n c a kháng sinh Kháng sinh đấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ớc ta đã và ủa phương pháp ược dùng không c dùng không
ch đ phòng b nh, tr b nh mà còn nh m m c đích kích thích sinh trển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ệu nhận biết Chloramphenicol ị và hóa chất ệu nhận biết Chloramphenicol ằm mục đích kích thích sinh trưởng nếu ụng cụ thiết bị và hóa chất ưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ng n u ết Chloramphenicol
được dùng không c dùng li u th p (nghiên c u c a McEvoy, 2002; Ph m Kim Đăng và cs, ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ủa phương pháp ạm Kim Đăng và cs, 2012) Tuy nhiên, vi c l m d ng, s d ng b t h p pháp (đ i v i các ch t c m ệu nhận biết Chloramphenicol ạm Kim Đăng và cs, ụng cụ thiết bị và hóa chất ử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm ụng cụ thiết bị và hóa chất ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ợc dùng không ối với các chất cấm ớc ta đã và ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol dùng trong chăn nuôi) ho c sai nguyên t c s d ng đ i v i các h p ch t kháng ặc sai nguyên tắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm ụng cụ thiết bị và hóa chất ối với các chất cấm ớc ta đã và ợc dùng không ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol sinh trong chăn nuôi gà công nghi p đã gây ra hi n tệu nhận biết Chloramphenicol ệu nhận biết Chloramphenicol ược dùng không ng t n d kháng sinh ồi của phương pháp ư
T n d kháng sinh tác đ ng tr c ti p đ n các loài v t nuôi (gi m đ kháng, l n ồi của phương pháp ư ộ chính xác ực hiện ết Chloramphenicol ết Chloramphenicol ận biết Chloramphenicol ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ờng chuẩn thu c ), gây ô nhi m môi trối với các chất cấm ễm môi trường và hơn nữa ảnh hưởng xấu đến sức khỏe của ường chuẩn.ng và h n n a nh hơng pháp ữa ảnh hưởng xấu đến sức khỏe của ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ng x u đ n s c kh e c a ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ết Chloramphenicol ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ỏe của ủa phương pháp
c ng đ ng, nh ng ngộ chính xác ồi của phương pháp ữa ảnh hưởng xấu đến sức khỏe của ường chuẩn.i đang tr c ti p s d ng các s n ph m kháng sinh Do cóực hiện ết Chloramphenicol ử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm ụng cụ thiết bị và hóa chất ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ẩn
ph kháng khu n r ng và kh năng phân b t t vào các mô trên c th nên ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ẩn ộ chính xác ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ối với các chất cấm ối với các chất cấm ơng pháp ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và Chloramphenicol (CAP) được dùng không c dùng r t ph bi n trong thú y trấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ết Chloramphenicol ước ta đã và c đây Tuy nhiên, t khi phát hi n nh ng đ c tính c a CAP lên c quan t o máu (thi u máu ! ệu nhận biết Chloramphenicol ữa ảnh hưởng xấu đến sức khỏe của ộ chính xác ủa phương pháp ơng pháp ạm Kim Đăng và cs, ết Chloramphenicol
c p, suy t y, t vong), vào năm 2009 B Nông Nghi p và Phát tri n nông thôn đãấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ủa phương pháp ử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm ộ chính xác ệu nhận biết Chloramphenicol ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và
ra thông t c m s d ng Chloramphenicol trong chăn nuôi thú y và nuôi tr ng ư ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm ụng cụ thiết bị và hóa chất ồi của phương pháp
th y h i s n Nh ng trong m t s nghiên c u (đ tài kh o sát tình hình s d ngủa phương pháp ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ư ộ chính xác ối với các chất cấm ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm ụng cụ thiết bị và hóa chất kháng sinh trong chăn nuôi và d lư ược dùng không ng kháng sinh trong th t các qu y th t gà ị và hóa chất ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ầy thịt gà ị và hóa chất
t i Tp H Chí Minh c a PGS.TS Nguy n Ng c H i và Khoa CNTY, trạm Kim Đăng và cs, ồi của phương pháp ủa phương pháp ễm môi trường và hơn nữa ảnh hưởng xấu đến sức khỏe của ọc Hải và Khoa CNTY, trường ĐH ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ường chuẩn.ng ĐH Nông Lâm) ch ra r ng: Chloramphenicol v n đang đằm mục đích kích thích sinh trưởng nếu ẫn đang được dùng trái phép trong ược dùng không c dùng trái phép trong chăn nuôi gà công nghi p Phệu nhận biết Chloramphenicol ương pháp.ng Pháp s c kí l ng kh i ph đắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ỏe của ối với các chất cấm ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ược dùng không c nghiên c u ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs,
và áp d ng v i kháng sinh chloramphenicol, v i nhi m v phát hi n lụng cụ thiết bị và hóa chất ớc ta đã và ớc ta đã và ệu nhận biết Chloramphenicol ụng cụ thiết bị và hóa chất ệu nhận biết Chloramphenicol ược dùng không ng kháng sinh Chloramphenicol (ho c các ch t c m dùng trong chăn nuôi và nông ặc sai nguyên tắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol nghi p khác) trong các n n m u sinh h c m c đ v t ho c siêu v t Phệu nhận biết Chloramphenicol ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ẫn đang được dùng trái phép trong ọc Hải và Khoa CNTY, trường ĐH ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ộ chính xác ết Chloramphenicol ặc sai nguyên tắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ết Chloramphenicol ương pháp.ng pháp này đang là phương pháp.ng pháp th m đ nh cu i cùng đ i v i các ch t khó phát ẩn ị và hóa chất ối với các chất cấm ối với các chất cấm ớc ta đã và ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol
hi n v i đ chính xác và đ tin c y r t cao.ệu nhận biết Chloramphenicol ớc ta đã và ộ chính xác ộ chính xác ận biết Chloramphenicol ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol
II Đ i t ối tượng và phương pháp thực hiện ượng và phương pháp thực hiện ng và ph ương pháp thực hiện ng pháp th c hi n ực hiện ện.
1 Đ i t ối tượng ượng ng.
Các m u th t gà bán trên qu y th t đ a bàn Qu n Th Đ c Các đ i ẫn đang được dùng trái phép trong ị và hóa chất ầy thịt gà ị và hóa chất ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ị và hóa chất ận biết Chloramphenicol ủa phương pháp ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ối với các chất cấm
tược dùng không ng này sẽ được dùng không c phân tích nh ng thành ph n chính đ l a ch n ra n n ữa ảnh hưởng xấu đến sức khỏe của ầy thịt gà ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ực hiện ọc Hải và Khoa CNTY, trường ĐH ều kiện qui trình và quá trình thực hiện
m u đ i di n đ ch y s c ký.ẫn đang được dùng trái phép trong ạm Kim Đăng và cs, ệu nhận biết Chloramphenicol ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ạm Kim Đăng và cs, ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng
2 Ph ương pháp thực hiện ng pháp th c hi n ực hiện ện.
2.1 D u hi u nh n bi t Chloramphenicolấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ệu nhận biết Chloramphenicol ận biết Chloramphenicol ết Chloramphenicol
a Lý hóa tính c a CAPủa phương pháp
CAP có d ng tinh th không màu, l p lánh, v r t đ ng, pH = ạm Kim Đăng và cs, ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ị và hóa chất ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng 2-9, tan nhi u trong lipid và dung môi h u c nh alcohol, tan ít ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ư ơng pháp ư trong nước ta đã và c CAP r t b n, không b phá h y b i nhi t đ c a ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ị và hóa chất ủa phương pháp ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ệu nhận biết Chloramphenicol ộ chính xác ủa phương pháp
nước ta đã và c sôi mi n là pH < 9.ễm môi trường và hơn nữa ảnh hưởng xấu đến sức khỏe của
b Ảnh hưởng của CAP đối với con ngườinh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ng c a CAP đ i v i con ngủa phương pháp ối với các chất cấm ớc ta đã và ường chuẩn.i
Trang 3CAP nh hảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ng tr c ti p lên t y xực hiện ết Chloramphenicol ủa phương pháp ương pháp.ng v i tri u ch ng đ cớc ta đã và ệu nhận biết Chloramphenicol ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ặc sai nguyên tắc sử dụng đối với các hợp chất kháng
tr ng là suy t y không h i ph c (thi u máu b t s n) T l t ư ủa phương pháp ồi của phương pháp ụng cụ thiết bị và hóa chất ết Chloramphenicol ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ệu nhận biết Chloramphenicol ử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm vong trên ngường chuẩn.i là 1/25 000 – 1/60 000 trường chuẩn.ng h p Do đó CAP ợc dùng không không được dùng không ồi của phương pháp.c t n d trong th c ph m (MRL = 0)ư ực hiện ẩn
2.2 D ng c thi t b hóa ch t.ụng cụ thiết bị và hóa chất ụng cụ thiết bị và hóa chất ết Chloramphenicol ị và hóa chất ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol
Nguyên v t li u và hóa ch t.ận biết Chloramphenicol ệu nhận biết Chloramphenicol ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol
' Kháng sinh chu n CAP pha trong methanol n ng đ 1µg/mlẩn ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ồi của phương pháp ộ chính xác
và b o qu n t l nh 0 - 4°C.ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ủa phương pháp ạm Kim Đăng và cs, ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ' Hóa ch t: Etylacetat; aminoacetat; n- hexan; acid acetid, ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol aceton và acetonitril
' Nước ta đã và ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol.c c t
Thi t b ết Chloramphenicol ị và hóa chất
' H th ng s c ký l ng kh i ph LC-MS/MSệu nhận biết Chloramphenicol ối với các chất cấm ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ỏe của ối với các chất cấm ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và
' 2 lo i c t chi t pha r n dùng cho kh o sát g m C18 và ạm Kim Đăng và cs, ộ chính xác ết Chloramphenicol ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ồi của phương pháp
Floresil ' Máy l c vortex, máy cô quay và bình cô quay.ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng
' Các lo i ng đong, ng nghi m, pipet và các micropipet.ạm Kim Đăng và cs, ối với các chất cấm ối với các chất cấm ệu nhận biết Chloramphenicol
2.3 Đi u ki n qui trình và quá trình th c hi n.ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ệu nhận biết Chloramphenicol ực hiện ệu nhận biết Chloramphenicol
2.3.1 Đi u ki n qui trình.ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ệu nhận biết Chloramphenicol
B ng 1 ảng 1. Đi u ki n ch y ngu n hóa ESI ều kiện chạy nguồn hóa ESI ện ạy nguồn hóa ESI ồn hóa ESI
Th phun đi n t ết Chloramphenicol ệu nhận biết Chloramphenicol ử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm 4,0 kV
Nhi t đ đ u phun (IS) ệu nhận biết Chloramphenicol ộ chính xác ầy thịt gà 130°C
Khí màn (CUR) 30
Khí va ch m (CAD) ạm Kim Đăng và cs, 7
Ngu n khí ion 1 (GS1) ồi của phương pháp 20
Ngu n khí ion 2 (GS2) ồi của phương pháp 10
Th phân nhóm (DP) ết Chloramphenicol -100
Th đ u vào (Entrance Potential) ết Chloramphenicol ầy thịt gà
(EP) – 10
Trang 4Thông s kh o sát ố khảo sát ảng 1 Kho ng kh o sát ảng 1 ảng 1 B ước quét (step) c quét (step)
S m nh quét v i m i ố khảo sát ảng 1 ớc quét (step) ỗi
ch t ất
Th phân nhóm (DP) ế phân nhóm (DP)
Năng l ượng va chạm (CE) ng va ch m (CE) ạm (CE)
Năng l ượng va chạm (CE) ng CXP
5 m nh cho tín hi u cao ảng 1 ện:
nh t ất
T -150 đ n -1 (V) ừ -150 đến -1 (V) ế phân nhóm (DP)
T 130 đ n -5 (V) ừ -150 đến -1 (V) ế phân nhóm (DP)
T -55 đ n 0 (V) ừ -150 đến -1 (V) ế phân nhóm (DP)
-5 (V)
2 (V)
2 (V)
B ng 2 ảng 1. Đi u ki n b n phá và phân m nh các ion con ều kiện chạy nguồn hóa ESI ện ắn phá và phân mảnh các ion con ảnh các ion con
Ch t phân ất
tích
M nh kh ng ảng 1 ẳng
đ nh ịnh
M nh đ nh ảng 1 ịnh
l ượng va chạm (CE) ng CAP (323,13) 257,192 152,221
B ng 3 ảng 1. Các thông s t i u cho ch y kh i ph đ i v i Chloramphenicol ối tượng ối tượng ư ạy nguồn hóa ESI ối tượng ổ đối với Chloramphenicol ối tượng ới Chloramphenicol
Chú thích: DP: Th phân nhóm (Declustering Potential), CE: Năng l ế phân nhóm (Declustering Potential), CE: Năng lượng va chạm ượng ng va ch m ạy nguồn hóa ESI
(Collision Energy) và CXP: Năng l ượng ng CXP (Collision Cell Exit Potential).
2.3.2 Quá trình th c hi n.ực hiện ệu nhận biết Chloramphenicol
a T i u hóa đi u ki n x lý m uối với các chất cấm ư ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ệu nhận biết Chloramphenicol ử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm ẫn đang được dùng trái phép trong
Đ u tiên đ i tầy thịt gà ối với các chất cấm ược dùng không ng nghiên c u sẽ đứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ược dùng không c phân tích nh ng ữa ảnh hưởng xấu đến sức khỏe của thành ph n chính đ l a ch n ra n n m u cho phầy thịt gà ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ực hiện ọc Hải và Khoa CNTY, trường ĐH ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ẫn đang được dùng trái phép trong ương pháp.ng pháp kh o sát Sau khi ch n đảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ọc Hải và Khoa CNTY, trường ĐH ược dùng không c n n m u thích h p ti nều kiện qui trình và quá trình thực hiện ẫn đang được dùng trái phép trong ợc dùng không ết Chloramphenicol
hành tách chi t, làm giàu và tinh s ch m u.ết Chloramphenicol ạm Kim Đăng và cs, ẫn đang được dùng trái phép trong Sau khi đã l a ch n đực hiện ọc Hải và Khoa CNTY, trường ĐH ược dùng không c dung môi kh o sát và m u đã ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ẫn đang được dùng trái phép trong
được dùng không c đ ng nh t, ti n hành cân 10g m u cho vào ng ly ồi của phương pháp ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ết Chloramphenicol ẫn đang được dùng trái phép trong ối với các chất cấm tâm 50ml, thêm ch t chu n, sau đó thêm 20ml dung môi, ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ẩn
l c trên vortex trong kho ng 5 phút Ti p theo đem ly tâmắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ết Chloramphenicol
6 000 v/phút trong 5 phút, g n thu d ch chi t sang m t ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ạm Kim Đăng và cs, ị và hóa chất ết Chloramphenicol ộ chính xác
ng ly tâm khác Chi t l p l i m t l n n a v i 10ml dung
ối với các chất cấm ết Chloramphenicol ặc sai nguyên tắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ạm Kim Đăng và cs, ộ chính xác ầy thịt gà ữa ảnh hưởng xấu đến sức khỏe của ớc ta đã và môi G p d ch chi t 2 l n cho vào bình cô quay 100ml Cô ộ chính xác ị và hóa chất ết Chloramphenicol ầy thịt gà quay t i c n 40ớc ta đã và ạm Kim Đăng và cs, ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không oC Sau đó hòa tan l i b ng dung d ch ạm Kim Đăng và cs, ằm mục đích kích thích sinh trưởng nếu ị và hóa chất
CH3COONH4 4%
Do d ch chi t t nên m u sinh h c thị và hóa chất ết Chloramphenicol ! ẫn đang được dùng trái phép trong ọc Hải và Khoa CNTY, trường ĐH ường chuẩn.ng ch a nhi u ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ều kiện qui trình và quá trình thực hiện
t p ch t nh lipid, các acid béo, amin, rạm Kim Đăng và cs, ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ư ược dùng không u… nên thường chuẩn.ng các nghiên c u thứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ường chuẩn.ng ch n chi t pha r n đ lo i b t p ọc Hải và Khoa CNTY, trường ĐH ết Chloramphenicol ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ạm Kim Đăng và cs, ỏe của ạm Kim Đăng và cs,
ch t này cũng nh đ làm tinh s ch d ch chi t Tuy nhiên, ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ư ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ạm Kim Đăng và cs, ị và hóa chất ết Chloramphenicol
Trang 5do các đ i tối với các chất cấm ược dùng không ng m u kh o sát thẫn đang được dùng trái phép trong ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ường chuẩn.ng có hàm lược dùng không ng lipid sau bước ta đã và c làm giàu s b khá cao nên trơng pháp ộ chính xác ước ta đã và c khi n p m u ạm Kim Đăng và cs, ẫn đang được dùng trái phép trong qua c t chi t pha r n, 10ml n- hexan đã độ chính xác ết Chloramphenicol ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ược dùng không c dùng đ ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và
lo i b ch t béo chi t, l p l i vi c này 2 l n v idung d ch ạm Kim Đăng và cs, ỏe của ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ết Chloramphenicol ặc sai nguyên tắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ạm Kim Đăng và cs, ệu nhận biết Chloramphenicol ầy thịt gà ớc ta đã và ị và hóa chất thu được dùng không ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không c trên
S đ quá trình x lý m u ơng pháp thực hiện ồn hóa ESI ử lý mẫu ẫu
b T i u hóa đi u ki n phân tích CAP trên máy LC – MS/MSối với các chất cấm ư ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ệu nhận biết Chloramphenicol
Kháng sinh nhóm phenicol có kh i lối với các chất cấm ược dùng không ng phân t và đử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm ộ chính xác phân c c trung bình Đ t i u hóa đi u ki n kh i ph , ực hiện ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ối với các chất cấm ư ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ệu nhận biết Chloramphenicol ối với các chất cấm ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và dùng pipet 500µl b m chu n CAP 10ng/ml vào detector ơng pháp ẩn
đ kh o sát T i u hóa t ng ion m và ch nh t i u đi u ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ối với các chất cấm ư ! ẹ và chỉnh tối ưu điều ối với các chất cấm ư ều kiện qui trình và quá trình thực hiện
ki n ch y ESI nh b ng 2.ệu nhận biết Chloramphenicol ạm Kim Đăng và cs, ư ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không
Trang 6Ph kh i c a CAP trên h LC/MS nghiên c u ổ khối của CAP trên hệ LC/MS nghiên cứu ối tượng và phương pháp thực hiện ủa CAP trên hệ LC/MS nghiên cứu ện ứu
c T i u hóa các đi u ki n s c kýối với các chất cấm ư ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ệu nhận biết Chloramphenicol ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng
L a ch n c t phân tách.ực hiện ọc Hải và Khoa CNTY, trường ĐH ộ chính xác
CAP có đ phân c c trung bình, nên l a ch n an toànộ chính xác ực hiện ực hiện ọc Hải và Khoa CNTY, trường ĐH cho h pha đ ng c a máy kh i ph là các dung môi phânệu nhận biết Chloramphenicol ộ chính xác ủa phương pháp ối với các chất cấm ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và
c c v a nh methanol, acetonitril, nực hiện ! ư ước ta đã và c, acid formic (< 1%), amoniacetat (< 1%) L a ch n dung môi thực hiện ọc Hải và Khoa CNTY, trường ĐH ường chuẩn.ng tuân theo tính kinh t và tính phù h p v i phòng thí ết Chloramphenicol ợc dùng không ớc ta đã và nghi m.ệu nhận biết Chloramphenicol
H pha đ ng và phệu nhận biết Chloramphenicol ộ chính xác ương pháp.ng pháp gradient
Trong phương pháp.ng pháp s c ký l ng kh i ph , pha đ ng c a ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ỏe của ối với các chất cấm ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ộ chính xác ủa phương pháp
chương pháp.ng trình không ch nh hảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ng t i quá trình tách các ớc ta đã và
ch t mà nó còn nh hấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ng t i quá trình ion hóa và tín ớc ta đã và
hi u các ch t phân tích V i kĩ thu t ion hóa phun đi n t ệu nhận biết Chloramphenicol ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ớc ta đã và ận biết Chloramphenicol ệu nhận biết Chloramphenicol ử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm
b n phá ch đ ion âm, quá trình ion hóa sẽ t t h n khi ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ết Chloramphenicol ộ chính xác ối với các chất cấm ơng pháp
có thêm các ch t nh acid acetic, acid formic…Trong ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ư nghiên c u này đã dùng dung d ch chu n CAP n ng đ ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ị và hóa chất ẩn ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ồi của phương pháp ộ chính xác 2ng/ml
d Th m đ nh phẩn ị và hóa chất ương pháp.ng pháp phân tích thông qua vi c ệu nhận biết Chloramphenicol
phân tích m u thêm chu n và th nghi m phân tích ẫn đang được dùng trái phép trong ẩn ử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm ệu nhận biết Chloramphenicol
m u th c t ẫn đang được dùng trái phép trong ực hiện ết Chloramphenicol
o Phân tích m u tr ng.ẫn đang được dùng trái phép trong ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng
M u tr ng: gà đẫn đang được dùng trái phép trong ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ược dùng không c nuôi b ng th c ăn t nhiên ằm mục đích kích thích sinh trưởng nếu ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ực hiện
và không s d ng kháng sinh trong th i gian ử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm ụng cụ thiết bị và hóa chất ờng chuẩn nuôi)
Ti n hành phân tích l p l i 3 l n và thu đết Chloramphenicol ặc sai nguyên tắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ạm Kim Đăng và cs, ầy thịt gà ược dùng không c đ ộ chính xác thu h i đ u cao h n 80% 3 m c n ng đ 0,5; 1ồi của phương pháp ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ơng pháp ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ồi của phương pháp ộ chính xác
và 5 ng/g
Trang 7o Th nghi m phân tích m u th c t ử dụng bất hợp pháp (đối với các chất cấm ệu nhận biết Chloramphenicol ẫn đang được dùng trái phép trong ực hiện ết Chloramphenicol.
M u th c t : l y các qu y th t gà t i các ch ẫn đang được dùng trái phép trong ực hiện ết Chloramphenicol ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ầy thịt gà ị và hóa chất ạm Kim Đăng và cs, ợc dùng không
t i đ a bàn qu n Th Đ c.ạm Kim Đăng và cs, ị và hóa chất ận biết Chloramphenicol ủa phương pháp ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, 2.4 Quá trình phân tích trên máy
1 L p đ ập đường chuẩn ường chuẩn ng chu n ẩn.
Phương pháp.ng pháp LC-MS/MS có kho ng tuy n tính rõ r t (t t c h s h i qui ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ết Chloramphenicol ệu nhận biết Chloramphenicol ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ệu nhận biết Chloramphenicol ối với các chất cấm ồi của phương pháp tuy n tính đ u dao đ ng trong kho ng t 0,99 đ n dết Chloramphenicol ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ộ chính xác ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ! ết Chloramphenicol ước ta đã và i 1) C th CAP cóụng cụ thiết bị và hóa chất ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và kho ng tuy n tính t 0,5 đ n 3 ng/g v i h s h i qui tuy n tính là ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ết Chloramphenicol ! ết Chloramphenicol ớc ta đã và ệu nhận biết Chloramphenicol ối với các chất cấm ồi của phương pháp ết Chloramphenicol
0,9994
Kho ng ảng 1.
tuy n tính ế phân nhóm (DP)
kh o sát ảng 1.
Ph ương trình đường ng trình đ ường ng chu n ẩn R² LOD (ng/g) LOQ (ng/g) 0,5 – 3 Y = 6x10¯⁵x – 0,0256 0,9994 0,009 0,03
Ion hóa
ion theo
số khối Bơm hút
S đ quá trình phân tích trên máy ơng pháp thực hiện ồn hóa ESI
Trang 80.15 0 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45 0.5
1 1.5 2 2.5
3
2.5
đường chuẩn của CAP
x (cm²)
2 Đ ộ chính xác.
Gi i h n phát hi n c a phớc ta đã và ạm Kim Đăng và cs, ệu nhận biết Chloramphenicol ủa phương pháp ương pháp.ng pháp (LOD) đ i v i CAP = 0,009ng/g Ch ối với các chất cấm ớc ta đã và
s LOD cho phép phát hi n CAP đ nh y r t cao, kho ng 0,009 ppb.ối với các chất cấm ệu nhận biết Chloramphenicol ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ộ chính xác ạm Kim Đăng và cs, ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không
Gi i h n đ nh lớc ta đã và ạm Kim Đăng và cs, ị và hóa chất ược dùng không ng c a phủa phương pháp ương pháp.ng pháp (LOQ) đ i v i CAP = 0,03ng/g.ối với các chất cấm ớc ta đã và
K t qu phân tích cho th y phết Chloramphenicol ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ương pháp.ng pháp có đ tin c y cao đ phân tích ộ chính xác ận biết Chloramphenicol ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và
d lư ược dùng không ng kháng sinh CAP trong th t gà.ị và hóa chất
3 Hi u xu t thu h i c a ph ện ất thu hồi của phương pháp ồn hóa ESI ủa phương pháp ương pháp thực hiện ng pháp.
Đ đánh giá hi u qu c a phển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ệu nhận biết Chloramphenicol ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ủa phương pháp ương pháp.ng pháp, nghiên c u đã xác đ nh đ thu ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ị và hóa chất ộ chính xác
h i c a phồi của phương pháp ủa phương pháp ương pháp.ng pháp v i các m u tr ng và các m u tr ng thêm chu n ớc ta đã và ẫn đang được dùng trái phép trong ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ẫn đang được dùng trái phép trong ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ẩn ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không
ba m c n ng đ quan tâm (xung quanh n ng đ th p nh t c a kho ng ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ồi của phương pháp ộ chính xác ồi của phương pháp ộ chính xác ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ủa phương pháp ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không
tuy n tính) K t qu cho th y, phết Chloramphenicol ết Chloramphenicol ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ương pháp.ng pháp đáp ng t t v i CAP nghiên ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ối với các chất cấm ớc ta đã và
c u, đ thu h i đ t trên 83%.ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ộ chính xác ồi của phương pháp ạm Kim Đăng và cs,
K t qu nghiên c u b ng kỹ thu t s c ký l ng kh i ph đ phát hi n ch tết Chloramphenicol ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ằm mục đích kích thích sinh trưởng nếu ận biết Chloramphenicol ắc sử dụng đối với các hợp chất kháng ỏe của ối với các chất cấm ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ệu nhận biết Chloramphenicol ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol
c m CAP trong th t gà:ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ị và hóa chất
Đ thu h i đ t độ chính xác ồi của phương pháp ạm Kim Đăng và cs, ược dùng không ủa phương pháp.c c a m u tẫn đang được dùng trái phép trong ương pháp.ng đ i cao (>80%).ối với các chất cấm ' Đ l ch chu n tộ chính xác ệu nhận biết Chloramphenicol ẩn ương pháp.ng đ i (RSD) c a các l n đo đ u tối với các chất cấm ủa phương pháp ầy thịt gà ều kiện qui trình và quá trình thực hiện ương pháp.ng đ i nh ối với các chất cấm ỏe của (<4,18%)
Trang 9' Nghiên c u có th m r ng ra cho các đ i tứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, ển nhanh chóng và ổn định của ngành chăn nuôi nước ta đã và ởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ộ chính xác ối với các chất cấm ược dùng không ng m u khác, cho các ẫn đang được dùng trái phép trong kháng sinh khác thu c nhóm phenicol ho c ngoài nhóm phenicol ộ chính xác ặc sai nguyên tắc sử dụng đối với các hợp chất kháng (nhóm beta – lactam, nhóm tetracycline)
Ph m Kim Đăng, Vũ Th Ngân, Ph m H ng Ngân (2014), “ạm Kim Đăng và cs, ị và hóa chất ạm Kim Đăng và cs, ồi của phương pháp Xác đ nh ịnh
đ ng th i d l ồn hóa ESI ờng chuẩn ư ượng ng kháng sinh Chloramphenicol (CAP), Florphenicol (FF), Thiamphenicol (TAP) trong m t s s n ph m đ ng v t b ng ộ ối tượng ảnh các ion con ẩn ộ ập đường chuẩn ằng
ph ương pháp thực hiện ng pháp s c ký l ng kh i ph (LC-MS/MS)” ắn phá và phân mảnh các ion con ỏng khối phổ (LC-MS/MS)” ối tượng ổ đối với Chloramphenicol
Nguy n Minh Đ c (2006) ễm môi trường và hơn nữa ảnh hưởng xấu đến sức khỏe của ứu của McEvoy, 2002; Phạm Kim Đăng và cs, S c ký l ng hi u năng cao và m t s ng ắn phá và phân mảnh các ion con ỏng khối phổ (LC-MS/MS)” ện ộ ối tượng ứng
d ng vào nghiên c u, ki m nghi m d ụng vào nghiên cứu, kiểm nghiệm dược phẩm, dược liệu và hợp ứng ểm nghiệm dược phẩm, dược liệu và hợp ện ượng c ph m, d ẩn ượng c li u và h p ện ợng.
ch t t nhiên ất thu hồi của phương pháp ực hiện. , NXB Y h c, Tp H Chí Minh.ọc Hải và Khoa CNTY, trường ĐH ồi của phương pháp
Võ Th Trà An, ị và hóa chất giáo trình d ượng c lý thú y, nhà xu t b n Nông nghi p ấu hiệu nhận biết Chloramphenicol ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không ệu nhận biết Chloramphenicol
Tp H Chí Minh, 2014.ồi của phương pháp
Dr Nguy n Ng c Vinh, bài gi ng “ễm môi trường và hơn nữa ảnh hưởng xấu đến sức khỏe của ọc Hải và Khoa CNTY, trường ĐH ảnh hưởng rất lớn của kháng sinh Kháng sinh được dùng không Các ph ương pháp thực hiện ng pháp phân tích s c ắn phá và phân mảnh các ion con ký.