ĐẶT VẤN ĐỀTheo sự phát triển của khoa học - công nghệ, con người đã tìm ra rất nhiều hợp chất cón tác dụng thần kỳ trong việc chữa và điều trị một số bệnh Flavonoid là một hợp chất cơ bả
Trang 1Báo cáo chuyên đề
ĐỊNH LƯỢNG FLAVONOID TRONG LÁ VÀ NỤ VỐI
GVHD:
SVTH:
Trang 2ĐẶT VẤN ĐỀ
Theo sự phát triển của khoa học - công nghệ, con người đã tìm ra rất nhiều hợp chất cón tác dụng thần kỳ trong việc chữa và điều trị một số bệnh Flavonoid là một hợp chất cơ bản và quan trọng nhất
hiện nay có nhiều
trong lá Vối
Trang 4• Tuy nhiên, trong các chuyên luận vẫn chưa có tiêu chí về định lượng flavonoid trong nụ vối, trong khi flavonoid là thành phần chính và có nhiều tác dụng quan sinh học quan trọng
XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG FLAVONOID TRONG LÁ VÀ NỤ VỐI
Trang 5ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
I. ĐỐI TƯỢNG
•. FLAVONOID
Flavonoid là một nhóm hợp chất lớn thường gặp trong thực vật Phần lớn các chất flavonoid có màu vàng.
Trang 6Isoflavonoid
Neoflavonoid
Trang 7• CÂY VỐI ( LÁ VÀ NỤ)
Cây vối có tên khoa học là Cleistocalyx operculatus (Roxb.) Merr et Perry, thuộc họ
Sim (Myrtaceae), là loại cây mọc nhiều ở nhiệt đới
Nụ và lá vối được phơi và sấy ở 50oC cho đến khô
Trang 8Là phương pháp hóa lý dựa vào ái lực khác nhau của các chất khác nhau với hai pha (động-tĩnh) luôn tiếp xúc và không đồng tan.
Quá trình sắc ký xảy ra do các cơ chế: hấp thụ, phân bố, trao đổi ion hoặc rây phân tử.
Thời gian lưu của một chất là thời gian tính từ lúc tiêm mẫu vào cột đến khi chất đó ra khỏi cột đạt giá trị cực đại cho pic trên sắc ký đồ.
II PHƯƠNG PHÁP: Sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)
Trang 9Dấu hiệu nhận biết Flavonoid
Tính chất lý hóa
Dẫn chất flavon màu vàng rất nhạt hay không màu, dẫn chất anthocyanidin màu thay đổi theo pH của môi trường Độ tan khác nhau.
Flavonoid tạo phức với các ion kim loại (chất xúc tác của nhiều phản ứng oxy hóa).
Tác động với con người
Tăng thị lực vào ban đêm.
Chống độc, co thắt cơ nhẵn, viêm loét Kích thích tiết mật, thông tiểu.
Ngừa xơ vữa động mạch, tai biến, lão hoá , tổn thương do bức xạ, thoái hoá gan…
Trang 10Dụng cụ và thiết bị hóa chất
• Cân kỹ thuật Precisa XT 620M
• Cân phân tích Precisa XT 220A
• Máy cất quay Buchi B481
• Tủ sấy Binder – FD 115
• Đèn tử ngoại
• Hệ thống HPLC _LC10A, hãng Shimadzu (Nhật Bản)
• Dung môi: methanol, n-hexan, ethyl acetat, toluen
• Bản sắc ký mỏng tráng sẵn Silica gel GF254 (Merck)
• Silica gel sắc ký cột pha thường, cỡ hạt 40-63µm (Merck).
• Các hóa chất để làm các phản ứng định tính và định lượng.
Trang 11QUÁ TRÌNH THỰC HIỆN
1. Chiết xuất và phân lập một Flavonoid chính từ nụ vối
2. Xây dựng phương pháp định lượng
•. Khảo sát tính thích hợp của hệ thống
•. Khoảng tuyến tính của phương pháp
•. Độ đúng và giới hạn của phương pháp
Trang 12Tiến hành phân tích trên máy
1: Bình chứa pha động.
2: Bộ phận khử khí 3: Bơm cao áp 4: Bộ phận tiêm mẫu 5: Cộ sắc ký (pha tĩnh) 6: Đầu dò
7: Hệ thống máy tính có phần mềm ghi nhận tín hiệu, xử lý dữ liệu và điều khiển hệ thống.
8: In dữ liệu.
Trang 13TÍNH TOÁN KẾT QUẢ
Khảo sát tính thích hợp của hệ thống:
Lần tiêm Thời gian lưu Diện tích pic Các thông số thống kê
1 9,12766 2190950
SD = 21052
RSD = 0,95 (%)
2 9,7053 2186244
3 9,18479 2205546
4 9,47704 2245278
5 9,53417 2214240
6 9,41771 2213154
Trang 14Khoảng tuyến tính của phương pháp
Trang 18KẾT LUẬN
Đã phân lập được một flavonoid chính
(2',4'-dihydroxy-6'-methoxy-3',5'-dimethylchalcone) trong nụ vối làm chất đối chiếu trong định lượng flavonoid
Xác định được độ tinh khiết của flavonoid chính bằng HPLC (98,21%)
Đưa ra được điều kiện, dung môi phù hợp chạy sắc ký trong việc định lượng flavonoid chính trong nụ và lá vối
Xác định được khoảng tuyến tính (0,1 – 0,275 mg/ml) và lập đường chuẩn của flavonoid
Xác định được giới hạn phát hiện (LOD = 0,031 μg/ml) và giới hạn định lượng của phép đo (LOQ = 0,1023 mg/ml)
Đánh giá được sai số và độ lặp lại của phép đo
Trang 19TÀI LIỆU THAM KHẢO
https://www.academia.edu/8276244/X%C3%A2y_d%E1%BB%B1ng_ph%C6%B0%C6
%A1ng_ph%C3%A1p_%C4%91%E1%BB%8Bnh_t%C3%ADnh_%C4%91%E1%BB%8Bnh_l%C6
%B0%E1%BB%A3ng_flavonoid_trong_l%C3%A1_v%C3%A0_n%E1%BB%A5_v%E1%BB% 91i
http://www.duoclieu.org/
http://baigiang.violet.vn/present/show/entry_id/240816