SEMINAR định lượng melamine trong sữa bằng phương pháp HPLC (dược PHÂN TÍCH SLIDE)

ĐỊNH LƯỢNG MELAMINE TRONG SỮA BẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLC...  Melamine được tìm thấy trong sữa và sản phẩm  Nhiều trường hợp trẻ bị nhập viện do nhiễm melamine  Nhiều sản phẩm sữa được nhập

ĐỊNH LƯỢNG MELAMINE TRONG SỮA BẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLC

V TÀI LIỆU THAM KHẢO

NỘI DUNG BÁO CÁO

 Melamine được tìm thấy trong sữa và sản phẩm

 Nhiều trường hợp trẻ bị nhập viện do nhiễm melamine

 Nhiều sản phẩm sữa được nhập vào nước ta xuất phát từ Trung Quốc

 Sự hoang mang của người dân

 Việc kiểm tra, giám sát Melamine nhiễm trong sữa nhằm bảo vệ

sức khỏe người tiêu dùng và thú cảnh

I- ĐẶT VẤN ĐỀ

 Đối tượng

* Melamine

* Mẫu sữa tại TP.HCM

II- ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Nguồn: vi.wikipedia.org

1 Melamine

- Melamine là một chất bột màu trắng,ít

tan trong nước

- khối lượng riêng: 1,57

- độ hòa tan: 3,1g/1 lít nước ở 20 0 C

- Khả năng giải phóng N khi gặp nhiệt độ

cao

- công thức:

1,3,5-triazine-2,4,6-triamine tạo thành 3 phân tử cyanamide

2 Ảnh hưởng của Melamine tới sức khoẻ:

 Bộ y tế Việt Nam đã thông báo chung về mức giới hạn của melamine:

Trong thực phẩm cho trẻ em dưới 36 tháng tuổi không quá 1mg/kg thực phẩm (<=1ppm)

Các loại thực phẩm khác không vượt quá 2,5mg/kg thực phẩm (<=2,5ppm)

Ngưỡng melamine được chấp nhận có trong thức ăn chăn nuôi là 2,5mg/kg; nếu vượt ngưỡng này sẽ bị cấm nhập khẩu, sản xuất kinh doanh và sử dụng trong ngành chăn nuôi

QUI ĐỊNH CỦA NHÀ NƯỚC

- Các thiết bị khác như: tủ sấy, máy lắc, máy cất nước hai lần, thiết bị lọc nước siêu sạch.

- Các dụng cụ thủy tinh như: bình định mức các loại, pipet vạch

và pipet bầu các loại, cốc mỏ

- Micropipet các loại (0,5-10 L, 10-100 mL, 100-1000 mL,…)

- Syranh lọc mẫu; bình định mức các loại, cốc có mỏ các loại

Hệ thống sắc kí lỏng hiệu năng cao (HPLC)

Ghi chú:

1: Bình chứa pha động 2: Bộ phận khử khí

3: Bơm cao áp 4: Bộ phận tiêm mẫu 5: Cộ sắc ký (pha tĩnh) 6: Đầu dò 

7: Hệ thống máy tính có phần mềm ghi nhận tín hiệu, xử lý dữ liệu và điều khiển hệ thống.

8: In dữ liệu. 

 Acetonitril tinh khiết HPLC

 Dung dịch N,O-bis (trimethylsilyl) trifluoacet amide

 Tất cả hóa chất đều là loại tinh khiết phân tích

Dung dịch chuẩn:

Điều kiện

qui trình:

ĐIỀU KIỆN QUI TRÌNH VÀ QUÁ TRÌNH THỰC HIỆN

Quá trình thực hiện:

 Chuẩn bị mẫu thêm 15 ml nước cất

 Cân 5 mg mẫu vào cốc thủy tinh 50 ml mẫu đồng nhất

Dung dịch methanol chứa Melamine

Tạo dẫn xuất cho chuẩn và mẫu

Lấy ra để nguội ở nhiệt độ phòng cho vào mẫu phân tích trên máy GC-MS

Phân tích trên máy sắc kí khi ghép khối phổ.

 Thời gian giữ 9 phút

 Nhiệt độ buồng chuyển: 2000C

Điều kiện khối phổ

Ðuờng chuẩn biểu diễn mối quan hệ giữa diện tích peak và nồng độ chất chuẩn

Mối quan hệ tuyến tính của nồng độ melamine với diện tích của peak

Đường chuẩn

Sắc kí đồ

Giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ)

LOD đã được xác định là 0,1 µgmL-1 và LOQ đã được xác định là 0,2 µgmL-1  Giá trị % của R.S.D được nghiên cứu chính xác ở

mức độ LOQ là trong khoảng 5%

Khảo sát độ lặp lại

 phương pháp này được đánh giá ở nồng độ bốn mức độ melamine (5, 10, 20 và 40 µgmL-1) với việc sử dụng 1 g khô hoặc10ml mẫu chất lỏng Hiệu suất thu hồi phản ánh một trung bình cộng của sáu lần phân tích tại mỗi nồng độ và được báo cáo trong bảng 1

• Độ đúng được xác định trên nền mẫu nước giải khát.

• Tiến hành thêm chính xác một lượng dung dịch chuẩn natribenzoat

vào mẫu thử với tỷ lệ thêm 50(µg/ml); 100(µg/ml); 150(µg/ml) Sau

đó định lượng chất chuẩn tìm lại được so với lượng thêm vào (với

5 phép thử song song) Kết quả khảo sát độ đúng:

Khảo sát độ đúng

+ Nhận xét: Phương pháp định lượng đã xây dựng có độ đúng chấp nhận được đối với việc định lượng Natri benzoat

 LOD và LOQ của phương pháp này được ước tính ở một tỉ số tín hiệu cực đại trên đọ nhiễu (Signal-to-noise) 03:01 và 10:01, bằng cách tiêm một loạt các dung dịch pha loãng với nồng độ nhất định.

Kết quả khảo sát giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ)của phương pháp

 Một nghiên cứu chính xác cũng đã được tiến hành ở mức LOQ bằng việc tiêm sáu lần riêng rẽ chất pha chế và giá trị

% RSD của diện tích peak được tính toán Một nghiên cứu

về hiệu suất thu hồi được thực hiện trong ba lần, mức LOD

và LOQ cho mẫu bột và chất lỏng cho thấy hiệu suất trung bình là 75 ± 2%  của LOD và 90 ± 1% của LOQ

 Phương pháp định lượng hoạt chất Melanine trong nước ngọt

bằng phương pháp HPLC đã được xây dựng và thẩm định Các kết quả thực nghiệm thu được cho thấy phương pháp có giới hạn định lượng rộng, độ tương quan tuyến tính chặt chẽ giữa nồng độ

và diện tích peak, độ lặp lại và độ thu hồi khá tốt

 Sau khi tiến hành phân tích ta thấy hàm lượng Melanine trong

mẫu nước giải khát nhỏ hơn hàm lượng cho phép trong thực

phẩm

KẾT LUẬN

 Bộ Y tế (1998), “Danh mục các tiêu chuẩn vệ sinh đối với lương thực thực phẩm”

QĐ số 867/1998/QĐ-BYT của Bộ trưởng Bộ Y tế ngày 04 tháng 04 năm 1998

Thú y Trường Đại học Nông Lâm, Tp HCM. 

Biochemistry, Seton Hall University, 400 South Orange Ave., South Orange, NJ

07079, USA

TÀI LIỆU THAM KHẢO

CẢM ƠN CÔ VÀ CÁC

BẠN ĐÃ THEO DÕI