Khảo sát nuôi cấy nấm men PHODOTORULA SP trên môi trường bán rắn

slide báo cáo Khảo sát nuôi cấy nấm men PHODOTORULA SP trên môi trường bán rắn

en BO GIAO DUC VA DAO TAO

KHAO SAT DIEU KIEN NUOI CAY

NAM MEN RHODOTORULA SP TREN MOI TRUONG BAN RAN

Giáo viên hướng dẫn Sinh viên thực hiện

Th.S Nguyễn Minh Khang Nguyễn Thanh Trúc Th.S Trương Huynh Huy

Lên men bán rắn

Giảm nguy cơ ô nhiễm, mang

lai hiéu qua kinh té

000) 9 ))00 004i

phát triển cua nam men do Rhodotorula sp trén

môi trường bán rắn thông qua việc tận dụng các

nguồn nguyên vật liệu phụ phâm rẻ tiền từ các

ngành nông nghiệp, công nghiệp, công nghiệp thực phẩm dé thu duoc lượng sinh khối cao

nhat.

Wert NOPDUNG KHAO SAT

®Lua chon ra mdi truong ban ran thich hop nhat

cho việc nuôi cây nâm men đỏ Rhodoforula sp

® Sản xuất chế phâm beta-caroten từ nam men do

Rhodolorula sp trên môi trường tôi ưu

®Kiêm tra hàm lượng beta-caroten trong chế phâm

E;119.4)1210

No NOL DUNG BAO CAO

mm) TONG QUAN

2 VAT LIEU VA PHUONG PHAP THI NGHIEM

3 KET QUA VA THAO LUAN

4 KET QUA VA KIEN NGHI

Nam men Rhodotorula con

được gọi là nắm men sinh sắc tế

carotenoid (carotengensis), là

một trong rất ít các chi nắm men

có khá năng tổng hợp tích luỹ

carotenoid trong đó chú yếu là -

carotene, torulene, torularhodin

2 Beta-caroten

Beta-carotene : thuộc nhóm carotenoid là sắc tô tự nhiên tìm

thay trong thue vat, nam men

TONG QUAN

® Beta - carotene la 1 phan tu cân đôi được câu tạo do | chudi

prolene va 2 vong B-ionone 6 2 dau, khi thuý phân cho 2 phân

tử vitamin A

® Carotenoids được chia làm 2 nhóm sắc tổ chính:

#4 Carotenes: g6m cac hop chat hydrocacbon carotenoid

#t Xanthophylls: gồm các dẫn xuất carofene với nhóm chức

có chứa oxy (hydroxy, keto, epoxy, methoxy, các nhóm acid carboxylic)

3 Lén men ban ran

® Lên men trên môi trường bán rắn (SSF) là quá trình sinh trưởng của vi sinh vật và hình thành sản phẩm trên bề mặt của nguyên liệu, cơ chất chứa ẩm dưới dạng hấp phụ trong mạng

DU lấp LỆ

H

Mei MẢ//))As9() guooj tì

1 TONG QUAN

SS)VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM

3 KET QUA VA THAO LUAN

4 KET QUA VA KIEN NGHI

/ÊN: co: VÀ GIỐNG V G

1 NGUYEN `

® Gạo tắm, lõi bắp, bã đậu nành, bã cơm dừa, cám gạo

2 GIÓNG VI SINH VẬT

® Chủng nắm men Rhodotorula sp do Phong thí nghiệm

vi sinh Trường Cao đẳng Kinh tế - Công nghệ Tp Hồ Chí Minh cung cấp

Webs PHƯƠNG PHÁP THU NHẬN

VÀ XỬ LÝ SÓ LIỆU

® Chỉ tiêu theo dõi là mật độ tế bào nắm men

Cd Diệu định ee dé tế lo bằng phương pháp đếm trực

tiếp băng buồng đêm hông câu

® Kết quả được thống kê và xứ lý bằng phần mềm Excel 2003 và phương pháp ANOVA từ chương trình Stateraphies Plus 3.0

10

Sơ đồ nuôi cấy bán rắn nắm men Rhodotorula sp

cn

`” CÁC THÍ NGHIỆM KHẢO SÁT

® Khảo sát các đặc điểm hình thái của chủng nấm men

® Khảo sát thành phần môi trường nuôi cấy bán rắn

® Khảo sát ảnh hướng của pH và thời gian ngâm gạo

® Tối ưu hóa thành phần môi trường nuôi cấy:

> Tối ưu hóa tỉ lệ cơm tắm

> Tối ưu hóa tí lệ lõi bắp

® Thứ nghiệm sản xuất chế phẩm

12

Mei MẢ//))As9() guooj tì

1 TONG QUAN

2 VAT LIEU VA PHUONG PHAP THI NGHIEM

==) KET QUA VA THAO LUẬN

4 KET QUA VA KIEN NGHI

rr

chảo sát: các đặc điểm hình thái của chúng

® Nắm men Rohodotorula sp khi cay

ria trên môi trường thạch Hensen có

màu kem hồng, bề mặt mịn và có

dang bo

@ Khuaén lac cia nam men do

Rhodotorula sp có màu kem hồng,

khuẩn lạc có hình Nà, renee Yet

mặt mịn, trơn và có đạng bơ, mép

khuẩn lạc không có răng cưa

Đường kính khuẩn lạc khoảng từ 2 -

5 mm.

1 Khảo sát các đặc điểm hình thái của chúng

nam men Rhodotorula sp (tt) _

® Tế bao rivet men

Rhodotorula sp khi quan sat

dưới vật kinh x100 cé hinh

tron cau, kich thuée té bao

2 Khảo sát thành phần môi trường nuôi cấy bán rắn

Dầu ăn 1% (v/w) thé tich/ 1g canh trường (1ml)

Khoáng 1% (v/w) thể tích / 1g canh trường (1ml)

kKêt quả khảo sát môi trường lên men bán răn

Mật At té bao nam men (CFU/g)

ết qu ä theo đối sự phát triển của nắm men

E Môi trường 1

Bì Môi trường 2

D Môi trường 3

° -#

o

<Q

8

=

Kết luận: Môi trường 2 gồm cơm tắm, lõi bắp, bã đậu

nành, đầu ăn, khoáng là môi trường thích hợp cho sự sinh trưởng và phát triển của nắm men đỏ i

3 Khảo sát ảnh hướng của pH và thời gian ngâm gạo

VÀ

2 i) K) K)

Dre T000 cu gạo đến mật

độ nắm men trong quá trình nuôi cấy

Mật độ tê bào nằm men

Cc

ee eles

rong cua pH

(511271515188)

Serer re MLC cá 0c ngâm gạo đến

mật độ tế bào nắm men trong quá trình nuôi cấy

Thời gian ngâm gạo Mật độ tế bào nấm men

sre “ Am ki của thời gian ngâm øạo

4 Tế ưu bóa thành-phần môi trường nuôi cấy

4.1 Tối ưu tỉ lệ cơm tam

Kết quả tối ưu tỉ lệ cơm tắm

Tỉ lệ cơm tam (%) Mật độ tế bào nắm men

100

§,7 108

L3

Biêu đồ tôi ưu tỉ lệ cơm tầm

Co ¡ MIA))0990)/-0 9908 1U)

4.2 Tối ưu tỉ lệ lõi bắp

Kết quả tối ưu tỉ lệ lõi bắp

Tỉ lệ lõi bắp (%) Mật độ tế bào nắm men

Biểu đồ tối ưu tỉ lệ lõi bắp

Kết luận: Ti 1é lõi bắp thích hợp cho sự sinh trưởng

và phát triển của nắm men là 10%

TOI TUU Ti LE LOI BAP

Veler OT

ray phẩm

® Qua quá trình khảo sát môi trường tối ưu cho sự phát triển của nắm men odoforula sp Chọn được pH ngâm gạo là pH = 2 trong thời gian 24 giờ và thành phần môi trường nuôi cấy gồm:

® Cơm 90% (90g)

© Lai bap 10% (10g)

® Ba dau nanh 1% (1g)

@ Dau an 1% (v/w) thé tích/ 1g canh trường (1ml)

® Khoáng 1% (v/w) thể tích /1g canh trường (1ml)

2z

® Sau 7 ngày nuôi cấy-chúng tôi thu toàn bộ canh trường và đem đi

: : shiền bằng cối xay thu

Mei MẢ//))As9() guooj tì

1 TONG QUAN

2 VAT LIEU VA PHUONG PHAP THI NGHIEM

3 KET QUA VA THAO LUAN

I8) KÉT QUÁ VÀ KIÊN NGHỊ

bì

KET LUAN

\Gua quá trình tực hiện để iài vá kết Gua thu được từ các

chỉ tiêu theo dõi, chúng tôi tạm thời rút ra một sô kết luận

E10

® Thành eee Tối trường nuôi cấy gồm có cơm tấm, lõi

bap, bã đậu nành, dâu ăn, khoáng theo tỉ lệ 90% : 10% :

1% : 1%

® Thời gian ngâm gạo là 24 giờ, pH — 2 trước khi tiến hành

hồ hoá

® Điều kiện nuôi cấy tối ưu với các "` số ban đầu:

pH-5,5; Ẩm độ = 60%; mật độ cây giống 3.107 CFU/g cơ

IE

® Nuôi nắm men 6 diéu kién nhiét d6 phong (28 — 30°C) véi thoi gian thu nhan la 7 ngay

® Sấy toàn bộ canh trường ở 45 -50°C trong 24 — 48 gid sau

đó đem đi nghiền bằng cối xay

Webslllt 0š pc rỉ

Ore thời gian thực tập chúng tôi đã tiền hành khảo sát các điều kiện tối ưu để nuôi ca Terme Rhodotorula sp trên môi DU) 3 bán răn về thành phận môi trường, thời gian và pH, tối ưu các thành phần môi trường Tuy nhiên do thời gian có hạn nên aban tôi chưa khảo sát được các điều kiện khác Xin kiến nghị tiếp tục:

® Khảo sát mật độ giống sản xuất

® Khảo sát bố sung tỉ lệ bã đậu nành

® Nghiên cứu và thử nghiệm chế phẩm beta-caroten trên gà công nghiệp trong giai đoạn cho trứng

3

Website: http:// -word.com

CAWE Of OUY THAY

YA CAC BAIT DA THEO

MOT,SO,HINE TRONG QUA TRI '@

_ KHẢO Sv a)

Môi trường ở những D—M đầu và ngày cuôi sinh

nâm men

GGPP

Phytoene Synthase (ertB, al-2) Phytoene

Phytoene Dessaturase

Desaturase

¥ (creP, Pas)

Gcaroten

f-caroten Desaturase (ert, crtZ)

Nerosporene

Ỳ lycopene

Lycopene Cyclase

Ý (enL)

B-caroten

†-caroten

B-caroten hydroxylase

% (crtR)

Zeaxanthin