TÀI LIỆU TRẮC NGHIỆM, BÀI GIẢNG PPT CÁC MÔN CHUYÊN NGÀNH Y DƯỢC HAY NHẤT CÓ TẠI “TÀI LIỆU NGÀNH Y DƯỢC HAY NHẤT” ;https://123doc.net/users/home/user_home.php?use_id=7046916. TÀI LIỆU LUẬN VĂN – BÁO CÁO – TIỂU LUẬN (NGÀNH Y DƯỢC). DÀNH CHO SINH VIÊN CÁC TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC VÀ CÁC TRƯỜNG KHÁC, GIÚP SINH VIÊN HỆ THỐNG, ÔN TẬP VÀ HỌC TỐT KHI HỌC TÀI LIỆU LUẬN VĂN – BÁO CÁO – TIỂU LUẬN (NGÀNH Y DƯỢC)
Trang 1TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP & TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN
BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH MÔN VIRUS HỌC
CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Khóa học:
GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN
Trang 23 Chuẩn bị nguyên liệu
Chuẩn bị trứng gà đã ấp từ 9 – 11 ngày tuổi
Muối sinh lý 10-20%
Trang 3Hình 2: Trứng 9 – 11 ngày tuổi
Chuẩn bị vắc xin Newcastle nhược độc, sử dụng ở nồng độ 10-3, liều lượng là 0.1-0.2ml/trứng
Hình 3: Vắc xin Niu-cát xơ
Pha vắc xin với nước muối sinh lý ở nồng độ 10-1, 10-2, 10-3
Hình 4: Khử trùng hủ vắc xin Niu-cát xơ trước khi đem pha
Trang 4Hình 5: Cho vắc xin vào nước muối sinh lý
Trang 5Hình 8: Trứng đã ấp từ 9 – 11 ngày tuổi
Hình 9: Soi trứng, xác định buồn hơi thật, vị trí phôi và làm dấu vị trí phôi
Hình 10: Xác trùng vỏ trứng bằng cồn và Iod
Trang 6Hình 11: Tiến hành đục lỗ, sau đó xác trùng lại lần nữa
Hình 12: Tiến hành tiêm(liều tiêm 0,1-0,2 cc/trứng)
Lưu ý : Tiêm về phía đối diện phôi không tiêm trực tiếp lên phôi
Hình 13: Dùng parafin hơi nóng bịt kín lỗ khoan sau đó tiến hành ủ ở 37 0 c
5 Xem kết quả
II kỹ thuật tiêm Virus Đậu mùa(kỹ thuật tạo buồng hơi giã)
1 Mục đích
Trang 7Ứng dụng sản xuất Vắc xin để phòng bệnh đậu mùa
2 Dụng cụ - hóa chất
Nước muối sinh lý, cồn, Iod, nút bóp cao su…
3 Chuẩn bị nguyên liệu
Chuẩn bị trứng gà đã ấp 9 – 11 ngày tuổi
Chuẩn bị vắc xin đậu gà nhược độc, pha loãng thành các nồng độ 10-1,10-2,10-3 Sử dụng nồng
độ 10-3, liều tiêm 0,1-0,2 ml/trứng Cách pha loãng thực hiện tương tư như trên
Hình 14: Vắc xin Đậu gà
4 Quy trình thực hiện
Hình 15: Chuẩn bị trứng đã ấp 9-11 ngày tuổi
Trang 8Hình 16: Soi trứng, đánh dấu vị trí buồng hơi giã, khử trùng vỏ trứng, đục lỗ
Hình 17: Dùng núp bóp cao su hút không khí ở buồn hơi giã ra, cho màng cam tuột khỏi
Trang 92 Chuẩn bị
Kháng nguyên : là kháng thể gà
Kháng thể : là kháng thể thỏ
Chuẩn bị môi trường : 12,5gr Agar + 80gr NaCl + 5gr phenol trong 1 lít nước cất
Hình 20: Đun môi trường trên bếp cách thủy
Dùng vải lượt, lọc môi trường vừa nấu xong
Hình 21: Môi trường được lọc xong cho vào chai
Chú ý : Môi trường rất mao đông đặc lại, cần nên tiến hành ngay sao khi lọc xong
Dùng pipet hút 4 - 5 ml thạch nhỏ vào lame, đặt pipet vuông góc với lame, cho thạch chảyxuống từ từ chảy đều trên lame không được có vết nhăn và lồi lỗm chỗ nào, độ dày khoảng 3mm
Trang 10Hình 22: Pipet hút, cho lên lame, môi trường thạch dày 3 mm trên Lame
Hình 23: Đem thạch vào tủ lạnh, làm dấu những vị trí cần đục lỗ, tiến hành đục lỗ
Cho kháng nguyên( kháng thể gà) và kháng thể( kháng thể thỏ) vào những vị trí đã đục lỗtheo quy định như sau : lỗ trung tâm là kháng thể thỏ, 4 lỗ xung quanh là kháng thể gà, từ20µl - 50µl cho mỗi lỗ trên thạch
Hình 24: Cho kháng thể thỏ vào lỗ trung tâm, kháng thể gà vào 4 lỗ còn lại, đặt những
miếng bông gòn để giữ độ ẩm
Thực hiện xong ta chuyển vào tủ ủ, ủ ở 370c, sau 48h để quan sát kết quả
Trang 11Bài 2 THAM QUAN CÔNG TY NAVETCO
I Mục đích
Học hỏi tìm hiểu thêm về quy trình sản xuất Vắc xin của công ty, và một số vấn đề liên quan
về công ty Một số thiết bị và những ứng dụng Công nghệ sinh hocj vào sản xuất vắc xin đượcanh Tú nhiệt tình hướng dẫn
Hai điểm mới và nỗi bật nhất , đáng quan tâm nhất đó là : cách nuôi Virus dùng để sản xuất vắc xin, và kỹ thuật DNA tái tổ hợp vào sản xuất vắc xin Điều thiệt thòi nhất là chỉ được ngồitrên giảng đường, mà không được chứng kiến tận mất do công ty tan ca làm việc
II Một số vắc xin sản xuất được tại công ty
Vắc xin heo tai xanh
Vắc xin cúm
Vắc xin viêm não nhật bản
Vắc xin uốn ván…
III Quy trình sản xuất vắc xin bằng công nghệ DNA tái tổ hợp
Công nghệ tái tổ hợp lấy đoạn DNA miễn dịch gắn vào vi khuẩn Plasmid chuyển vào nấmmen, hay vi khuẩn, để nhân nhanh sinh khối, tách thu sinh khối, để sản xuất vắc xin
Trang 12II Quy trình ly trích ARN cho b nh PRRS, DNA cho b nh Porcine ệ ệ Circovirus Type 2 (PCV2) và ch y PCR ạ
1.Chuẩn bị nguyên liệu và hóa chất
Mầu phổi, thận, lách, hạch của heo ngi ngờ mắt bệnh
Hình 25: Mô heo ngi ngờ mất bệnh PRRS(a), PCV2(b)
Bộ kit thương mại để tiến hành phân lập
Hình 26: Bộ kít Promega dùng để trích ly RNA, bộ kít Việt Á dùng để trích ly DNA 2.Dụng cụ và thiết bị
Máy chạy PCR
Máy ly tâm có tốc độ cao
Vortex
Máy homogenizer hay chày cối
Pipette, đầu col
Tube
Máy chạy điện di
Eppendorf
Trang 133.Cách th c hi n ự ệ
3.1 Trích ly RNA c a b nh heo tai xanh(PRRS) ủ ệ
Bước 1: xử lý mẫu
Lấy 5gr mẫu đã chuẩn trước đó, cắt nhỏ cho vào cối giã nhiễn ra
Hình 27: Cắt mẫu và giã nhiễn
Cho 5ml dung dịch PBS vào mẫu đã giã nhiễn và trộn điều
Hình 28: Hút dd PBS cho vào mẫu đã giã nhiễn
Hút mẫu mô cho vào eppendorf, bỏ cặn Đem ly tâm 6000 vòng/5 phút
Hình 29: Hút mẫu vào eppendorf và đem ly tâm
Bước 2: Cho 200µl mẫu vào eppendorf chứa sẵn 1000µl RNA Lysis Buffer trộn đều, để yên
30 phút, sau đó ly tâm 13000 vòng/1 phút Phá vỡ tế bào, phóng thích RNA
Trang 14Hình 30: Cho mẫu vào eppendorf chứa sẵn RNA Lysis Buffer sau đó trộn đều mẫu
Bước 3: Cho 175µl hỗn hợp dung dịch trên vào eppendorf chứa 350µl RNA Dilution Buffer,trộn đều, ủ 65oc trong 3 phút, ly tâm 13000 vòng/ 10 phút Tủa protein tạp và các tạp chất
Hình 31: Cho hỗn hợp vào eppendorf chứa 350µl RNA Dilution Buffer sau đó đem ly
Trang 15Hình 32: Hút 600µl dung dịch rửa vào eppendof lọc
Bước 6:
Trang 164 Thu hoạch trứng tiêm ở màng CAM
Cắt đầu quả trứng hút hết nước lấy phôi quan sát Cắt đầu quả trứng chỉ lấy màng CAM xem nốt pock
5 Thu hoạch trứng tiêm ở xoang niệu mô
Thử nghiệm phản ứng
HA trên kính
Hút hết nước trong ở xoang niệu
môCắt đầu quả trứng
Trang 17- Trước tiên lấy huyễn dịch nước trứng với HA (+) đem li tâm
- Dùng kim tiêm hút lấy phần nước phía trên
- Bơm kim tiêm đã hút nước huyễn dịch vào màng lọc có kích thước 0.45 µm và 0.22 µm
- Thu dịch lọc
Thử nghiệm phản ứng HA trên kính và ghi nhận kết quả
Lấy dịch nước đã lọc được ở màng lọc 0.45µm thực hiện kiểm tra bằng phản ứng HA trênkính, có 2 trường hợp xảy ra:
+ Nếu mẫu làm phản ứng HA trên kính cho kết quả âm tính, tức virus trong huyễn dịch cókích thước lớn hơn 0.45µm
+ Nếu mẫu làm phản ứng HA trên kính cho kết quả dương tính, tức virus trong huyễn dịch
có kích thước nhỏ hơn 0.45µm Ở trường hợp HA dương tính ứng với dịch nước đã lọc được ở màng lọc0.45µm, tiếp tục lấy dịch nước đã lọc được ở màng lọc 0.22µm thực hiện kiểm tra phản ứng HA trên kính
* Nếu mẫu làm phản ứng HA trên kính cho kết quả âm tính, tức virus trong huyễndịch có kích thước lớn hơn 0.22µm
* Nếu mẫu làm phản ứng HA trên kính cho kết quả dương tính, tức virus trong huyễn dịch cókích thước lớn hơn 0.22µm
Trang 186 Kết quả và thảo luận
Quan sát phôi của trứng tiêm bệnh phẩm ở màng CAM màu đỏ tươi do virus Đậu gâyxuất huyết phôi nhưng không làm chết phôi (Hình 1)
Hình 1 : Phôi của trứng tiêm bệnh phẩm ở màng CAM
So sánh phôi của trứng tiêm bệnh phẩm ở màng CAM và tiêm ở xoang niệu mô
- Khi tiêm virus Đậu ở màng CAM không gây chết phôi, nhưng gây xuất huyết, phôi có màu
đỏ tươi và virus này tạo nốt Pock trên màng CAM Còn tiêm virus Newcastle ở xoang niệu mô thì sau 24 giờ
ấp trứng (sau khi tiêm) virus làm chết phôi Phôi đã chết nên không có màu đỏ tươi (Hình 6)
Trang 19 Nốt Pock trên màng CAM: Bệnh tích gây thủy thủng, dày lên tạo thành nốt pock trên
màng CAM
Hình 3: Nốt Pock trên màng CAM
Phản ứng HA trên kính:
5 mẫu đều xảy ra phản ứng ngưng kết hồng cầu chứng tỏ có sự hiện diện của virus Newcastle
Hình 4: Phản ứng ngưng kết hồng cầu (HA)
Trang 20Bài 2: Phản ứng ngưng kết hồng cầu (HA: Haemagglutination)
1 Nguyên lý
Trên bề mặt virus Newcastle có cấu trúc kháng nguyên haemagglutine, có khả năng kết hợpvới các thụ thể trên bề mặt hồng cầu của loài gà, vịt… nên nó làm ngưng kết các loại hồng cầu này lại vớinhau
2 Mục đích
Xác định hiệu giá pha loãng mà ở đó virus còn khả năng gây ngưng kết hồng cầu
3 Chuẩn bị và cách tiến hành
Trang 21Huyễn dịch hồng cầu gà 1%.
Virus Newcastle
Nước muối sinh lý 0.9%
Vĩ 96 lỗ có đáy hình chữ U
Micropipette 1 đầu và 8 đầu
Cách chuẩn bị dung dịch hồng cầu gà 1%
Chọn gà trống khỏe mạnh, lấy máu có chất kháng đông ở tĩnh mạch cánh
Lấy máu gà vừa thu nhận trộn với nước muối sinh lý, ly tâm 3000 vòng/phút trong 5 phút,loại bỏ phần nước trong bên trên, giữ lại phần hồng cầu lắng dưới đáy Tiếp tục pha hồng cầu với nước muốisinh lý, ly tâm Thực hiện thao tác này đến khi nào hồng cầu được rửa thậtt sạch (thường thực hiện thao tác
ly tâm khoảng 3 – 4 lần) Lần cuối cùng loại bỏ phần nước trong bên trên, phần hồng cầu pha với nước muốisinh lý để được hồng cầu 1%
Hình 5: Hồng cầu 1%
Tiến hành
Cho nước muối sinh lý vào các hàng từ lỗ 1 đến 12, mỗi lỗ 50µl
Trang 22Cho thêm 50µl huyễn dịch virus vào lỗ thứ 1, trộn đều sau đó lấy 50µl huyễn dịch từ lỗ 1 chovào lỗ 2, trộn đều và cứ tiếp tục làm cho đến lỗ thứ 11, hút 50µl huyễn dịch từ lỗ thứ 11 bỏ ra ngoài Lỗ thứ
Phản ứn HA dương tính: xảy ra ngưng kết hồng cầu ở:
Hàng I: từ vị trí thứ 1 - 6 (n = 6), đóng nút tại vị trí thứ 7 Vậy hiệu giá pha loãng mà ở đóvirus còn khả năng gây ngưng kết hồng cầu là 1/ 64
Hàng II: xảy ra hiện tượng “ nhảy cóc”
Hàng III: từ vị trí thứ 1 - 8 ( n = 8), đóng nút tại vị trí thứ 9 Vậy hiệu giá pha loãng mà ở đóvirus còn khả năng gây ngưng kết hồng cầu là 1/ 512
Hàng IV: từ vị trí thứ 1- 10 ( n =10), đóng nút tại vị trí thứ 11 Vậy hiệu giá pha loãng mà ở
đó virus còn khả năng gây ngưng kết hồng cầu là 1/ 1024
Hàng V: xảy ra hiện tượng “ nhảy cóc”
Hàng VI: xảy ra hiện tượng “ nhảy cóc”
Kết quả: Xảy ra hiện tượng “ nhảy cóc” có thể do sai sót thao tác không cho huyễn dịch
virus vào lỗ nên không thể ngưng kết hồng cầu gà tạo hiện tượng đống nút
Trang 23Bài 3: Phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu (HI: Haemagglutination inhibition)
Trang 243 Tiến hành
Cho nuớc muối sinh lý vào hàng thứ nhất từ lỗ thứ 1 đến 12, mỗi lỗ 50 µl
Cho thêm 50 µl huyết thanh gà vào lỗ 1, trộn đều Sau đó lấy 50 µl huyễn dịch từ lỗ 1 cho vào
lỗ 2, trộn đều lên và cứ tiếp tục như thế cho đến lỗ thứ 10, hút 50 µl huyễn dịch ở lỗ thứ 10 bỏ ra ngoài Lỗ
11 dùng làm đối chứng âm, lỗ 12 dùng làm đối chứng duơng
Cho vào mỗi lỗ từ lỗ 1 đến lỗ thứ 11 mỗi lỗ 50 µl huyễn dịch virus đã pha loãng ở nồng độ 4đơn vị HA Để yên 10 – 15 phút
Cuối cùng cho 50 µl huyễn dịch hồng cầu gà 1% vào tất cả các lỗ từ 1 đến 12, lắc đều, để yên
30 phút rồi đọc kết quả
4 Kết quả và thảo luận
Trang 25Qua hình ảnh ta thấy:
Sự ngưng kết và đóng nút không rõ rệt Kết quả này không được chính xác Có thể do thao tácpha loãng và trình tự thực hiện phản ứng HI Do đó trong quá trình thực hiện phản ứng HI cần phải: Sử dụngthành thạo các thao tác trong quá trình thực hiện phản ứng HI
Trang 26Bài 4: Qui trình tách chiết DNA tổng số và chạy PCR
1 Dụng cụ và thiết bị
Máy chạy PCRMáy ly tâm có tốc độ cao ( khoảng 13000 vòng/10 phút)Vortex
Máy homogenizer hay chày cốiPipette, đầu col
Hút nước mô vào đầy 2 tube vô trùng
25
Hinh 8: Bộ kit
Trang 27để yên 10 phút Thêm vào 200µl dung dịch pEX2, trộn đều sao cho toàn bộ dung dịch trong tube phải
chuyển thành màu trắng đục Ly tâm 13000 vòng /10 phút
26
Hình 10: Ly tâm 13000 vòng/5 phút
Hình 11 : Thu dich mô sau khi ly tâm
Trang 28Bước 4: Thu 600µl dịch nổi có chứa DNA vào một tube vô trùng có sẵn 600µl dung dịch pEX3 Trộn đều để yên 10 phút Ly tâm 13000 vòng/ 10 phút.
Bước 5: Loại bỏ dịch nổi, thu cặn màu hồng ( hoặc xanh) Cho từ từ 900µl dung dịch EX4
vào Ly tâm 13000 vòng /5 phút
Bước 6: Loại bỏ dịch nổi, thu cặn Để khô ở 60oC trong 10 – 15 phút Cho vào 50µl dung dịch ED5.
Bước 7: Trước khi sử dụng, dung pipet trộn đều đến khi phần cặn tan hoàn toàn.
Bước 8: Bảo quản mẫu ở -20oC
Bước 9: Lấy mẫu cho vào eppendorf cho vào máy PCR và thiết lập chương trình chạy.
Hình 14: mẫu sau khi vortex Hình 13 : vortex mẫu
Trang 29Hình 13: Chạy PCR
Hình 14: Chu trình chạy PCR
4 Kết quả thảo luận
Hình 15: Kết quả chạy điện di
Trang 30Bài 4: Phản ứng kết tủa và khuếch tán trên thạch (Agar gel immunodiffustion test – AGID test)
1 Nguyên tắc
- Kháng nguyên và kháng thể khuếch tán trong thạch
- Khi gặp nhau sẽ kết hợp tạo thành đường kết tủa trắng mờ đục
2 Chuẩn bị
- Kháng nguyên: huyết thanh gà
- Kháng thể đưa kháng huyết thanh gà
- Đun cách thuỷ cho đến khi tan hết
3 Tiến hành
- Hút 3- 4ml thạch đã nung chảy cho vào lam thủy tinh, chú ý rải thạch theo hình ziczac đểthạch chảy đểu lên mặt lam
- Lam được để trên mặt bàn bằng phẳng cho đến khi thạch đông lại
- Thạch phải dày khoảng 3 mm
- Dùng ống kim loại đục 5 lỗ : 1 lỗ ở giữa thạch, 4 lỗ còn lại đặt vuông góc với nhau
- Cho kháng nguyên vào 1 lỗ ở giữa thạch, cho kháng thể vào 4 lỗ còn lại hay có thể chongược lại cho kháng thể vào 1 lỗ ở giữa, cho kháng nguyên vào 4 lỗ còn lại
Chú ý: tùy vào độ lớn của mỗi lỗ mà ta tiêm vào 1 lượng thể tích tương ứng
- Đặt lam vào trong đĩa petri, đặt bông gòn có thấm nước xen kẽ giữa các lam nhằm tạo độ
ẩm cho đĩa
- Ủ ở 370C
- Đọc kết quả 2 lần: lần 1 là sau 24 giờ, lần 2 là sau 48 giờ
Trang 31Hình 16: Các lam đã tiêm kháng nguyên – kháng thể
4 Kết quả
Lần I: sau 24 giờ chưa có vầng trắng đục như mẫu đối chứng
Kết quả: do không đủ thời gian nên chỉ có thể quan sát mẫu đối chứng dương đã được giảng
viên chuẩn bị từ trước
Hình 17: Phản ứng kết tủa khuếch
tán trên thạch
Trang 32Bài 5: Phản ứng ELISA phát hiện kháng thể kháng virus gây bệnh Gumboro
1 Giới thiệu 1.1 Bệnh Gumboro
Bệnh Gumboro (Infections Brusal Disease) là bệnh thường xảy ra trên gà ở giai đoạn 1 - 12tuần tuổi, rõ nhất là giai đoạn 3 - 6 tuần tuổi
Tất cả các giống gà đều mắc bệnh Gà nhỏ hơn 3 tuần tuổi mắc bệnh không biểu hiện triệuchứng nhưng sẽ làm gà suy giảm miễn dịch Tỷ lệ mắc bệnh là 100%, tỷ lệ chết từ 10-50% hoặc cao hơn nếukết hợp với các bệnh khác
a Nguyên nhân: Do virus thuộc họ Birnaviridae, serotype 1.
b Phương thức truyền lây
- Bệnh có thể lây gián tiếp qua trứng, qua không khí, hoặc thức ăn, nước uống, dụng cụ chănnuôi nhiễm mầm bệnh
- Bệnh lây lan trực tiếp giữa gà mang mầm bệnh và gà khỏe do tiếp xúc
c Triệu chứng
- Thời gian ủ bệnh ngắn 2-3 ngày.
- Sau khi nhiễm bệnh gà biểu hiện triệu chứng đầu tiên là cắn mổ vào hậu môn của nhau,biếng ăn, lông xù, lờ đờ, đi run rẩy, giảm cân, phân tiêu chảy màu trắng, loãng còn nhiều chất nhầy sau đóchuyển sang màu nâu, phân dính đầy xung quanh hậu môn
d Bệnh tích
- Xác chết khô, lông xơ xác, chân khô
- Cơ đùi, cơ ngực, cơ cánh xuất huyết đỏ thành vệt hoặc thâm đen
- Mổ khám túi Fabricicus sưng to, đỏ, có xuất huyết lấm tấm hoặc cả đám, thận sưng
Trang 33- Nếu gà nhiễm bệnh đến ngày thứ 5, 6, 7 thì túi Fabricius nhỏ lại, đến ngày thứ 8 thìchỉ bằng 1/3 trọng lượng ban đầu.
1.2 ELISA
ELISA (Enzyme linked Immunosorbent Assay) có nghĩa là hấp thụ miễm dịch liên kếtvới enzyme, là một phân tích sử dụng kháng thể để nhận diện protein Ở đây kháng thể đặc hiệu cho khángnguyên (thường là protein ta quan tâm) được gắn vào đáy giếng Chất mà ta quan tâm nằm trong mẫu thửđược trộn lẫn với chất chuẩn có liên kết enzyme Khi ta cho hỗn hợp này vào giếng thì giếng nào có chất của
ta trong mẫu thử sẽ cạnh tranh với chất chuẩn làm cho giếng đó sau khi bắt màu sẽ nhạt hơn So kết quả đóvới một giếng chuẩn chỉ có chất chuẩn ta sẽ biết lượng chất ta quan tâm trong mẫu thử của ta là bao nhiêu.ELISA được sử dụng nhiều trong y học, trong chẩn đoán (ví dụ có thai, ung thư v.v), trong chẩn đoán bệnhcho gia súc vật
Ưu điểm của phương pháp ELISA là: độ nhạy cao, có thể phát hiện được phức hợp nhỏkháng nguyên- kháng thể, cho phép phát hiện sớm tác nhân gây bệnh ở giai đoạn sớm khi mầm bệnh mớixâm nhiễm Dùng để phát hịên nhiều loại Protein, nhận diện virut, vikhuẩn, và một số hợp chất phân tửlượng nhỏ trong nhiều mẫu sinh học khác nhau
2 Dụng cụ - hóa chất
- Vĩ phản ứng có phủ kháng nguyên virus gây bệnh Gumboro
- Đối chứng dương : có kháng thể
- Đối chứng âm : không có kháng thể
- Kháng kháng thể chế từ dê có gắn enzyme (Horseradish Peroxidase Conjugate)
- Dung dịch phát hiện màu (TMB Substrate): conzurat + chất hiện màu
- Dung dịch dừng phản ứng (Stop Solution): dừng phản ứng tạo màu
- Dung dịch pha loãng mẫu (Sample Diluent) dùng để pha loãng mẫu huyết thanh
- Nước cất hoặc nước tiệt trùng: rửa mẫu
3 Chuẩn bị