SEMINAR NGHIÊN cứu các CHẤT CHUYỂN hóa GINSENOSID BẰNG kỹ THUẬT UPLC QTOFMS ỨNG DỤNG TRONG ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG của 4 sản PHẨM NHÂN sâm đã CHẾ BIẾN sắc ký HIỆN đại

Trắc nghiệm, bài giảng pptx các môn chuyên ngành Y dược hay nhất có tại “tài liệu ngành Y dược hay nhất”; https://123doc.net/users/home/user_home.php?use_id=7046916. Slide kiểm nghiệm seminar về sắc ký hiện đại ppt dành cho sinh viên ngành Y dược. Trong bộ sưu tập có trắc nghiệm kèm đáp án chi tiết các môn, giúp sinh viên tự ôn tập và học tập tốt môn kiểm nghiệm seminar về sắc ký hiện đại bậc cao đẳng đại học ngành Y dược và các ngành khác

NGHIÊN CỨU CÁC CHẤT CHUYỂN HÓA

GINSENOSID BẰNG KỸ THUẬT

UPLC-QTOF/MS ỨNG DỤNG TRONG ĐÁNH GIÁ

CHẤT LƯỢNG CỦA 4 SẢN PHẨM NHÂN

SÂM ĐÃ CHẾ BIẾN

1

NỘI DUNG

ĐẶT VẤN ĐỀ

• Nhân sâm là loại thảo dược quý phổ biến trên thế

giới => kiểm soát chất lượng => phát triển các

phương pháp phân tích là cần thiết để đánh giá

thành phần saponin và kiểm soát chất lượng.

• Thành phần hóa học chính là các ginsenosid Sau

chế biến các ginsenosid bị cắt đường và khử

nhóm OH tạo thành các chất chuyển hóa

ginsenosid kém phân cực

• Kĩ thuật UPLC-QTOF / MS được áp dụng để xác

định và đánh giá các chất chuyển hóa Đánh giá

được chất lượng của 4 sản phẩm này.

3

TỔNG QUAN

Bạch sâm

Sâm Triều

PP chế biến nhân sấy

sâm tươi

hấp với hơi nước ở 80-95 o C trong 20- 25’

hấp ở 95- 100 o C trong 2- 3h

hấp WG 9 chu kỳ ở 95-100 o C trong 2- 3h

Thành phần

đặc trưng

M-Rb1, M-Rb2, M-Rc,

Re, Rg1

Rb2 , Rc, Rd,

Re, Rg1, các hợp chất chưa

biết

Rb1, Rb2,

Rc, Rd, Re, Rg1

Rd, Rk1, Rg5, Rg3

Đặc biệt:

CK, CY, Rh2, Rk2, Rh3

NGUYÊN LIỆU NHÂN SÂM

Rc, Rb2 Rk1,

Rg5, Rg3

CK

Rh2, Rh3

Rd, Rb2,

Re, Rg1

Rd, Rb2, Re

Chống ung thư, kháng viêm và bảo vệ gan Chống ung thư và kháng viêm

Tác dụng dược lý của ginsenosid trong 4 sản phẩm

TỔNG QUAN

NGUYÊN LIỆU NHÂM SÂM

Ginsenosid là thành phần tạo ra tác dụng dược lý chính

và riêng biệt cho các loại nhân sâm, nên việc xác định và

đánh giá lượng ginsenosid trong 4 sản phẩm này là cần

thiết.

• Các công trình nghiên cứu chỉ ra rằng Nhân sâm sau

chế biến có tác dụng dược lý gia tăng và có nhiều tác

dụng dược lý mới.

• Hồng sâm và Hắc sâm thể hiện tác dụng dược lý mạnh

hơn so với Bạch sâm, sâm Triều Tiên như chống ung

thư, chống kết tập tiểu cầu, chống oxy hóa do tạo ra

các ginsenosides riêng biệt

TỔNG QUAN

NGUYÊN LIỆU NHÂN SÂM

Qúa trình hình thành các chất chuyển hóa

WG

TỔNG QUAN

9

NGUYÊN LIỆU NHÂM SÂM

Qúa trình hình thành các chất chuyển hóa

TỔNG QUAN

PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH

• Trong phân tích nhân sâm, HPLC kết hợp với các loại

đầu dò như UV, DAD (PDA), ELSD, CAD, PAD và MS

được sử dụng phổ biến

• Đặc biệt, UPLC-QTOF/MS sử dụng để phân tích các

chất chuyển hóa trong nhân sâm.

• QTOF/MS là kết hợp của 2 bộ phận phân tích:

Phân tích tứ cực (Quadrupole) + thời gian bay ( Time of Fly)

Đơn giản, có thể chạy ở chế

độ scan mode hoặc chọn lọc

ion (SIM)

Áp dụng cho định lượng và

theo dõi chất mục tiêu

Độ phân giải cao, đo được chính xác số khối, có chế độ full scan

UPLC giúp phân

tích nhanh các

hợp chất với độ

phân giải cao

QTOF/MS rất hiệu quả trong việc phát hiện các chất chuyển hóa khác nhau bao gồm các ginsenosid, dựa vào các nhóm chức của

PAC giúp phân tích

và cho biết sự khác

biệt giữa các mẫu

OPLS-DA giúp phát hiện các thành phần ginsenosid chuyển hóa khác biệt =>phân biệt

ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

CHẤT CHUẨN VÀ DUNG MÔI THỬ

Methanol, nước

và acetonitril

For HPLC (Seoul, Hàn Quốc)

For HPLC (Buchs, Thụy Sĩ)

ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

MẪU THỬ

ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Lọc 0,22 µm và tiêm

mẫu vào hệ thống UPLC

15

ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

ĐIỀU KIỆN SẮC KÝ UPLC-QTOF/MS

Loại máy Waters ACQUITY H-Class UPLC (Waters Corp,

Milford, MA, USA)

Nước: acid formic = 100:0,1, v/v

Dung môi B

Acetonitril: acid formic = 100: 0,1, v/v

Tốc độ dòng 0,4 mL/phút

ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Chương trình rửa giải gradient

ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

ĐIỀU KIỆN SẮC KÝ UPLC-QTOF/MS

Loại máy Waters Xevo G2-S QTOF MS (Waters

Corp, Milford, MA, USA)

Chế độ ion hóa ESI− (m/z = 100-2500 Da)

KẾT QUẢ

CÁC CHẤT CHUYỂN HÓA CỦA NHÂN SÂM CHẾ BIẾN

Dựa vào đồ thị OPLS-DA và S-PLOT

Rc, Re,

Rg1

Rb2 , Rc,

Rd, Re, Rg1, các hợp chất chưa biết

Rb1, Rb2,

Rc, Rd, Re, Rg1

Rd, Rk1, Rg5, Rg3

Đặc biệt: CK,

CY, Rh2, Rk2, Rh3

21

KẾT QUẢ

PHÂN TÍCH ĐA BIÊN PHÂN BIỆT 4 SP NHÂN SÂM CHẾ BIẾN

BÀN LUẬN

• Đây là nghiên cứu đầu tiên sử dụng phương pháp UPLC–QTOF/MS đánh giá chất chuyển hóa và chất lượng của 4 sản phẩm nhân sâm, nghiên cứu này cũng chứng minh được sự hữu ích của nó trong phân tích => tương lai ứng dụng đánh giá các sản phẩm chế biến khác từ các bộ phận khác của nhân sâm như lá, hoa, thân, quả

• Các phân tích đa biến cho ta biết các ginsenosid và các chất

chuyển hóa đặc trưng của 4 loại nhân sâm => sử dụng để đánh

giá tác dụng dược lý của nhân sâm và các sản phẩm chế biến,

TÀI LIỆU THAM KHẢO

23

1: JaeWon Lee, Seung-Heon Ji, Bo-Ram Choi, Doo Jin Choi,

Yeong-Geun Lee, Hyoung-Geun Kim, Geum-Soog Kim, Kyuil

Kim, Youn-Hyung Lee, Nam-In Baek and Dae Young Lee

(2018), UPLC-QTOF/MS-Based Metabolomics Applied for the

Quality Evaluation of Four Processed Panax ginseng

Products, Molecules 2018, 23, 2062.

2: Le Thi Hong Van, Nguyen Thanh Dat, Nguyen Ngoc Khoi,

Jeong Hill Park, Nguyen Minh Duc, Ginsenoside-Rk1 and

ginsenoside-Rg5 isolated from processed Vietnamese

ginseng, Journal of medicinal materials, 2015.

3: Le Thi Hong Van, Nghien cứu thành phần hóa học và tác

dụng sinh học của sâm Việt Nam chế biến, Luận án tiến sĩ

dược học 2018.

Xin chân thành cảm ơn sự chú ý lắng nghe !