Nghiên cứu đặc điểm sinh học của một số chủng xạ khuẩn

Nghiên cứu đặc điểm sinh học của một số chủng xạ khuẩn có hoạt tính kháng Pseudomonas aeruginosa

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC

NỘI DUNG BÁO CÁO

1 Mở đầu

2 Đối tượng, vật liệu và phương pháp nghiên cứu

3 Kết quả và thảo luận

4 Kết luận và kiến nghị

2 Mục tiêu nghiên cứu

- Nghiên cứu các đặc điểm sinh học và đặc điểm phân loại của hai chủng xạ khuẩn đã được lựa chọn.

- Phân loại đến loài hai chủng xạ khuẩn nghiên cứu.

3 Nội dung nghiên cứu

- Nghiên cứu các đặc điểm hình thái, đặc điểm nuôi cấy, đặc điểm sinh lý, sinh hoá của hai chủng xạ khuẩn đã được lựa chọn.

- Nghiên cứu các đặc điểm phân loại của hai chủng xạ khuẩn.

- Phân loại đến loài đối với hai chủng xạ khuẩn nghiên cứu

ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG

2.1.2 Vi sinh vật kiểm định

- Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145 do Viện kiểm nghiệm - Bộ Y tế

cung cấp.

- Pseudomonas aeruginosa 45 phân lập được từ bệnh nhân do Khoa vi

sinh vật, bệnh viện Đa khoa trung ương Thái Nguyên cung cấp.

2.3 Phương pháp nghiên cứu chính

2.3.1 Phương pháp giữ giống

2.3.2 Phương pháp xác định hoạt tính kháng sinh

2.3.3 Nghiên cứu đặc điểm sinh học và phân loại xạ khuẩn 2.3.4 Phương pháp xử lí số liệu

KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

3 1 Đặc điểm hình thái của chủng DT 7.1 và HT 28

Cuống sinh bào tử và bề mặt bào tử của chủng DT 7.1

Cuống sinh bào tử và bề mặt bào tử của chủng HT 28

3.2 Đặc điểm nuôi cấy của chủng DT 7.1 và HT 28

Bảng 3.1 Đặc điểm nuôi cấy của hai chủng DT 7.1 và HT 28

Môi trường Kí hiệu chủng Sinh trưởng Màu KTKS Màu KTCC Màu sắc tố hoà tan

ISP 1 DT 7.1 + Trắng Trắng Không màu

ISP 5 DT 7.1 ++ Vàng Trắng Không màu

HT 28 ++ Ghi xám Trắng xám Nâu đen

nitrat

DT 7.1 ++ Vàng Vàng đậm Vàng

HT 28 ++ Nâu xám Đỏ thẫm Đỏ

 Khả năng sinh sắc tố melanin

- Chủng DT 7.1 không có khả năng làm biến đổi màu môi trường ISP6 từ vàng sang đen chứng tỏ nó không có khả năng sinh sắc tố melanin.

- Chủng HT 28 có khả năng làm biến đổi màu môi trường ISP 6 từ vàng sang đen, chứng tỏ chủng này có khả năng sinh sắc tố melanin.

Hình 3.5 Khả năng sinh sắc tố melanin của chủng DT 7.1 và HT 28

3.3 Đặc điểm sinh lý, sinh hoá

3.3.1 Khả năng đồng hoá các nguồn cacbon của chủng DT 7.1

Ghi chú: +++ Sinh trưởng tốt ++ Sinh trưởng trung bình

+ Sinh trưởng yếu - Không sinh trưởng

Bảng 3 2 Khả năng đồng hoá các nguồn đường của chủng DT7.1 và HT 28

Hình 3.6 Khả năng đồng hoá các

nguồn đường của chủng DT 7.1

Hình 3.7 Khả năng đồng hoá các nguồn đường của chủng HT 28

3.3 Đặc điểm sinh lý, sinh hoá

3.3.1 Khả năng đồng hoá các nguồn cacbon của chủng DT 7.1 và

HT 28

3.3.2 Khả năng chịu muối

3.3.3 Khả năng chịu nhiệt

Bảng 3.4 Khả năng chịu nhiệt của chủng DT 7.1 và HT 28

-Ghi chú: +++ Sinh trưởng tốt ++ Sinh trưởng trung bình

+ Sinh trưởng yếu - Không sinh trưởng

3.3.4 Ảnh hưởng của pH đến sinh trưởng của xạ khuẩn

Bảng 3.5 Ảnh hưởng của pH đến khả năng sinh trưởng

+ Sinh trưởng yếu - Không sinh trưởng

3.3.5 Khả năng sinh enzyme ngoại bào

Bảng 3.6 Hoạt tính enzyme của chủng DT 7.1 và

Hình 3.8 Hoạt tính enzyme của chủng DT 7.1 và HT 28

3.3.5 Khả năng sinh enzyme ngoại bào

3.4 Định loại hai chủng DT 7.1 và HT 28

- Có thể xem chủng HT 28 là một chủng xạ khuẩn thuộc loài Streptomyces

cinereoruber subsp cinereoruber và chủng này có tên gọi là Streptomyces cinereoruber subsp HT 28.

- Chủng DT 7.1 có thể xem là một chủng xạ khuẩn thuộc loài Streptomyces

kursanovii và có tên gọi là Streptomyces kursanovii DT 7.1.

Đặc điểm so sánh DT 7.1 Streptomyces kursanovii

Bảng 3.7 So sánh đặc điểm phân loại của chủng DT 7.1 với Streptomyces

kursanovii

Bảng 3.8 So sánh đặc điểm phân loại của chủng HT 28 với

Streptomyces cinereoruber subsp cinereoruber.

KẾT LUẬN

1 Đặc điểm hình thái của hai chủng DT 7.1 và HT 28

- Chủng DT 7.1 có cuống sinh bào tử xoắn (S) , bề mặt bào tử nhẵn (Sm).

- Chủng HT 28 có cuống sinh bào tử thẳng (RF), bề mặt bào tử nhẵn (Sm)

2 Một số đặc điểm sinh lý, sinh hoá của hai chủng DT 7.1 và HT 28

- Khả năng đồng hoá đường : cả hai chủng đều có khả năng đồng hoá nhiều

nguồn đường khác nhau như arabinose, lactose, fructose…

- Khả năng chịu muối: khả năng chịu muối tối đa của chủng DT 7.1 là 9% và

chủng HT 28 là 5%

- Khả năng chịu nhiệt: Nhiệt độ tối ưu cho sinh trưởng của cả hai chủng là

25oC - 35oC.

- Xác định pH tối ưu: Chủng DT 7.1 sinh trưởng tốt nhất trên môi trường có

pH là 6,5 - 7,5 và chủng HT 28 sinh trưởng tốt nhất trên môi trường có pH là 6,5 - 7.

- Khả năng sinh enzyme ngoại bào: cả hai chủng đều có khả năng sinh các

enzyme amylase, protease, cellulase.

3 Định loại hai chủng DT 7.1 và HT 28

- Chủng DT 7.1 có tên gọi Streptomyces kursanovii DT 7.1.

- Chủng HT 28 có tên gọi Streptomyces cinereoruber subsp HT 28.

KIẾN NGHỊ

Hai chủng xạ khuẩn DT 7.1 và HT 28 có khả năng sinh kháng sinh

mạnh, kháng được cả vi khuẩn G+ và G-, đặc biệt là khả năng kháng P

aeruginosa Vì vậy cần tiếp tục nghiên cứu những vấn đề sau:

- Tối ưu hóa điều kiện lên men CKS.

- Tách chiết và tìm hiểu bản chất hoá học của CKS do hai chủng này sinh ra.

XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN!