ĐÁNH GIÁ mối LIÊN QUAN GIỮA đột BIẾN GEN BRAFV600E với một số đặc điểm lâm SÀNG, cận lâm SÀNG của UNG THƯ BIỂU mô TUYẾN GIÁP THỂ NHÚ

Nguyên nhân và các yếu tố nguy cơ Đa số các trường hợp UTTG không tìm được nguyên nhân bệnh sinh,tuy nhiên người ta thấy có một số yếu tố nguy cơ liên quan tới bệnh bao gồm: - Bệnh nhân

TRẦN LINH GIANG

ĐÁNH GIÁ MỐI LIÊN QUAN

ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG, CẬN LÂM SÀNG CỦA UNG THƯ BIỂU MÔ TUYẾN GIÁP THỂ NHÚ

Chuyên ngành: Tai mũi họng

Mã số: CK 62725305

ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN CHUYÊN KHOA CẤP II

Người hướng dẫn khoa học:

PGS.TS Lê Minh Kỳ

HÀ NỘI – 2018

cDNA Complementary DNA (DNA bổ sung)

CR1,2,3 Conserved Region 1,2,3

(Vùng bảo thủ 1,2,3)DNA Deoxyribonucleic acid

EGFR Epidemal Growth Factor Receptor

(Thụ thể tăng trưởng biểu bì)MAPK Mitogen Activated Protein Kinase

(Protein hoạt hóa phân bào)MEK Mitogen Extracellular Kinase

(Kinase của protein kinase hoạt hóa phân bào)MMP Matrix Metalloproteinase

MuS-RT Mutation Specific Reverse Transcription

(Phản ứng phiên mã ngược đặc hiệu)NIS Sodium/Iodide Symporter (Kênh vận chuyển Iod)PTC Papillary Thyroid Carcinoma

(ung thư biểu mô tuyến giáp thể nhú)PCR Polymerase Chain Reaction

(Phản ứng khếch đại chuỗi)RBD Ras Binding Domain (Miền gắn Ras)

RT Reverse Transcription (Phiên mã ngược)

RTK Receptor Tyrosine Kinase

(Thụ thể tyrosine kinase)siRNA small interfering RNA

TIMP Tissue Inhibitor of MMP (Mô ức chế MMP)

TSHR TSH receptor (Thụ thể hoocmon tuyến giáp); UTTG: Ung thư tuyến giáp

VEGF: Vascular Endothelial Growth Factor

(Yếu tố tăng trưởng nội mạch)

ĐẶT VẤN ĐỀ 1

Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

1.1 TỔNG QUAN VỀ UNG THƯ TUYẾN GIÁP 3

1.1.1 Sơ lược về giải phẫu, sinh lý tuyến giáp 3

1.1.2 Nguyên nhân và các yếu tố nguy cơ 8

1.1.3 Đặc điểm lâm sàng 9

1.1.4 Đặc điểm cận lâm sàng 10

1.1.5 Chẩn đoán giai đoạn bệnh và các yếu tố tiên lượng 13

1.1.6 Điều trị ung thư tuyến giáp 15

1.1.7 Điều trị nội tiết 17

1.1.8 Điều trị tia xạ 17

1.1.9 Điều trị hoá chất 20

1.1.10 Điều trị ung thư giáp có di căn xa hoặc tái phát 20

1.2 TỔNG QUAN VỀ ĐỘT BIẾN GEN BRAFV600E 20

1.2.1 Con đường truyền tín hiệu MAPK 20

1.2.2 BRAF trong con đường truyền tín hiệu 23

1.2.3 Đột biến gen BRAFV600E 25

1.2.4 Cơ chế phân tử của đột biến gen BRAFV600E trong thúc đẩy sự tiến triển của PTC 25

1.2.5 Điều trị đích trong ung thư thư tuyến giáp thể nhú 27

1.3 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU ĐỘT BIẾN GEN BRAFV600E TRONG UNG THƯ BIỂU MÔ TUYẾN GIÁP THỂ NHÚ 28

1.3.1 Nước ngoài 28

1.3.2 Trong nước 28

Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29

2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 29

2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 29

2.2.2 Địa điểm và thời gian nghiên cứu 29

2.2.3 Cỡ mẫu và phương pháp chọn mẫu 30

2.2.4 Phương tiện nghiên cứu 30

2.2.5 Các bước tiến hành nghiên cứu 31

2.2.6 Biến sô/ Chỉ số nghiên cứu 31

2.2.7 Phương pháp xử lý số liệu 34

2.2.8 Đạo đức nghiên cứu 34

Chương 3: DỰ KIẾN KẾT QUẢ 35

3.1 ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG, CẬN LÂM SÀNG, TỶ LỆ ĐỘT BIẾN GEN BRAFV600E 35

3.1.1 Một số đặc điểm tuổi, giới và các yếu tố nguy cơ 35

3.1.2 Đặc điểm lâm sàng 36

3.1.3 Đặc điểm cận lâm sàng 40

3.2 MỐI LIÊN QUAN GIỮA ĐỘT BIẾN GEN BRAFV600E VỚI MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG, CẬN LÂM SÀNG CỦA UNG THƯ BIỂU MÔ TUYẾN GIÁP THỂ NHÚ 41

3.2.1 Sự phân đột biến gen BRAFV600E theo tuổi 41

3.2.2 Mối liên quan giữa đột biến gen BRAFV600E và kích thước khối u 42

3.2.3 Mối liên quan giữa đột biến gen BRAFV600E và T (Tumor) khối u 42

3.2.4 Mối liên quan giữa đột biến gen BRAFV600E và tình trạng di căn 43

3.2.5 Mối liên quan giữa đột biến gen BRAFV600E và giai đoạn phát hiện bệnh 43

3.2.6 Mối liên quan giữa đột biến gen BRAFV600E và kết quả chọc tế bào bằng kim nhỏ 44

Chương 4: DỰ KIẾN BÀN LUẬN 45

DỰ KIẾN KẾT LUẬN 45

Bảng 1.1 Phân loại giai đoạn bệnh theo AJCC 2010 14

Bảng 2.1 Các hóa chất chính dùng trong xét nghiệm đột biến gen BRAFV600E 30

Bảng 2.2 Đánh giá phân độ Tirads theo JY Kward năm 2011 33

Bảng 3.1 Phân bố theo tuổi và giới 35

Bảng 3.2 Các yếu tố nguy cơ 35

Bảng 3.3 Thời gian phát hiện bệnh 36

Bảng 3.4 Lý do khám bệnh và triệu chứng cơ năng 36

Bảng 3.5 Tình trạng toàn thân 36

Bảng 3.6 Đặc điểm hạch 38

Bảng 3.7 Tình trạng dây thanh 38

Bảng 3.8 Chẩn đoán T sau mổ 39

Bảng 3.9 Chẩn đoán N sau mổ 39

Bảng 3.10 Chẩn đoán giai đoạn sau mổ theo AJCC 39

Bảng 3.11 Kết quả siêu âm tuyến giáp 40

Bảng 3.12 Kích thước khối u trên siêu âm 40

Bảng 3.13 Kết quả siêu âm hạch cổ 40

Bảng 3.14 Kết quả chọc hút tế bào bằng kim nhỏ 41

Bảng 3.15 Kết quả xét nghiệm đột biến gen BRAFV600E 41

Bảng 3.16 Sự phân bố đột biến gen BRAFV600E theo tuổi 41

Bảng 3.17 Mối liên quan giữa đột biến gen BRAFV600E và kích thước khối u 42

Bảng 3.18 Mối liên quan giữa đột biến gen BRAFV600E và T (Tumor) khối u 42

Bảng 3.19 Mối liên quan giữa đột biến gen BRAFV600E và tình trạng di căn 43

Bảng 3.20 Mối liên quan giữa đột biến gen BRAFV600E và giai đoạn phát hiện bệnh43 Bảng 3.21 Mối tương quan giữa đột biến gen BRAFV600E và kết quả chọc tế bào bằng kim nhỏ 44

Hình 1.1: Hình ảnh giải phẫu của tuyến giáp .3

Hình 1.2: Giải phẫu hạch vùng cổ .5

Hình 1.3: Phân chia vùng hạch cổ theo Green và cộng sự .6

Hình 1.4: Các giai đoạn của chu trình tế bào .21

Hình 1.5: Con đường truyền tín hiệu MAPK 22

Hình 1.6: Các vùng cấu trúc trên protein BRAF 23

Hình 1.7: Protein BRAF ở trạng thái bất hoạt 24

ĐẶT VẤN ĐỀ

Ung thư tuyến giáp là ung thư nội tiết phổ biến nhất và có tỉ lệ mắctăng nhanh ở nhiều nơi trên thế giới [1] Ước tính có khoảng 122.803 caung thư tuyến giáp xảy ra trên thế giới vào năm 2000, trong đó có khoảng8.570 ca tử vong [2] Tại mỹ, theo số liệu của viện Ung thư Quốc gia,năm 2013 có 60.220 ca ung thư tuyến giáp được chẩn đoán và 1850 trườnghợp tử vong do căn bệnh này Tại Việt Nam theo thống kê cho thấy ỷ lệ mắcUTTG chiếm tỷ lệ 1,9/100000 dân ở Hà Nội, và ở TP Hồ Chí Minh, tỷ lệ mắc ở

nữ là 2,6/100000 dân và ở nam là 1,5/100000 dân [3]

UTTG có nhiều loại mô bệnh học khác nhau, chúng xuất phát từ tế bàonang, cận nang và tổ chức liên kết, tế bào miễn dịch Hiện nay mô bệnh học gồm

4 loại chính được sử dụng trong thực hành lâm sàng và nghiên cứu là ung thưbiểu mô tuyến giáp thể nhú (PTC), ung thư thể nang, ung thư thể tủy và ung thưkhông biệt hóa Trong đó ung thư thể biệt hóa là ung thư thể nhú và ung thư thểnang có tiên lượng tốt do đáp ứng rất tốt với điều trị I131 Đặc biệt, PTC là thườnggặp nhất với tỷ lệ 80% và có xu hướng phát triển chậm

Điều trị PTC thường phối hợp nhiều phương pháp như phẫu thuật, điềutrị bằng I131, điều trị hormon đem lại kết quả rất tốt và là lựa chon đầu tiên choliệu trình điều trị trên những bệnh nhân này Tuy nhiên, PTC cũng có tỷ lệ táiphát đáng kể, khoảng 10% sau 10 năm, 30% sau 30 năm và 35% sau 40 nămtheo dõi sau điều trị ban đầu Trong số những bệnh nhân tái phát cục bộ, 74% táiphát ở hạch lympho cổ, 20% ở tuyến giáp.6% ở khí quản hoặc cơ và 7% chết doung thư [2].Và có một tỷ lệ nhỏ trong những bệnh nhân UTTG thể biệt hóa táiphát, di căn không đáp ứng với I131 Do vậy, việc điều trị trở nên khó khăn

Khi phân tích số liệu trên lượng mẫu lớn từ nhiều bài báo thống kê trước

đó trên 1118 ca PTC, Tufano R.P et al đã cho thấy tỉ lệ tái phát khối u ở bệnh

nhân mang đột biến BRAF V600E là 24.9% và bệnh nhân không mang đột biến là

12.6% [4] Trong khi nghiên cứu của Xing et al trên 1849 bệnh nhân ở 7

quốc gia từ năm 1978 đến năm 2011 đã chỉ ra đột biến BRAF V600E làm gia tăng

tỷ lệ tử vong ở bệnh nhân PTC, 5.3% ở bệnh nhân PTC mang đột biến so với1.1% ở bệnh nhân PTC không mang đột biến, trong đó 80.4% số ca PTC tửvong là bệnh nhân mang đột biến [5] Bên cạnh đó, nghiên cứu của Xing et al

còn chỉ ra mối tương quan giữa BRAF V600E trong bệnh nhân PTC sơ cấp với sựkháng thuốc - mất khả năng hấp thụ iốt phóng xạ trong khối u tái phát dẫn đếnthất bại trong điều trị và tăng tỉ lệ tử vong [6] Đến thời điểm hiện tại, chúng

ta chỉ mới phát hiện cơ chế chủ yếu của hiện tượng kháng I131 là do đột biến

gen BRAFV600E này

Tại Việt Nam, hiện nay chưa có nhiều nghiên cứu về đột biến gen

BRAFV600E trong tiên lượng nguy cơ kháng I131 ở bệnh nhân PTC, cũng nhưgiúp phân tầng nguy cơ và quản lý bệnh nhằm giảm thiểu nguy cơ tái phát và

tỷ lệ tử vong Vì vậy, nghiên cứu này tiến hành với hai mục tiêu:

1 Xác định tỷ lệ đột biến gen BRAF V600E bằng phương pháp phiên mã ngược đặc hiệu alen MuS - RT.

2 Phân tích mối liên quan giữa đột biến gen BRAF V600E với một số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng của ung thư biểu mô tuyến giáp thể nhú.

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1 TỔNG QUAN VỀ UNG THƯ TUYẾN GIÁP

1.1.1 Sơ lược về giải phẫu, sinh lý tuyến giáp

1.1.1.1 Giải phẫu tuyến giáp

a) Hình thể ngoài

Tuyến giáp ôm quanh gần hết khí quản, nằm ở giữa phía trước dướicủa cổ Gồm hai thùy bên nối với nhau bởi eo giáp

Hình 1.1: Hình ảnh giải phẫu của tuyến giáp [7]

- Thùy bên: Hình tháp tam giác, có ba mặt Mặt trước ngoài liên quanvới cân cơ vùng dưới móng Mặt sau liên quan với mạch, thần kinh vàtuyến cận giáp Mặt trong liên quan với khí quản, thực quản (ở phía sau),với dây thần kinh quạt quặt ngược mà chủ yếu là dây quặt ngược trái Donhững liên quan này khi bị chèn ép do khối u sẽ gây khó thở, khàn tiếng,nuốt vướng

- Eo giáp: Dính vào vòng sụn khí quản 2-3 nên nó di chuyển theothanh khí quản ta nuốt Đây là một đặc điểm giúp ta phân biệt khối u củatuyến giáp với các khối u khác ở cổ.

+ Động mạch giáp dưới: Tách từ động mạch dưới đòn tới thùy giápchia ra các nhánh cho phần dưới của tuyến giáp và tuyến cận giáp

- Tĩnh mạch: Các tĩnh mạch của tuyến giáp tạo nên một đám rối ởmặt trước ngoài mỗi thùy (giữa vỏ và bao giáp) Từ đây xuất phát các tĩnhmạch giáp trên và tĩnh mạch giáp giữa đổ vào tĩnh mạch cảnh trong

Trong quá trình phẫu thuật tuyến giáp việc khống chế mạch máu chủđộng sẽ hạn mất máu đến mức tối đa

c) Thần kinh

Dây thần kinh X: Ở vùng cổ trước, dây X đi sau động mạch và tĩnh mạchcảnh bao gồm các nhánh bên:

- Dây thanh quản trên: Chạy vòng quanh, sau đó bắt chéo mặt trong của

động mạch cảnh trong tới bờ trên xương móng chia làm 2 nhánh trong và ngoài :+ Nhánh trong: chạy ngang vào màng giáp-móng và tận hết ở thanh quản+ Nhánh ngoài: Là nhánh dưới của dây thanh quản trên, nếu bị tổnthương dẫn đến khó nói do mất sự điều chỉnh âm thanh [8]

- Dây thanh quản dưới phải: Sinh ra từ dây X ở chỗ bắt chéo với phần

đầu tiên của động mạch dưới đòn Chạy quặt ngược lên ở trong mặt bên củakhí quản, trước thực quản, đi sau dây chằng bên Berry, vào trong thanh quản

ở bờ dưới bó nhẫn- hầu của cơ căng màn hầu dưới Dây quặt ngược thườngphân chia ở chỗ bắt chéo với nhánh của động mạch giáp dưới Chỉ có nhánhvào thanh quản mới là nhánh vận động

- Dây thanh quản dưới trái: Tách ra từ dây X ở bờ dưới quai động mạch chủ.

Phẫu thuật tuyến giáp cần phải tránh làm tổn thương dây thần kinh thanhquản quặt ngược, vì tổn thương thần kinh sẽ làm liệt dây thanh, bệnh nhân có thểkhàn tiếng hoặc mất tiếng

Vùng VI: Hạch khoang trung tâm gồm: Hạch trước thanh quản, hạchtrước khí quản, hạch cạnh khí quản.

Vùng VII: Hạch trung thất trên

Hình 1.3 Phân chia vùng hạch cổ theo Green và cộng sự [9]

Tuyến giáp chứa mạng bạch huyết dày đặc nối với nhau ở vùng eo, rờituyến giáp đi theo các mạch máu lớn của tuyến

Mạch bạch huyết ở phía trên theo động mạch giáp trên, mạch bạch huyếtphía dưới theo động mạch giáp dưới và tĩnh mạch giáp giữa Dòng Lymphoban đầu có xu hướng đi vào hạch nhóm VI cùng bên Ở cực trên thùy tháp và

eo tuyến, hạch bạch huyết dẫn lưu lên phía trên, đi vào hạch nhóm II và nhómIII, hệ bạch huyết ở cực dưới ban đầu dẫn lưu vào hạch nhóm VI sau đó vàonhóm IV và nhóm VII

Di căn hạch Lympho thường xẩy ra theo thứ tự : ban đầu đi tới hạch nhóm

VI cùng bên sau đó di chuyển lên hạch cổ bên cùng bên rồi đi đến những hạch cổbên ở bên đối diện.Tuy nhiên vẫn xẩy ra di căn kiểu nhảy cách

Những hạch nhóm VI cùng bên thường gặp nhất đối với UTTG thể nhú.Những hạch Lympho nhóm VI cùng bên di căn tới 69% trong số những bệnhnhân di căn hạch.

- Hạch cổ bên, bên đối diện có 10-20% hạch di căn

- Hạch cổ bên cùng bên (II - III - IV – V) gặp 37,54% số bệnh nhân dicăn hạch

- Giữa đám rối bạch huyết trong niêm mạc khí quản và của tuyến giáp có

sự thông thương trực tiếp với nhau Điều này giải thích những trường hợpUTTG có di căn sớm vào hạch trước khí quản (tương ứng với eo giáp)

- Động mạch cảnh chung là mốc để phân biệt khoang bạch huyết trungtâm với khoang bên và đó là những khoang thường được tiến hành nạo véthạch trong UTTG

Trong quá trình phẫu thuật UTTG cần phải lấy triệt để các nhóm hạch cónguy cơ cao ung thư di căn, đặc biệt nhóm hạch cổ VI cùng bên

1.1.1.2 Sinh lý tuyến giáp

Tế bào nang tuyến bài tiết hai hormon: Thyroxin (Tetraiodothyronin -T4)

và Triiodothyronine (T3), hai hormon này có nhiều chức năng quan trọng đốivới đời sống con người Nó làm cơ thể phát triển thông qua việc làm sụnliên hợp chuyển thành xương, thúc đẩy sự trưởng thành, phát triển nãotrong thời kì bào thai và trong những năm đầu sau khi sinh Làm cơ quansinh dục phát triển (khi cơ thể còn non), cơ quan sinh dục hoạt động (khi

cơ thể trưởng thành) Thyroxin tham gia vào quá trình chuyển hóa vậtchất của cơ thể, điều hòa thần kinh giao cảm, phó giao cảm, điều hòa thânnhiệt và có ảnh hưởng tới nhịp đập của tim

Điều hòa bài tiết hormon tuyến giáp bởi nồng độ TSH của tuyến yên.TSH kích thích tuyến giáp bài tiết T3 ,T4, do vậy nếu TSH tăng thì T3,T4 sẽbài tiết nhiều

Ngoài ra, các tế bào cận nang tiết ra Calcitonin là hormon tham gia trongchuyển hóa canxi [10]

1.1.2 Nguyên nhân và các yếu tố nguy cơ

Đa số các trường hợp UTTG không tìm được nguyên nhân bệnh sinh,tuy nhiên người ta thấy có một số yếu tố nguy cơ liên quan tới bệnh bao gồm:

- Bệnh nhân có tiền sử xạ trị vùng cổ hoặc tiền sử tiếp xúc, chiếu tia Xhay các tia liên quan tới máy chụp CT

- Chế độ ăn thiếu Iodin làm tăng nguy cơ mắc các bướu giáp đơn thuầncũng như ung thư tuyến giáp thể nang

- Tiền sử mắc các bệnh tuyến giáp mạn tính như viêm tuyến giáp mạntính Hashimoto hoặc viêm tuyến giáp bán cấp De Quervain…có nguy cơ caomắc ung thư tuyến giáp

- Trong ung thư tuyến giáp thể tủy, có liên quan chặt chẽ với tính chấtgia đình và di truyền Thường những bệnh nhân ung thư tuyến giáp thể tủythường nằm trong bệnh cảnh đa u nội tiết MEN 2, trong đó có 2 dưới nhómMEN 2a và MEN 2b

+ MEN 2a bao gồm: ung thư tuyến giáp thể tủy, u tế bào ưa chrom tiếtAdrenalin tại tuyến thượng thận và u tuyến cận giáp

+ MEN 2b bao gồm: ung thư tuyến giáp thể tủy, u tế bào ưa chrom và u

xơ thần kinh hay gặp ở niêm mạc và đường tiêu hóa, đặc biệt là ở lưỡi

- Yếu tố di truyền và nguồn gốc gen:

+ Hiện nay người ta đã biết đến một số đột biến gen sinh ung thư tuyến

giáp, tuy nhiên vai trò chắc chắn của chúng còn chưa được chứng minh Đột

biến gen RET nằm trên NST số 10, gen BRAF và gen PTC có thể sinh ung thư tuyến giáp thể nhú và thể tủy, gen RAS có thể sinh ung thư tuyến giáp thể

nang Phần lớn các đột biến này chủ yếu xảy ra trên các đoạn ADN kiểm soát

sự sao chép và nhân đôi tế bào

+ Ngoài ra còn có một số yếu tố nguy cơ cao khác liên quan tới gen sinh ung thư như đột biến gen APC gây bệnh đa polip có tính chất gia đình, đột biến gen PTEN gây bệnh ung thư đường niệu và ung thư vú, đột biến gen

PRKAR1A gây rối loạn chức năng các tuyến nội tiết lành tính

Ngoài ra một số tác giả Việt Nam ghi nhận 1 số yếu tố nguy cơ khác nhưngười sống ở vùng biển, nơi có chế độ ăn giàu iod hoặc người có tiền sửBasedow khi có u đặc tuyến giáp thì dễ nghi ngờ ung thư tuyến giáp [11]

1.1.3 Đặc điểm lâm sàng

Ung thư tuyến giáp thường tiến triển âm thầm Phần lớn là thể nhú và ít

có biểu hiện lâm sàng

* Triệu chứng cơ năng

- Trong giai đoạn đầu, triệu chứng cơ năng thường nghèo nàn, ít có giátrị Đa số bệnh nhân đến khám vì xuất hiện khối u giáp, điều quan trọng cầnghi nhận hoàn cảnh, thời gian phát hiện, sự thay đổi mật độ và thể tích u.+ U lớn nhanh gợi ý ung thư (đặc biệt u gần đáy tuyến) nhưng lưu ýnhững u tuyến và nang cũng có thể to nhanh

+ Trường hợp xuất huyết trong u thường gây đau cấp tính và to nhanh.+ Ở thể giả viêm của UTTG, tuyến giáp to toàn bộ, đau, sốt [2]

- Giai đoạn muộn hoặc khối u lớn xâm lẫn thường có biểu hiện nuốtvướng, khó thở, khàn tiếng Hoặc ung thư thể không biệt hóa phát triểnnhanh, u to dính với mô xung quanh, xâm lẫn khí quản gây nghẹt thở

* Triệu chứng thực thể

- U có thể biểu hiện một hay nhiều nhân với đặc điểm u cứng, bờ rõ, bềmặt nhẵn hay gồ ghề, di động theo nhịp nuốt

- U có thể ở một thùy, eo hoặc cả hai thùy

- Khi u lớn thường có biểu hiện: khối u cứng, cố định, đỏ da, sùi loéthoặc chảy máu

- Hạch cổ: đa số hạch cùng bên (Có thể hạch cổ đối bên hoặc hai bên)

Hạch dãy cảnh, thượng đòn, dưới hàm, dưới cằm, hạch gai Với đặcđiểm hạch rắn, di động, không đau

- Một số trường hợp có hạch trước khi tìm thấy u nguyên phát Ở ngườitrẻ, hạch cổ xuất hiện gợi ý UTTG ngay cả khi không sờ thấy u tuyến giáp,nhưng thực ra UTTG đã có thể có nhiều năm

- Một số bệnh nhân đến vì một di căn xa phổi, não, xương, gan… quathăm khám mới phát hiện được u giáp [12]

1.1.4 Đặc điểm cận lâm sàng

* Tế bào học

Đây là xét nghiệm có giá trị cao, cho kết quả nhanh và tương đối an toànnhằm xác định chắc chắn thể loại tổn thương và có thái độ xử lý chắcchắn.Thường áp dụng kỹ thuật chọc hút bằng kim nhỏ tại u hoặc tại hạch Kỹthuật này triển khai từ năm 1958 và lợi ích đã được nhấn mạnh bởi nhiều tácgiả Thông thường tế bào học tại u có giá trị cao đối với ung thư tuyến giápthể nhú, và độ nhậy không cao trong ung thư tuyến giáp thể nang [13]

* Siêu âm tuyến giáp:

Đây là kỹ thuật chẩn đoán có giá trị cao, cho phép xác định vị trí, kíchthước, số lượng, hình thái và sự xâm lấn khối u tuyến giáp và hạch cổ Trênhình ảnh siêu âm khối ung thư tuyến giáp thường có các dấu hiệu hình ảnhnhân đặc giảm âm, ranh giới không rõ, có tăng sinh mạch mạnh, có thể có vôihóa trong khối

Hiện nay việc sử dụng TIRADS (Thyroid Imaging Reporting and DataSystem) đánh giá các khối u tuyến giáp khá phổ biến, đây là hệ thống phânloại đã được đề xuất bởi Horvath et al, với một đề nghị sửa đổi từ Jin Kwak

et al (2011) Hệ thống này được chia làm 6 loại từ Tirads I – Tirads VI

- TIRADS 1: tuyến giáp bình thường

- TIRADS 2: tổn thương lành tính

- TIRADS 3: có thể tổn thương lành tính

- TIRADS 4: tổn thương đáng ngờ (4a, 4b, 4c với sự gia tăng nguy cơ ác tính)

- TIRADS 5: có thể tổn thương ác tính (nguy cơ hơn 80% bệnh ác tính)

- TIRADS 6: bệnh ác tính đã được chứng minh làm sinh thiết

* Chụp X – Quang, cắt lớp vi tính và cộng hưởng từ

- Chụp tư thế cổ thẳng – nghiêng thông thường xem khối u có chèn épvào khí quản, thực quản có bị đẩy hoặc xâm lẫn không

- Chụp X – quang phổi, xương tìm tổn thương thứ phát [14]

- Chụp cắt lớp vi tính và cộng hưởng từ: Có thể đánh giá chính xác hơn

vị trí của u nguyên phát cũng như mức độ xâm lấn của u cho phép định hướngchẩn đoán u lành hay ác và đánh giá hạch cổ tốt hơn so với siêu âm [14]

* Xạ hình tuyến giáp và xạ hình toàn thân và PET-CT với FDG 18

- Chụp xạ hình tuyến giáp: thường sử dụng I131, I - 123 hoặc Tc99mpetechnetate (Tc99mO4) Xạ hình cho thấy hình ảnh, chức năng của tuyếngiáp và nhân giáp Phần lớn UTTG không bắt xạ và biểu hiện bằng hình ảnhnhân lạnh, có nhiều khả năng ác tính hơn nhân nóng Tỷ lệ ác tính trên cácnhân lạnh là 5-15%.Tuy nhiên, nhân lạnh trên xạ hình cũng có thể là u lành, nangtuyến Vì vậy, chụp xạ hình ít có giá trị xác định bản chất u nhưng có thể bỏ sótnhững khối u có kích thước nhỏ hơn 1cm do độ phân giải hạn chế [14]

- Xạ hình toàn thân: rất có ích trong việc phát hiện di căn xa nhưng chỉ

có giá trị khi đã cắt giáp toàn phần

- PET-CT với FDG 18: hoạt chất phóng xạ hay được dùng trong PET CT

là FDG 18 Trong PET CT với FDG 18 tại mô ung thư tuyến giáp thườngbiểu hiện với nồng độ hoạt chất phóng xạ (SUV) cao hơn bình thường đặcbiệt là với những tổn thương di căn xa Hai phương pháp này thường được sử

dụng trong theo dõi sau điều trị nhằm phát hiện tái phát, di căn Đặc biệt làkhi các tổn thương tái phát nhỏ, thậm chí không phát hiện trên lâm sàng, siêu

âm và CT scan [13]

* Chẩn đoán sinh học

Định lượng Calcitonin, CEA trong máu đối với bệnh nhân ung thư thể tủy

để biết bệnh còn sót lại, tái phát hay di căn khi chưa có biểu hiện lâm sàng vàdùng xét nghiệm này để tầm soát những thành viên trong gia đình Định lượngThyroglobulin trong máu thường không phân biệt được u lành hay u ác tính [13]

* Sinh thiết

- Sinh thiết chẩn đoán mô bệnh học (MBH) trước mổ: Đây là phương

pháp cho phép có chẩn đoán xác định trước mổ và được tiến hành dưới sựhướng dẫn của siêu âm, nhưng chưa được tiến hành rộng rãi bởi nguy cơchảy máu

- Sinh thiết chẩn đoán giải phẫu bệnh tức thì trong mổ (áp tế bào, cắt

lạnh): rất phổ biến và gần như trở thành thường quy có giá trị cao trong việcquyết định phương pháp phẫu thuật

Đây là phương pháp giúp phẫu thuật viên quyết định cách thức phẫuthuật Theo Mc Henry và cộng sự cho thấy sinh thiết tức thì với các khối uđặc có độ nhậy 93%, độ đặc hiệu 100% và độ chính xác lên tới 97% [15].Trong khi với tổn thương dạng nang theo nghiên cứu của Mulcahy và cộng sựcho thấy kết hợp chọc hút kim nhỏ và sinh thiết tức thì bỏ sót tới 30% ung thưtuyến giáp thể nang [16]

Hình ảnh mô bệnh học ung thư biểu mô tuyến giáp thể nhú:

Về vi thể, bao giờ u cũng có cấu trúc nhú Hình ảnh chiếm ưu thế là cácnhú gồm lưới mô liên kết – mao mạch nâng đỡ, nhân tế bào biểu mô có xuhướng tự che phủ, nhạt màu, gọi là “nhân thủy tinh mờ” Bào tương sáng hay

ưa acid Hầu như bao giờ cũng gặp cấu trúc túi tuyến, đôi khi còn chiếm ưuthế Những vật thể calci, hình cầu (u thể cát, cầu calci đá nhỏ) hay gặp trong

ung thư biểu mô nhú song rất hiếm gặp ở các tổn thương khác Tính chất đặctrưng nữa là xu hướng lan tràn theo đường bạch huyết Ung thư biểu môtuyến giáp có 1 biến thể cấu trúc là ung thư biểu mô nhú xơ cứng không vỏbọc (thầm lặng) Là một loại cấu trúc của ung thư biểu mô nhú Đường kínhthường dưới 1 cm và tiềm ẩn về lâm sàng, chỉ phát hiện được sau khi có dicăn hạch cổ Loại u này xâm nhiễm nhu mô giáp kế cận và có 1 trung tâm xơđôi khi chứa cầu calci.

* Các xét nghiệm chức khác thường không có giá trị chẩn đoán

1.1.5 Chẩn đoán giai đoạn bệnh và các yếu tố tiên lượng

Phân loại TNM và giai đoạn bệnh theo Hiệp hội chống ung thư thế giới

(UICC) và Hiệp hội Ung thư Hoa kỳ (AJCC) - 2010 [13] [17]

T - Khối u nguyên phát

Tx: u nguyên phát không xác định được

To: không có bằng chứng của khối u nguyên phát

T1: u có đường kính < 2cm, giới hạn trong TG

T1a: u có đường kính < 1cm

T1b: u có đường kính từ 1 - 2cm

T2: u có đường kính 2 - 4cm, giới hạn trong TG

T3: u lớn có đường kính > 4cm, vẫn nằm trong giới hạn của TG hoặc ukích thước bất kỳ có vi xâm lấn ra ngoài TG ( như xâm lấn cơ ức giáp hoặc tổchức xung quanh TG )

T4: T4a: khối u kích thước bất kỳ phá vỡ vỏ TG xâm lấn tổ chức dưới

da, thanh quản, khí quản, thực quản hoặc TK TQQN

T4b: u kích thước bất kỳ xâm lấn cân trước sống và bao cảnh hoặc cácmạch máu trung thất

Tất cả các u giáp thể không biệt hoá được coi là T4

T4a : ung thư giới hạn trong TG

T4b: ung thư xâm lấn ra ngoài TG trên đại thể

N - Hạch vùng

Nx: Không xác định được hạch vùng

N0: Không di căn hạch vùng

N1: Di căn hạch vùng

N1a: Di căn hạch cổ cùng bên

N1b: Di căn hạch cổ hạch cổ hai bên, đường giữa hoặc hạch cổ đối bên,trung thất

Bảng 1.1 Phân loại giai đoạn bệnh theo AJCC 2010 [17]

Ung thư biểu mô thể nhú hoặc thể nang

Giai đoạn Bệnh nhân < 45 tuổi Bệnh nhân > 45 tuổiGiai đoạn I

T bất kỳ, N1, Mo

T bất kỳ, N bất kỳ, M1Ung thư TG thể tủy

T bất kỳ, N1, Mo

T bất kỳ, N bất kỳ, M1Ung thư TG không biệt hóa, tất cả mọi trường hợp đều giai đoạn IV

Bên cạnh việc phân loại MBH, phân loại TNM và giai đoạn bệnh, nhiềutác giả cũng đề cập đến các đặc điểm liên quan đến tiên lượng bệnh bao gồm

những đặc điểm của khối u (kích thước u, mức độ xâm lấn, type tế bào …),các đặc điểm về giải phẫu bệnh, tuổi, giới, tiền sử gia đình… sự có mặt củahạch vùng và di căn xa, phương pháp phẫu thuật.

Dựa vào các thang điểm khác nhau, các nghiên cứu chia các bệnh nhânthành nhóm các bệnh nhân có nguy cơ cao (high - risk patients) với tỷ lệ tửvong, tái diễn cao hay nhóm bệnh nhân có nguy cơ thấp (low - risk patients) với

tỷ lệ tử vong và tái phát rất thấp, từ đó lựa chọn chiến thuật điều trị thích hợp Nghiên cứu của Mayo Clinic sử dụng các thang điểm EORTC, TNM,AMES, AGES cho phép phân biệt các nhóm bệnh nhân nguy cơ thấp với tỷ lệ

tử vong sau 20 năm là 1% với các bệnh nhân có nguy cơ cao tỷ lệ tử vong 30

- 40% [17] Theo hướng dẫn của mạng lưới theo dõi ung thư Hoa Kỳ(NCCN), nhóm UTTG biệt hóa có nguy cơ cao gồm những bệnh nhân có độtuổi dưới 15 hoặc trên 45, nam giới, có tiền sử gia đình mắc ung thư, khối ulớn hơn 4 cm, khối u ở cả 2 thùy, xâm lấn bao tuyến, mạch máu, di căn hạch,

di căn xa, đặc điểm là tế bào Hurthle, tế bào lớn, nhân teo, xơ hóa lan tỏa,hoại tử, tổ chức ung thư không bắt I131 [18]

1.1.6 Điều trị ung thư tuyến giáp

Ngày nay các tác giả đồng ý rằng phẫu thuật là phương pháp được lựachọn đầu tiên cho UTTG nói chung cũng như UTTG thể nhú nói riêng, mặc

dù mức độ rộng rãi của phẫu thuật vẫn còn nhiều bàn cãi Tuy nhiên hầu hếtcác tác giả đều cho rằng phẫu thuật cắt toàn bộ tuyến giáp kết hợp với nạo véthạch cổ là phương pháp điều trị tối ưu nhất, hạn chế tối đa nguy cơ tái phátsau mổ Liệu pháp nội tiết dựa trên cơ sở sinh lý bệnh được sử dụng, cũngnhư việc dùng đồng vị phóng xạ, hay xạ ngoài để điều trị bổ trợ sau phẫuthuật Điều trị bằng hoá chất thường không mang lại hiệu quả, nên hiện nay ítdùng để điều trị cho UTTG thể biệt hóa

1.1.6.1 Điều trị phẫu thuật

* Các phương pháp phẫu thuật và chỉ định [19] [13]

Có nhiều phương pháp phẫu thuật khác nhau tuỳ thuộc vào vị trí u, kíchthước u, số lượng u, tuổi và tình trạng di căn, cũng như nhóm bệnh nhân có nguy

cơ cao (tuổi > 45, kích thước u > 4cm, vỏ bao bị xâm lấn, nhiều ổ) và nhóm nguy

cơ thấp (tuổi < 45, kích thước u < 1cm, chưa xâm lấn vỏ bao, một ổ)

- Lấy u tuyến giáp đơn thuần: Không được áp dụng vì thường không lấy

đủ rìa mô lành xung quanh

- Cắt thùy giáp có u: Đây là phẫu thuật tối thiểu trong ung thư tuyếngiáp, được áp dụng với u có kích thước nhỏ, hiện nay cũng ít được sử dụng

- Cắt tuyến giáp gần toàn bộ: Phương pháp cắn gần hết tuyến giáp, chỉ đểlại một ít nhu mô giáp với mục đích nội tiết sau mổ Tuy nhiên với tính chất

di căn ngay từ khi khối u còn rất nhỏ, vì vậy cắt thùy tuyến giáp có u hay cắtgần toàn bộ tuyến giáp có thể có nguy cơ bỏ sót thương tổn, hơn nữa việcđiều trị bổ trợ sau mổ với I131 là khó khăn do I131 tập chung chủ yếu tại môtuyến giáp làm giảm khả năng tiêu diệt tế bào ung thư di căn

- Cắt tuyến giáp toàn bộ: Đây là phương pháp phẫu thuật phổ biến nhấtvới ung thư tuyến giáp thể nhú, mổ cắt toàn bộ tuyến giáp kết hợp với sinhthiết làm giải phẫu bệnh tức thì đối với hạch cổ 2 bên, từ kết quả đó kết hợpvới hình ảnh đại thể trong quá trình phẫu thuật để đưa ra quyết định là có nênhay không nên nạo vét hạch cổ, một bên hay hai bên Mặc dù cho kết quả rấttốt, tuy nhiên có nhiều nguy cơ tai biến, biến chứng trong và sau mổ, điều nàyđòi hỏi phẫu thuật viên phải có kinh ngiệm và tay nghề rất cao, hơn nữa sauđiều trị bệnh nhân phải dùng hormon tuyến giáp suốt đời

- Phẫu thuật ung thư tuyến giáp bằng kỹ thuật mới đó là kỹ thuật phẫuthuật hở bằng dao siêu âm thế hệ mới Focus Kỹ thuật này có ưu điểm là dùngsóng siêu âm để làm đông đặc các mạch máu, vừa cắt vừa cầm máu, ít gây tổnthương hoặc biến chứng các bộ phận xung quanh vết mổ Ngoài ra, sẽ rút

ngắn 50% thời gian phẫu thuật, giảm thời gian nằm viện của người bệnh từ 1tuần còn 2 ngày, giảm chi phí điều trị đáng kể.

1.1.7 Điều trị nội tiết

“Curling (1850) miêu tả hiện tượng suy giáp, Reverdin (1882) gây hộichứng nhược giáp thực nghiệm bằng cách cắt tuyến giáp toàn bộ, hội chứngnày được điều trị thành công bằng tinh chất tuyến giáp năm 1890 Năm 1914Kendall cô lập được hormon tuyến giáp (Thyroxine) được tổng hợp đầu tiênbởi Harrington và Barger năm 1927

Qua nhiều năm nghiên cứu đã chứng minh UTTG thể biệt hoá (nhú,nang) đáp ứng tốt với điều trị hormon: TSH là một hormon của tuyến yên cótác dụng kích thích sự phát triển của tế bào giáp lành và ác Dùng hormon T4

hoặc T3 liều cao (200 g) để ức chế sự tiết ra TSH của tuyến yên, do đó làmgiảm tỉ lệ tái phát tại chỗ và di căn xa Crile (1985) đã ghi nhận đây là mộtphương pháp điều trị hỗ trợ với mục đích ngăn ngừa tái phát sau mổ, mang lại

sự phục hồi tạm thời, đôi khi là lâu dài khi có các di căn.” [20]

1.1.8 Điều trị tia xạ

1.1.8.1 Đồng vị phóng xạ I 131 [21] [22]

I-131 (cone gọi là iod phóng xạ) là một đồng vị phóng xạ nhân tạo đượcsinh ra từ phản ứng phân hạch hạt nhân nguyên tử uranium hay plutonium, cótính dễ bay hơi, tính phóng xạ mạnh và thời gian bán hủy đến 8 ngày

Khi phân hủy, I131 sẽ phóng thích ra bức xạ ion hóa beta và sẽ tác độnglên các mô ở vùng tuyến giáp I131 có tính chất tương tự như iod thông thường,

dễ hòa tan trong nước nên chúng dễ dàng được hấp thu vào cơ thể thông quađường tiêu hóa thông qua chuỗi thức ăn hoặc hô hấp trực tiếp từ không khí

- Việc điều trị I131 là phương pháp cơ bản được chỉ định điều trị choUTTG thể biệt hóa nhằm mục đích:

+ Tiêu diệt phần mô giáp còn sót lại sau mổ

+ Bệnh nhân phẫu thuật không triệt căn hoặc tái phát tại chỗ.

+ Có di căn xa

+ Không có dấu hiệu tái phát trên lâm sàng mà có Thyroglobulin tăngsau mổ

- Tuy nhiên, trước khi xạ trị bệnh nhân bắt buộc phải được phẫu thuật cắt

bỏ toàn bộ tuyến giáp và nạo vét hạch, phải được chụp xạ hình toàn thân đểđánh giá mức độ lan tràn và di căn của bệnh Liều lượng điều trị, thời gianđiều trị phụ thuộc vào tình trạng sức khỏe người bệnh, giai đoạn bệnh vàbệnh nhân được ngừng điều trị bằng nội tiết 4 tuần để đảm bảo iod có thể tậpchung vào tế bào ung thư với nồng độ cao nhất

- Liều thường dùng:

+ Di căn hạch: 120 – 150 mCi I131 để hủy mô giáp và hạch di căn

+ Di căn xa: liều 150 – 250 mCi – 6 tháng sau nhắc lại cho đến khi sạchhết ổ di căn

+ Di căn xương: Điều trị bằng I131 kết hợp với xạ trị từ ngoài vào

Quy trình điều trị bằng I-131 khá đơn giản Bệnh nhân sau khi được chẩnđoán xác định và có chỉ định điều trị sẽ được uống I-131 dưới dạng dung dịchlỏng hoặc dưới dạng viên con nhộng Sau đó được trở về sinh hoạt tại gia đình

và có thể đi lại trên các phương tiên giao thông công cộng như xe buýt, taxi,tàu hoả

Nếu điều trị liều lên đến 1000mCi mà ổ di căn vẫn còn thì nên cân nhắc

kỹ việc điều trị tiếp Hiện có một số tác giả điều trị cho đến khi nào hết di cănmới thôi bằng việc tăng liều Tuy vậy, điều này còn phụ thuộc vào sức chịuđựng của người bệnh

Tác dụng phụ thường gặp nhất là nôn mửa (50% các trường hợp), xảy ravài giờ sau uống I131 (7-12h), tự ổn định trong vòng 24 – 36h Thay đổi vị giácxảy ra ngay vào ngày uống I131 , tự ổn định trong vòng 24-36h Viêm tuyến

mang tai (30% các trường hợp) xảy ra trong vòng 24h sau uống liều (100 150mCi), giảm dần trong vòng 7 ngày

-Nếu bệnh nhân điều trị liều cao có thể có những biến chứng: Ức chế tuỷxương hoặc ung thư thứ phát, nhưng rất hiếm khi xảy ra khi liều dưới 1000mCi.Tuy nhiên nếu biến chứng xảy ra của việc điều trị bằng I131 thì khá nặng

nề Trong những ngày đầu cần theo dõi tình trạng viêm nhiễm Đối với liềuthông thường thì không có biến chứng, song với liều từ 500 hoặc 600 mCiđến 1000 mCi đôi khi dẫn đến bệnh bạch cầu thứ phát Đối với việc điều trịliều cao, điều quan trọng là phải chú ý đến là việc ngắt quãng giữa các đợtđiều trị

Kết quả nghiên cứu của Tubiana và cộng sự (1985) so sánh giữa 2phương pháp có sử dụng I131 và không sử dụng I131 thấy tỉ lệ sống thêm khôngbệnh tương ứng là 80% và 73% sau 5 năm

- Do bản chất UTTG thể nhú có nhiều ổ và khả năng di căn hạch ngay từsớm, do vậy hầu hết các tác giả đều đồng ý nên điều trị I131 một cách thườngquy sau mổ cho thể loại ung thư này Đối với trường hợp ung thư có di căn xa(xương, phổi) thì I 131 vẫn đáp ứng rất tốt với điều trị, đặc biệt là loại có bắtiod phóng xạ Theo Maxon (1990), Sisson (1996): Tỉ lệ sống thêm 5 năm với

di căn xa có bắt iod là 60% so với 30% khối di căn không bắt iod

1.1.8.2 Xạ trị ngoài

- Xạ trị ngoài trong ung thư tuyến giáp thể biệt hoá nói chung là một vấn

đề còn nhiều tranh luận Phương pháp này ít được sử dụng ở đa số các trungtâm điều trị ung thư ở Mỹ Viện Goustave Roussy (Pháp) là một trong nhữngtrung tâm lớn có nhiều kinh nghiệm trong vấn đề này Theo nghiên cứu củaTubiana và Schlumberger (1985) cho thấy có hiệu quả trong việc kiểm soáttại vùng với UTTG thể biệt hoá Tỉ lệ tái phát là 43% sau phẫu thuật không

triệt để đơn thuần so với 16% phẫu thuật không triệt để có xạ trị và 19% sauphẫu thuật triệt để đơn thuần so với 9% kết hợp với xạ trị ngoài.

- Xạ trị ngoài là chỉ định không thể thiếu trong di căn xương nhưngkhông phẫu thuật được, hoặc di căn cột sống, hoặc nền sọ mà không bắt iodphóng xạ Chỉ định cho các trường hợp phẫu thuật không lấy hết được tổ chứcung thư, có nguy cơ tái phát, ung thư thể không biệt hoá hoặc phối hợp với

I131 để tăng hiệu quả của iod phóng xạ vì các u lớn khó kiểm soát đơn thuầnbằng I131, hoặc không thể phẫu thuật được Liều tia thường từ 50-60 Gy baogồm vùng tuyến giáp, hạch cổ và trung thất

1.1.9 Điều trị hoá chất

Hoá chất ít được áp dụng trong điều trị ung thư tuyến giáp vì hiệu quảkém, nhất là loại biệt hoá Thường dùng hoá chất kết hợp với xạ trị ngoàitrong điều trị ung thư thể không biệt hoá Loại hoá chất hay được sử dụng làDoxorubicin đơn thuần hoặc phối hợp với Cisplatin [4]

1.1.10 Điều trị ung thư giáp có di căn xa hoặc tái phát

Có di căn xa nhưng có thể cắt bỏ được nên tiến hành cắt tuyến giáp toàn

bộ kết hợp với điều trị hormon và I131 Hoá chất không có hiệu quả nhiều, chỉ

áp dụng khi mô di căn không bắt xạ Xạ trị ngoài thường áp dụng cho di cănxương Trường hợp di căn đơn độc, có thể phẫu thuật cắt bỏ khối u di căn

1.2.1 Con đường truyền tín hiệu MAPK

Chu trình tế bào gồm một chuỗi các sự kiện có trình tự dẫn tới sự phânbào, bắt đầu bằng việc tế bào mới hình thành và kết thúc bằng việc phân chia

tế bào mẹ thành hai tế bào con giống nhau [23] Đối các với sinh vật nhânchuẩn, chu kỳ tế bào phức tạp hơn so với các sinh vật nhân sơ và các giai

đoạn của chu kỳ tế bào (Hình 1) được kiểm soát bởi một bộ máy điều hòa

chặt chẽ, không chỉ điều phối các sự kiện khác nhau của chu trình tế bào màcòn liên kết chu trình tế bào với các tín hiệu ngoại bào bằng các con đườngtruyền tín hiệu nội bào để kiểm soát sự tăng sinh tế bào.

Hình 1.4: Các giai đoạn của chu trình tế bào [23]

Chu trình phân chia của hầu hết các tế bào nhân chuẩn được chia thành bốn pha: M, G1, S, và G2 Pha M (mitosis) thường đi kèm với sự phân chia tế bào chất S là khoảng thời gian mà quá trình sao chép DNA xảy ra Tế bào phát triển trong kì trung gian (interphase), bao gồm G1, S, và G2 Độ dài tương đối của các chu kỳ tế bào được trình bày ở đây là điển hình của chu trình tế bào ở động vật có vú.

Một trong những con đường truyền tín hiệu nội bào là con đường kinaseRAS – RAF – MEK – ERK – MAP (MAPK) đáp ứng với các tín hiệu ngoạibào như các yếu tố tăng trưởng, hormone, cytokines [24], có chức năng tế bàoquan trọng như tăng sinh, phát triển, biệt hóa, chết theo chương trình, và tạokhối u khi hoạt động bất thường [19] [25] [26] Nói cách khác, con đường nàychuyển tiếp tín hiệu ngoại bào đến nhân thông qua hoạt hóa chuỗi truyền tín

hiệu (Hình 1.5).

Hình 1.5: Con đường truyền tín hiệu MAPK

Con đường truyền tín hiệu MAPK được kích hoạt bởi các chất gắn là cáctín hiệu phân bào thông qua thụ thể tyrosine kinase trên màng tế bào (RTK) [19] [25] [27] Khi chất gắn gắn vào RTKs dẫn đến sự dimer hóa và sự tựphosphoryl hóa đặc hiệu đuôi tyrosine trong nội bào của thụ thể cho phépnhận biết các yếu tố xuôi dòng adaptor GRB2 và yếu tố trao đổi nucleotideGuanine – SOS và kích hoạt protein RAS bằng cách liên kết RAS với GTP(GTP – RAS) GTP – RAS tương tác và thúc đẩy hoạt động của họ proteinkinase RAF RAF trải qua một quá trình phức tạp để làm thay đổi cấu hìnhprotein và được hoạt hóa, sau đó phosphoryl hóa kích hoạt hai protein MEK:MEK1 và MEK2 MEK1/2 được hoạt hóa sẽ phosphoryl hóa và kích hoạt lầnlượt hai protein ERK: ERK1 và ERK2 ERK1/2 hoạt hóa sẽ phosphoryl hóacác phân tử protein điều hòa trong nhân, cuối cùng dẫn đến sự thay đổi biểu

hiện của nhiều gen khác nhau liên quan đến tăng sinh, tăng trưởng, tồn tại của

tế bào và phát triển khối u Kết quả làm thay đổi hoạt động sinh học của tếbào [19] [25] [26] [27]

1.2.2 BRAF trong con đường truyền tín hiệu

Ở động vật có vú, có ba loại protein RAF là: A-RAF, B-RAF và C-RAFđều có thể kích hoạt MEK nhưng thực hiện chức năng khác nhau trong cơ thể [25] Cả ba loại đều có chung ba vùng bảo thủ là: CR1 (domain gắn RAS(RBD) và domain giàu cysteine (CRD)), CR2 (domain điều hòa đầu N), CR3(domain xúc tác kinase đầu C) và một số vị trí điều hòa phosphoryl hóa khác

(Hình 3) [26] Trong các loại RAF – BRAF tồn tại nhiều nhất và là chất kích

hoạt mạnh nhất của con đường MAPK trong nhiều tế bào Do đó, BRAF cótầm quan trọng đặc biệt trong ung thư ở người, đặc biệt ở những bệnh cho

thấy tỷ lệ cao của đột biến BRAF [19]

Hình 1.6: Các vùng cấu trúc trên protein BRAF

CR1, CR2, CR3: các vùng bảo thủ của protein BRAF; RBD: vị trí tương tác với protein RAS; S429, T440, S365, D449, S446, T559, S602, S729: một

số vị trí axit amin điều hòa phosphoryl hóa trên protein BRAF

Ở người, gen BRAF nằm trên NST số 7 (7q34), gồm 21 exon mã hóa cho

protein kinase serine/threonine BRAF dài 766 axit amin - thành phần của con

đường truyền tín hiệu MAPK Đột biến trên gen BRAF liên quan đến một hội

chứng tim mạch với đặc điểm khiếm khuyết tim, chậm phát triển trí tuệ và

khuôn mặt đặc trưng Đột biến trên gen này cũng liên quan đến nhiều loại ung

thư như ung thư đại trực tràng, ung thư hắc tố da, ung thư phổi tế bào khôngnhỏ, ung thư biểu mô phổi, ung thư tuyến giáp thể nhú [28]