Bước đầu nghiên cứu các chất kìm hãm Tripxin của hạt mướp đắng (Momordica charauTial) :Luận án PTS. Sinh học: 1 05 10

Tripxin tgty bo kSt tinh duô d i ^ ch6 theo phuong p..ap cua Hllmor/Éfea-Pclo va iêjbadkatssenellenbaugen 2ri37^7 va Iripxio-êpterosa 48 do Vign înh ho© ^^roclaw, Ea lan t;>ng.. Oa©

Trang 1

m{ì^

>

Trang 2

"Jan bO hucag dSa Icixoa ligc :

Giac atp I» ^'^^^ ôm T14 Tran Ohau

"^(hucJng d ^ lupn an) H-j*HốT.r ^.-'•1 Jir^rs, Nguy& ^u3o Khang

ỷ?D V^n :.^ui

ixA mi - 19U5

Trang 3

Traog

1, m i?4Ù , ^ , , ^ t

2 :rt£jQ s:^i ì-Ài LiDu a

2,1» ^lii oirong iF% oao cìiSt k i a h «

protoinassa • • • • • • * , » , , ?

? , 1 , 1 i-}.oh ou puat h i f n irai p h ^ tj5

oua oao ^^1 • • • • * • « « • • • , • • « • • • • 2 2,1,i^ ^5u tapuo oua ©o© *^i1 3

2» 1,3 ìj^ Ijta oua ©4© J^^ 5

•^t^,* ^"ifnh djjo a i fu ©u9 ©-?© ^'^'I , 6

2 , 1 , 5 Oor ©hg te'© dyn,^ *iua oao <^1

vh ©a© proteinossa a a r i n • • • * * • • • 7

2^Ua Vai tt-o aluh l y oua oao ^ ' ^ • • • • 11

2»^, ^aa ooSt kl^a hlm tripaii.» oua ijg bSu bf )S

2»3 Jfog du^ng Olla o ' o ' ^ ^ 19

3 MfiU^^ hlMÌ VA aiUOilG i4iAP , , 22

p r o t e l n ì^kk^r nhaoUii puap khuSoift

%m tvfn dia t;i9ch co ori^a oor

oiifit p^X)t«»in t4ieo osi ti@ii oua Loluk va t|ip t h i • • • • • « • • • • • • • • 23 3*2.4» la'o dinh a o ? t d3 klm taan t r i p »

xlo 24

3 # 2 , J , Oifo di t r - u gel :>Jli i o r i l a ^ ^ t

( Ì A Q ) / , : > / , p*i i>,3 tiioo ;:to«nig po^p ouo ^ a v i s « ^4

Trang 4

3 , 2 , 7 , Aa© aìuh trpug lo^ug au^^ tu

oua oao chét klta n ^ t r i p x i n

b ^ phuiorag pimp sr^o Icy 190

gol qua o j t SephodtóE ^ / > , • ^ 5,2,<i^, Axiat/1 Aoa oa© cuo© aialn t ^ do

Oua oao ^i b5bg a*iMdrÌt axeti©

thoo pttumg phap ou« Uordan m

^ a l i ee • * ^ 1*2,9, iifu ohiuh dciSt klm hasa t r i p x i n

bhig trlpjGin thoo phuoms pi^ap oua «3©iie©iit<r- l è Borgor » • • • • • • ^

3«2/ia«i^QV oUiSt w t i o h ftQ^ chSt kla

haa t r i p x i o tu qua 1» h^t tsuc^p

4» ^ £ T ^*U^ I^siélILi JiJl

4, U ^ ^ i ^ t r a iiogit d^ k l a hrl^a tPli.xin oua

e«o &9t b&a bf tf9ng u Vi|^t a^ia , , « ?1

4«2, ^inh 09eb o h i t klm nam tripxlQ ohu ythi

ouo h ^ t mucfp d4ig • • •*• 31

4«2«i« Th^a do d i ^ kifo taob OJii@t«

t l n h ch8 o«o ^^ oua hgit ra^p dlag 31

4 , ^^2, ^^i trina t i n h a^oh onft klm han

r r i p ^ D oiuu y6u ©uà h ^ t muop d & g 3B

4#3, ^^^o t f a h ohSt o^a ^àGUJL^ ^ m^t vSi

t i o h ohfit Oua oao '^^ kaa© « , 91

4 3 » ^ , tinh d|Eo ulfu 51

4 , 1 , 3 ^ D5 WlQ w i n i l | t • , , 5^^

4 , 3 * 3 , ^adt aasia ^ tj trjf i% t t o n g

truaig t§m phan m&g • • • • • , • • • • • • • ^2

• • 3 , 4 , Tt^ng l u v a e pitóa t u H

Trang 5

VimuB

_, ? t « , ,

'*.,.'',^> -nh ìuxaig ©uà t.;cfi gian u

-iUa^lY Wi trlpjdn 1 ^ ho^t d^ kln oam ©uà no • • • • • • 'M

4 , 4 , S g i ì l ^ o&i au bi6a d§i protei», 1*1^

nSì bopt d} {Aldo g i a i protdLo o qua

« byt oijap d ^ g t?oug qua t r l n h

phat t r i n oua ©iiung • • • « , • • • ^

4 , * , i , ^ pùat tn^D oua qua va lì^t

mu5pd&8 ,

4 4 2 S^ bifn d^i hsm lu^ug protoin T^

4 4 3 , ^ir bl8u dU ^XA oO

Trang 6

1

-Vi^o n£i»»i^ ouu oao p r o t e l n klm h f e proteliiar^ (*'*'X)

dti(fo t i f o uanh ta@nh mo trong mAy ©hgio n >u ^Òn do^ m dang

ma 3?a nhung t r i ^ v^ng l»5a

oSo PPI l à T^t troug nìiSag y3u tS quan t r ^ n g k l m

t r a ayr iio^t d^ng cuo ©a© qua t r l a h p r o t x i l i r a t r o u g ccy

^ n g , vi viiy njAii'n ©l'ii co ©iie ta'© à:^a^ ©uà ©ÌÌ© Ì?*"! 1?^

©a© prot©ina«o tisang mig ©uà cìiuag kio ^c omng gop phSn

l à a aang to m5i qu'^u hf^ cJu tru© « o.iUo n^^g ©uà p r o t e l n

«à Mo giup ©himg t a h i ^ a dog© ban ©h^t ©un u M Ì ^ qua tx^^^h 86ng,

Tiiành tgru a ;.ii'''n ©i^ ©a'o i?!^! ©ho thfiy co tixcsu dyi>?;

I 0 9 Ì hiyp <?<x3t uny aì3u nhung dug?© l l ^ t i uifii l^^^o d^ oiiua ©a©

b^Qh l i ? n qu m dSn t z i ^ g tâl ho^t dâg khSng bluh tauûg

©uà ©ao eurim prò tool y t i e,

<&o d8a oay •vSa d'fe oao ^ ^ e? thy?o v^t 00 thujo oiioa chSt kii'mg *inh tochaé^ hay khSng v^n ohua ©0 nhung kfl"t l u p a

tì:riJng nhSt, ikm thS nua, I P 1 t r o ainh l y oua ©iuiag l e :!

ooug dang l à mQt tQu t ^ l fiaog t l a h tìKSi a^;? UiCu b i $ t dUy

du Ve l o o i hQTp ohSt oày l à ou acy dr ©a© n.ià ngtiirn ©mi ©o

t h i tpo r a aiiwng {^KJog o-ly tiOog dam bno !:R;?O adng, nJng

su*5t ©a© vk oaSt lugftig dlnh auotig t S t ,

aao l'i^l 00 a v t phé hlSn trong oQ 3 ci'^i:d5ng v 0 t ,

thu© v3t va vi alnh v^t» pii^n l<ro ©ao ^ ^ th^'c vj^t l à nhung

p r o t e l n co trpag luQfUg ph*^ fer tìiap, do <?o c.*ung dang l a

tì5l tu^fug thufftì I 7 I dh n:^rii^n euu mf t i § o ^ioa ©uà ainh "i^H a

m ?© ph5n t u ,

i^è ©o thè khai tha'o h6t tUt ©a niiihg t i " ^ nvng lem

l a o d o , vlfo t i 6 p t^to d i s3u n^^iiil^n ouu co© ^^^1 l ^ o'ìn

t u i f t

Trang 7

« 2 «

Thupt ngu p r o t e i n klm h^a proteinaga (*'^I) v'^ uguyftì ti© l à dang d^ ©iii liSt ky prò t e l a no© ©o kha n'ing làm g i a a

m^t ©a©h tiiuSn nghjoa jaogt d$ ©uà pTOtolaacp JT^^^*

ViÔ Oif^hl^n ouu ©a© ^^ ©ainh tmc dugro b^t d&u t u nr^m I93ìj k u i m iiûuits; va ^ôtrop da ta©h t«iành

o6ag ouSt klm ham t r l p x i o tu tu/Sn t y y JÌT'^SJZ, 6" th^po v^t

su oo mpt oua * ^ di.?grc t d o t vào n Im 13 "li / * ^ 1 3 ^ 7 ,

Oa'o bSng bC Vfe aou / " i o , 23, 7 3 , l U j ' ©ii© thày l o g !

hffp ©hot này r i t xio biSn trong tyr oiiifki,

Trof^ glod thy*© v ^ t , cs© n g i i ^ ©uu onu yéu tpp tinang

0 ©a'o d6± tugmg l à n{^TSh lucmg tìti^^o tii.y:o phàm oua ngu^l va

d^ng v$t niMir h^t ©a'© o^y thu3© oo d^u, h? àoa t h a o , hg ©à /"lObJ?^, va gBn djy iian l à hg bftu bf / " » , 4a, 105J7 ^ phong phu va da d^ng ©uà oao ^^1 iugo t h i hiftì agaytrong

©uug in§t l o à i , va ta|m ©rii^ o cung m§t ©cr quan, r f dyi -^bata

^ o$ng ay ÌT^^JJ **a taoh duy© 7 ©hfit klm hara ©uà t r i p x i a

va oua K i m o t r i p ^ n t u hot d^iu t ^ n g , ^u kììjai t^ ©o oauo i t nhàt 13 i ' i l thu3© ©a© Uiióm kua'o nhau C^^ì.J*^

Oa^ ^i?I oung duyo paa't xiifn a n.l'feu dpi d i ^ tnu§©

t a t ©a ©a© l ó p kiiao nhau oua glcri d§ng vgt C^^t ^^» ^'^^%

121, 130^7, l u y n a i & i , oa© ngiii^n ouu thuvng tgp trung o nhung ©cf quan oo ml't nuièu a:izlm p r o t e o l y t l © kuo© nhau nhu

trong mau C^^^% ^^1^7, tuyfa t ^ y / " ^ o ^ , l a o h / " t > 4 ^ 7 v , v ,

0* Vi s i n h vHt, oao ^'n ©ung i& dugr© ishat ulfn va

ug^.d^^D ouu t u ©a© dSi tucfng nhu ^©©ìiaromyGOs ©ere vi a t e o

C^^^J% ^«eurospora oraasa C^'^J » '^v* rf l a à l thu5© ©iii

Aotynotayoes jf*+o, ^ ^ ^ 7 , ^treptom^oaa Z"^**^» 3*1.7»

Trang 8

* 3 •

Syt vàng m^t ©io nallfeu dui d i ^ trong dauh mgio ©a'©

l o ài ©0 ©ìttw *'il © o l e ohu yéu io chua Sv^o d l ^ tira,

2^K^ a l u t3CUQ Qt>a ^QQ ^X^I

jtfflu hgt ©a© ^n duVo.biSt ùìsa co' trpng lugrng

jdilta tu tiiSp» ft khi vugt qua' a),ooo, aao ^^l tì4fo vgt ttaaòng ohua khoang 30-30 oxlt atnin vcd trjng lugng phan tu tìztmg

tmg t u 6,0^0 ^ 10.UO0 / * 1 5 , >o, >o, n b , 136J7, Tivòng h ^

©ao ^n 00 tiìpng l u ^ g phdSQ tu lem hcfn tuy it nhung vèn

du(?o thSy nhu a hpt oi5y keo C'^^J^ ^ aà chua j ^ i 0 4 j 7 va

m^t a5 ddi tu«ffig k.ia'o /T^^ 55, ó5 , 30, 110^7, Tuy n h l ^

©a© ^ ^ 00 tr^ng luqmg phàti tu lon hcm thu?5t)s l à ©a© o l i g t ^ o

trong do ©fio aionome oo tr^ng l u ^ g paM tu éuoi iw^uOo £"^^J7,

in bé naSt l à ©a© ^i ©.^a hg tìSu bi ^ f * ? , 75, 33, 103, lO^J^

va m^t ChSt klm hSm proteina ea <Hia huySt thanh /*125^7 voi

trong luwng putìn tu ichoang 3, KH), :^^-«iaor©globullo ( >•? -ì)

©uà hu^èt thanh ©o trpng lugug phai tu 72!>,OO0 £'^2^^ iS

^n lem r hfit 0 kho^i tSy oo agt ©hSt klm h ^ papain, trgng

lu^ng phaa tu OO.OUQ eUyy© xea l à ^^I lem ntifit <^9 gl<yi th;?o

vgt r^^'^j*

«

iiBu h i t cao ^ ^ d ^ l à nhung protoin dc^n ^^an, tuy

ohir-n o5ng oo'mgt d5 ^n ohm xaoarlt j f 9 9 , 106, 121^7 Hata

lugng adstoln ©uè oao *J?I thuotig rtft oe^o^tjo nen oai^u o%u

dlBCKiflt troag pn3n tu ©uQ ©hiSig/^*40j7,

Trong phao tu ©u^ o'io ^ ^ oo ai^t vung d^o bi^t tucmg

tcT© vai oa^t hay oiyt vài protoiuassa tiamg ung dugr© gpi l à

trung tSn phan ung oua ©h^t klm ham, G$© oxlt amln ©o vai

tro quan tr^ng txong trung t/ìa phan img dn^v© ky hi^u l à a a l t aroin ^^ va l i ? n kSt p e p t t t ti^cmg ung trong trung tgtai phan

ung 00 voi trS quyCtd^nh ìào^t tfnh uo ohe ©uà ^^n l a i i è n

k€t -i"^ - P^ - , LasoowÉki va ^©alook if^ 'J7 da ni:i8n thSy

rttog ©Su * iî*- •*•'-, - oua oao 'Î l à -^îgww ao^ ^^^^JU {X

l à m$t 3xlt aoiin nào do ©nua nnóm ^^d^ ©uQ l l * n kSt p e n t i t )

¥iKl ©a© ©iiflt klm ham kifflotrlpain t i à g5o ^^ hlnh nhu {t dgo

h i fu hcm, thuòng g^p l à Tyr, t^he, 4©t rjo^o Val Ci^J Trung

Trang 9

4

-t -t e phan img oua raj-t s5 ^^Î kua© ©unî da dô xa© djnh

nhung chua duc^© quan tm nhl'bu (bang 1 ) , ^ao Oi^nirnc^ nh^n

MSt tznmg tSm jàian ung ©uo oao ^ ^ •ttiu'cmg tfSng ©aoh thuy

p^bian ©ao ©hSt klm heb buog enrdni tucmg ung è pii thfip ( 2 , 5 - 4 , 0 ) ,

i Tnmg tdm phau mìg oua m^t aS ohSt uo ciiS

p r o t e l u a r » (the© l^ng k é t oua '^loharSaon 0 ^ 3 ) »

'^$U tUTOg <J^^I)

Khoai tSy (ohdt uo àtxi 1}

Khoai t a y (ohSt t?© chS I )

^lestoLflft -•''«la « ^er- ©o ve

Hagarsa •r^ya - ^ e r - Khoai tuy ( U a / I I b )

^ b i l i s d n «^let - Val Hreptomyoea a l b o g n i s o o l u s

Trang 10

5

-«au do taoh ©a© ph^n doga 14 PhSn ©at dh :mc dj.nh ©a% a z i t

«aio dfiu il vui dBu 0 %px ©ung /"35,110^7, lioii© ©ung ©o thè

Qh^ XQ oao a x i t atnin o vj t r i P-| trong t ^ n g t3in paan uog

blbg nhung nnucmi^ puap au dl|;n{^ ©a© uo'a chSt bao ray dpo

hi^a oa© aadt arilo này£"3iì, 107J7,

LaAowiki uà o^ng ogr ©0 u u l ^ th^ ng^loi tiiu vi chung

minh tSa quan trgug ©u© ©Bu ooptit -i^^-P^ - trong trung t %

phan ung oua ^ ^ , -i^iil nc^uigin tren oiiflt klm ham t r i n x i n

riunite tu dgu tt;tmg (KSIX) ( w i cSu ^^^^ 2I l à W ^ ^

-o 4 -o 3 • % •

I l e - ) oho thSy khi thay ^^rg bang Lys iiogt d^ kl® ham

tripxLn ©uà ehSt ur© ohS kh'ng bj toay dTii, con n5u thay Arg

l^og Trp t^^ proteln ziày I 9 Ì ©huyon tiiàtih olxSt klm ham ©un

Kimotripacin ^ " ^ ^ 7 , u,?û5?o l ^ i , ^-^Î vSi già nûy% ao^t t l n h \y^ ^ 4 nèu t a v t^6 H e bang a a , fêu, hsy Gly if"^^«7» Vif© 3 fj«i

a i

th?"^ ai^t gfl© (nhu I l e , ^la ^ ^ 0 Cfla)[ x ^ va© giua >^rg^ ife

H e ' ' * di t^o tii^uh d^ng 'aj»'^ « Glu^^^- Ilo"** da 1 ^ taSt

hoan to m ho^t t i u h uc ©h6 ©uà ^ này ve d&ng tuoi ©irmy^n no

tuftOh co oh3t t d t Oua tripaln i^^^J^ Bering ve l30hes©he

ColJ kiii tiSn aàah tiif o g h i ^ thay tu§ ^5© l^ys ^ trong

trung t ^ phan ung (-iiya «- '^la -») ©^a ©^igt u© ©hS kaiiorein

©u^ 47Ò b ^ g 3^t aff a x i t aniin kua'*© nhau cung tuu dutro* k@t

qua tucmg t u ,

Trong OS© ^i^I, m^t sS ©hi ©h<ra mvt trung t t e phan ung

vctìl mjt hOi?© vài proteioaga nhflt dj.nh / " 5 3 , 75, 9 3 , llj!^,

©uung duy© g9i l à ©a© ©hit u© ©h$ l!iu dcfn (single headed

i o h i b i t o r ) , Qa$t 98 k.iQ© l y l chi5a hai trung t3a phanung,

vi diji nhu ©a© caSt a*© oà€ tò d^u ng^^• C^^^J% <530 onSt uo

ohg tu d§u f'hiooolus oo©cineuo ^ 1 5 3 ^ 7 , t£ong do' m$t trung

tini phan limg w i t r i p a l n vS myt trung t^ oon I 3 Ì phan ung

w i Kiiiiotrip3cln ho^o ©a© ©aflt u© ©h5 tu dgìu lià lan C^^J?^

©h8t uo ohg ^>-J^X tu: dgu tjtrog C^'^JJ ctoa ? trung t3m phon

ung w i t r i p x i n , :^o ^^ nhu vjìy du^c gpi l à ca'c ©hSt u©

©h6 dSu kep (douba.© headed i n i i i b i t o r ) ,

3 , 1 3 uà bfen ^.Aa fiaa P H

aa© i'i?! to ra kha bftn vcd ©a© ta© ahon gOy biSn t^nb nhu n^ilpt d$, a x i t , oa© dMg mdi hi^ c o , , , v^ <^ ©a©

Trang 11

««"«^ Ùf*?i

m 6 ^

TI ©uà iagt d$ìi rftng i^m 4uy t r i ti^n 954 hojt d^ klm haai

•a^u kiii sgy 0 lOO^C^trong 2 ^ i J C^^'^Jt Mfn tuvng bfen

vcfi a u i f t ©àn thSy of ©a© i*i?I ©Ja knoai tSy £^'^J% ctiSt

uo Ohe tripxin Bowaan-iiirk tu d0u tuxmg C^'^^J "^ ©u^ <^lX-^y,

n h l ^ dffl tugrng k^ióc Z " 1 ' ^ J 7 ' / ^ G V y&i td gfiy bl5n t l n n protoia

kha© nhu a x i t , k i ^ , ©a© dung m^ii huu oa oung thSy i t àah

huong din uo»t d© klm ham cua ©a© ^^ C^^% *^^» ^ 3 , ^ 7 ^ 7 ,

vi vgy OiJLlèu ta'© già da l?ri ^ a g ca'o tino, chfift nà^ cÌo ^^

de l o o i DO ©30 proteln k.*^'c è g i a i doon dfiu oua qua' t r l n h

tinh oooh bSng oa'oh xu l y nhi^t, a x i t ho^o k i ^ C^'^t '^^t

*^t a5 ^^ con to rg b ^ uung di?5i tao d^ng ©uà n - i i ^

nrotelnaea kixa© nhau Cì'^t ^ O ^ ,

o0 di ©a© x'ii co &.i^o d§ Dfea nau vSy l à vJ trong phàa

tu cua ©uung tixir/iic ohuo naiiÈu cSu dinut&flt, phSn tu oo ©Su

tina© ©h^t yk fi^t © h ^ / " ^ ^ » ^ ^ 0 ^ 7

2.1.4 nafa aìio airn cu? gq'Q,£a

Qao ^^^ trong tv Oiàoii co thn dugo phlnt^ành 4

nhom ©id[nh d^a vào aoom proteinaea (phSn I09I the© Uartley, 1 3 ^ é

/*42j7) ma ©iiung klm han 1 do l a 1 ©a© ^'^ klm ham cao

pro-t ^ n a s a sarin (nhu pro-t r i p x i n , kimopro-tripxin, pro-trombin, p l a a m i n , ) ,

oao ^^l klm ham c^i© proteiuaca saaiThidrll (nhu bromelain,

papain, r i x i n « , ) , cao i^n klm ham cac protoinae© kim l o g i

va ©udì cung l à cao ^*^1 klm hSn cao prò teina M e x i t hay a 9*

pactyi inm pep:dn, rcsiin • , ) , ^r^tó^i^i?^

i3ho d6n nay 0I2I ce? oi;^ l à ^I co koa nUag klm hm tSt

-oa -oa© proteina so cua -oa 4 nnom da a8u, ^^-ó© -UE ©on 1^1 t h l

thfiy r'Sug, m^t off thè h l ^ tfnh d^© ij.pu hgp, ©ai klm han

m^t 1^1 en^lm ©ung m$t nnom, m^^t o5 fciiu© co th^ klm Inm

prò-telnaea thu^o mgt vài ax^om knao nhau,

Trong aS ©a© ^-1 do du»?© pha't lilC^ *ÙÌ!Ì ©Q© i l oniSm ty

Xp ©ao nh^t i^n d^ trinxln co' ixai l à ea^lm dlcu ( t a r g e t

on-sytao) ©uà ©hSt klm u ^ do «fii^o poat ìd.^ hay kh^ng v^n ©hua

Trang 12

- 7 •

ùmr% t o , OìJi b i 8 t r ^ g I 0 9 Ì chdt klm ìSm ^ 00 m^t r£!t

pì^B biSn trong tif^Uiiicn JC^^JI* ir*© ^^ v^y n h i ^ ohSt

klm hasn t r i p x i n vOn klm ham ©a'© ea&im k^^©, v i d\^ i^ ) I I ,

ngoàl klm ham t r i p x i n , con klm hSn p l a a n i n , klmotrlnxin

/ " i l 1^7, d^o b i ^ t l à uo' oon uc ohS c l o s t r i p a i n - m^t

aoelm vi aiuh v^t tuuy© uiiom picoteinassa a m f h l ^ l r i l / " ^ * ^ 7 Trong t i v ù n g hgp niriu vjy, ca'© caiTim tix\5 h a i ©ó th^ ©o' t i n h

d;>o hifu F^n 8i5a2 t r l p x i a nhu plajtniu, cSa nSu ©uung ©0

t f n h dyo iii^u kuuc t r i p x i n nhu k i a i o t r i p x l n , c l o s t r i p a i n t h l Ohi bj klm hàm ^ ^ ,

0 ©u kh"»! tay 00 m^^t p r o t e l n klm ham m9nh k a l i c r e i n

huyft thanh, ahLì^,r5 I g i t h - hl^n uogit tornii y&i nJi cac kall*»

or Gin Cua ©a© tayCn cung nlai vét cac protolnassa s e r i a kuao

nhu t r l p x i a , kluptrii^xin ià no l à i*^ dang r d t dugro quao

tr^m / * 1 0 6 _ 7

Oao a © i i ^ ©im t r r n 00© ^^1 ©uà proteluaRa a u o f h i d r i l

c^o thSy hlnh nhu chung co tfnh d^o hifia h^p hcm, v£ dy I o l e

va o&ng B^ JT ^"^^J/ **^©^ *2^'o *w cìgu Vi^^ja u n g a i d c l a t o oao

^^ klm ham dj^o hipu rapaio, klmopapaln "Z r i x i n Uijuing I g i

kh3ng àah hucmg g ì dgn brooieiain, ^*uy v^y, g^n d§y Ogara

irà mjt a8 ta'o îià kiâ© £'^'^J7 da taoh tSàsô t u dôh nuoi oSy

Streptomyoos taiiauecuais ii$t caSt klm ham p r o t o i u a s ^

aunfni-d r i l mai, H r e p i n ^^ vua kLn ham o a l p a i n , pepalo l e u t r i p x i n

Chi t i è t ^ tinh dgo hi0u Oua ©a© criSt klm ham protoinacQ

a x i t va ©a'c chSt klm ham protelnajsa kim lo©! dupo b i 5 t it hcm o a ^a© 'PI taoh dx;^o oua h a i nliom này i!f4o, 4Lì, b l ,

<37, lou, V i v ^ oi^ théy Oiiuug ohi klm ham m$t m± eu7.1m trong

cung m^t miom

^ ^ • 3 3g Qhft tao dung f^ir^e eao ^ I iA oao proteinayfl

3ao nghirn ouu osy ch6 to'o d^^mg fjiu*Q 0^0 ^**I va ©a'©

p r o t e i n a i A oua ©aung chu y?u t^p trung l e u ©a© ox^t klm hm

Trang 13

mB m

oua p3?oteinajj9 s e r t n , ma dJS© b i f t l à co'© ohflt klm ham

t r i p x i n va k i m o t r i p x i n ,

Fuai noi r^^ig LoAowiAtl l à ngt^fi oo oSng l a n uh^t

t r a n g n g u l ^ m\x này Theo itaekowgkl va mjt oS tao g i à

Z 34, 35, 7 2 , J5J7 t i à 3|^ t;^tmg tao giiio ©hfit u© che t r i p

-xin l è n t r i p x i n o /^^iai doon dftu l à tvxmg tyr nau tao dyng

oua m§t prò tea sa I t a ©a ah«lt ©u^ n o , ^rtlm se thày ph3n

ofeu p e p t i t —^^«i"- - trong trung tam aion img cua ©hfit klm

«y dSy, T l à t r i p x i n , I l à a i S t klm ham t r i p x i n , 0

l à phi?o chat t r l p x i a - '^I , I * l à d^ng h i ^ ohinh chSt klm

ham oo' ©lu p o p t i t t r o n g trung t ^ phan uiag do bJ ©ut d u t ,

v£ d\^ trong tri:?c^ng byp ohSt klm ham t r t p x i u Kunits t u d|u

t!i?cmg C^^J P^an mxz to© th*tth donn ^**"^^i ohiuh l à nhu saui

•^» Jwua o4

k h i hlnh thanh phiJO chSt giua t r i p x i n vS oLiSt klm ham ouQ

20 co ^r tpo t i J n h nhuo chSt t r m g gian a x y l - ^ r i m , ' d i 1 1 ^

k 6 t du^fo t h l e t iSp giua lom -^U cao sexln ho§t d§ng t r o u g phfin t u aisim IR3 niioo - ^ - ©uà g5o i.j trong ©liSt klm hatn

% phin l y piìu© ChSt 0 a© g i a i ^îong r a hoô l à Î ban I&u

Trang 14

9

-( I ) ho^o d^ng ul^u ohinh cua no -(-t*), ^>9ng hi|>u ohinh oung

co kha n ing k é t hyp vc?i t r i p x i n nhung djng h^o k é t hg'p l à

kha© voi Aging ban dSu, ^hxe vgy, 0 nhSng phuung di^n nào do

51 giSng uhu mjt 00 chtìt blnh thirè^ng oua t r i p x i n ^^i%u kha©

nhau duy uhflt 0 d ìy l à 0 pii trung tfnh piiuc driat giua easlm

va ©Cf chat (^' - S) phan l y nhanh do g i o ì phong san phim, con

piuafo ©hfit t i l p x i a - 3L i ^ i cUl phàa l y 0 ph thSp ^wm th8

n u e , t3© d^ phan l y phuc chSt SS trmg l è n khi pd t^ng ( t u

4 - 8 ) , oon phuc chÉt t r i p x i n - i'I t a l ri:iuVo l a i Vgy ©a'i g ì

da t^o n§n £v sai f^iao nà^ 7

iiubor va O'Jng ag?/*50j 51^7, R u l t o a n n va m^t sff ta©

g i à ka © C^'*^J dto g i a i thfoh rSng u g u y ^ nhan ohu y9u ngJài

tror agr phSn l y piiuc chSt t3*inxi.n-ri l à 0 ©h§ trong phSn

t u cu ©iaat l:duh tuuòng h a i dlu ©ad mdi 1 1 ^ k6t p o p t i t

vua loX eiiKim phan ©at t u l n g du^o entropy va agr quay t u do,

va ©iiinh 2 ygu t S này da thu© day au ph% 1 ^ Oon h ©a'©

Ti t h l i? diìu này I g i duy© /ìuy t r i 0 vj t r i d5i dlfa nhau

do flgr 00 m^t ©uà ©Su d l a u n f i t t ^ i vung ciiua trung tam oha»

ung, vi v^" phan img xe dl|©h ttieo huc??ig t i i i é t l § p I g i mffl

l i t n k è t ban dau Tuy vgy» già thuy6t nàj, a© t r a n ^ khSng

"^ìSx http dSi v0i cac oiiSt uo ch8 kh3ng ©hiìa ©Su d l e u n A t nhu e g l i n

0 d i a C^^^J h^y ca© ^X h j t d j i m?ch /"^*^3^7 GSn d^y,

Tiomok va iJowak C^'^tJ% ^i^l nchi^^n ouu ©Su tnao bg© h a i

©uO m^t aS ^^ th^y rSng tóHi ©gah ©Su -P^-P ^- trong trung

t t e phan i^g©ua ©hSt klm nam tdn t e i 2 soan ^ , Theo ©ao

tao g i à t u l ©.ilnh cn© xooiU R này de gSy ©an trcf kh5ng glan

©ho v i | ^ phSn l y phuc©h3t giÌ]Ja prò t e i n a pa va ©hSt klm ham

» #

©uO n o

Ladcows^i va o$ug agr £^^J oho th3y r^ng t y s5

\ a t / k m ^^^ t\:sxm^ ta© gii'Sia ©a© ^^1 vc?i proteinogia tiicmg

« g l à r S t cao, ^^ac ta© già da d^ xu^t au d^ng hf 00 này

nhu m^t ©hi ad d;;© trung ©ho cac p r o t e l n klm ham p r o t e i n a za

VSn d% 00 tgio tiiàah ':3a\so chfit axyl-onrim va day ©0'

phai l à m§t t r o n g nhung y?a t8 quy^t djjih no?t t i n h klm ham

Trang 15

« 10 «

hay khSng oho d6n nay v ^ ©bua duo^o ta5ng nhSt, Ryan va

oi5ng a p Z " l « , 35j7cung nixr F e i n s t e i u va m$t a5 tao g i à

k,iae /T^^JT da cxil ra raag ©a© dgn xu3t btìt uogt oua

t r i p x i n hay kimotri[ìXin, troug Jo' nuJm -Oxi ©^^ serin

ho^t d$ng da 14 beo vay via kSt ho^o ©]:i^t ©he voi ©a© ouàt

klm ham tucmg uug ti.eo ty 1 | mol: mol - yO dSu vgy,hwang

T^ Iiieoer 2 f 5 2 j 7 , bang ©a© d ^ l i 0 u okinn txch ddug vi

t>hong x9 da eiimig nioh du^o ai;r tgo t à n h phuc ch3t a x / L

-easlm troog tu3Gruej t a o giua JJ^Sll vc^ t r i p a t l n , ivét qua

tu'crag t ^ cuog duy^o th^y troog Uf-jui^ ouu oua i^oroi \é

Aoki C^^J trr^u a i é t klm han « -plaemin tao d^^ng l^xi

t r i p x i n V* plaamin

Hhi'&u t a o e i a kne'© / " 3 1 , 32^ 4 3 , 4b,97j7 ©i*o rnng

GV ti^img ta© giua '^I va t r i p x i n phy tliu$© vào myt vung

tiTong t a c tr^ti nhSn t u cuO cii3t klm han, t r o n g do co agr

tiian gl3 ©uà aijt tii? gfi© a x i t anain d^c b i ^ t , Phuo ©hdt

t r i p x i n - ^ ao dirp© làm bla b ^ g ©a'© l«^o o^ag iioa t r i ,

V^ct i o n , l^fo ky uin?©, Igr© hydrogeo,

j»^gl© dBu co' m^t vài y kl'4n con mgu thuSn VB ccr oh$

t a o dging giua cao '^n vai oao p r o t e i n a a e s e r i n nhu0|? noi

©hung ©a ©h§ ta© ^o^^ do I»aricowaki d^ xuSt v ^ du^© ung

h$ nhi%u hicm ©a,

Nàn 13<>0, Lasàcovvaki ve Kato C^^JJ ^^ * y ^ ©Su t r u c

©uO oao ^^^, ^à Cixu ySu l à ag? d^nh vj* ou3 ©a© cJìu d i s u n f i t

©ung nhu co che ta© dung ©uà oa© ohSt klux h ^ p r o t e i n a t a a e r i n

dà d\x^ r a mjt h0 thSng p n ^ logii ©a© p r o t o i n klm ham p r o

-t e i n a ssa aarin ^m 9 ÌQ nhu aau -t

1, ^ip OiiSt klm ham t r i p x i n i i u n i t s tuy&i t g y

2, % ohKt klm ham t r i p x i n dich t l S t tu^&i tuy (oa©

©hfit klm liam Ifa^al tu^en tyty),

3 , ÌÌ9 ou3t klm ham a u b t i l i z l n ©uà •-^treptomy©e8,

4« UQ ©hSt klm ham t r i p x i n Kuuit;; ©uo d||u tucmg,

5 , ii© chtft kltn ham Boimaan-J^irk oua dgu tucmg

Trang 16

« 11 «

à 19 c^fft klm ham I cua kiioai t a y

7 , **9 ©uSt klm h m H ©uQ knoai tOy

m hara t r i p x i n caa ''Boaria

9 "Ja'o OhSt kiui ham kiiSag tau^o o ^.i^ kv t r ^ ,

Trong ^ o-'o v ^ l , t r a oc.^-macroglo-jullu 00' ay*

kl8u klm hm d.1c b i p t / * " ^ ^ L 7 0(^> ' l à fT?vt d'^1 phSn

t u p r o t o i n duyc c^u tgo tu 4 t l * a dcn vi gi5ng nhau

rid li?^n k g t va 'xlm ham proteiuastì thujc b i t ky niióm

nào, ^ua t r l n h kim ham dugfc b i t dSu bang t a o d\>ng oua

p r a t e l n a s a If^i mQt t r o n g 4 t i ^ don vi cuQ «(3 '• ^ r l m

ae ttiuy phSn m^t l i g n k f t p e p t l t r S t na^ty vS± t n c dyng

Oua p r o t e i n a a a Két qua 1*> làm thay d4i oSu hlnh kh5ng

gian ©uà ok^ *^ va cnnim BQ bJ b^y 1^0 t r o n g phén tu cua

ciiflt klm hSa,

Sf^oài r*3, '^oohcache uè o^v-zIT^'^J da dfe o0p d&i mQt k l ^ klm ham néì, - "klèu klm hs-a t;»m tùUi* d i olii

m^t s5 / t 'i^I, rr.à l u e d&u tpo "^urc vc5i eariai, eau do phu©

này bJ ph3n l y , ho?t d^ eadLm luv© pjwio h M , ^a© IJ này dirgr© g9i l à ©a© ch?ìt klm ham t r i p x i n %m t i ^ l d^ ph4i

b l g t voi oa© ' I OD 00 ch^ tao dyng da dugr© nSu o tr&n, V:f dv hgt ki%u meoh 00' ©a h a i I 0 9 Ì i l m^ C'^^JJ*

Oho d8n nay, ngoài ©a© caMt klm h^^ p r o t e i n a «a ^ r i n ,

00 che ta© dune cua cno CiStklm ham ic—i^w-r^ìssMa prò t e i n a ssa

kim l o § l , a>icMi prò t e i n a ea ainTtiidril itì nziom prò t e i n a za

a x i t con i t dMrjo ughifn ©uu, vi v^y dOy oung l à m^t vSn

d% lem ©Sn duyc t i é p ty© làm aang to t r o a g tuong l a i ,

2,1,6 Yai trg fftafe 3.y ou^ oao ,^' ^

H h i ^ n^ul^a ouu eh:) tnSy cuuc nang sinh l y

cua oa© FPI 0 dOng v^t to r a l à dug'c k i x ? ^ dj.ch ©hac o h ^

h<m oa« Vjf du ^ 2 ^ *^® huySt theah duyc xem l à m^t bJ ph|t& t r a u g hp tii6ng bao ^ ©a t h è Oii^ug 1^1 ©a© qua t r l n h

phdn g i a i protoin vuyt qua muo blnh thumig thdng qua kha

Trang 17

• 12

n & g klm ham ©no protoinrisfi kiiao nhau oua DO ^ T ^ ^ - ^ J /

>.ìO ^ ^ cua b^ch ôn va ©uà :ịQch k i a hSa £V eli ©an

c'-iag ah» ẩ pnat t r i - ^ 00 c8p Oa«^ c^'© Ivi3i u /T^^J^* ^

tai8u h ^ t ©hSt uc cJè 0( j - p r o t e l n a s a cu© huyét thaan da

tyo ll'^a ictpi cU) ed© p r o t e i c a già du^^c rM^t pnong tu

cac booh oau d-^ ah^ìu pLian iiuj m3 l i e n k s t váoh paé aang

ve gSy n?n bfnh k:.l taung niu5i Z * ^ ^ - L 7

Vai t r o ouQ oao '-*n vi cinh v^t chua toh^^ du<?o d^

©2P U A - Ì ^ iay v^èj *iol»©r C^^J ®^^ ^VQ h ^ìacoharjmyoes

c e r e v i a i a e 00 a ^ t oc; ch8 k i l o t r a cao p^\)telnaca n j l bào

biiSnij qua oao ^'-^'I* j?roDg adm m « này tSn t e i 3 íJ?I, du/o

ky uifu l à I , I Va ^ cua 3 oiisd ^ píOtoolyti© tucmg

ung l à ^i, -^ va ^^ -roc^ Jo, prò teina sa » laui mSt hôt /^ Prt>k^*^i

t i ù h cua i- , pTObainasa B lam atat hogit tiiiii sua i • >^a A

va *^ ls?i làoB ttSt iioot tfnh cua ^^ % ri-^^ig prò teina za 0 l à

kudng «uh huung gì dSn I v^ I •

0* thyc vyt, viu d% cac ^ ^ glt? vni t r o gì troog ccf

i h i ai!© đu do di^© quan tam '1^ khoang noi ohy© n % c^n

day nhuug vln obii*a co njjung odu t r a lc*i^ bhoa dang, Uheo

^tyan C^'^^^^J (nz''^ji duyc xem l à d^xtif^ dftu ti:ong l i n h *vuo

U i > d ^ OUU này) J^ uiiuns dSn l i C u thu Ju^/c tLil cao i-^'l

tui^'C v^t CO tho tiiaca g i s va© 3 ohu© ú:lng aau :

1, D i ^ ùoo 090 qua t r f n h T^àn G I Q I p r o t e l n ngi s i n h ,

2, Lam n l : ^ g parotein dgp t r u

"" -^0 "^^ ce tii^ kLoi tao dong g.-^y bgnn va puá aogii c^^

o>c truiig va Tii fidnh v;it

V^ ©tjtuc ujug tii{2 nh3t thé^ r^ng tuy oa© - - I ©o mj^t

rft phS 'bièn t?otig 030 m3 thi^'© vgt nhisic t a o dgtng klm ham

oua ctiung iTn ôc prò t e i n a za cung ncuBn I g i mai t h i y 0

mgt vài dSi tuv*ng QÌÌU O m^t «d h g t tha$c ijp -lou thao Z***^,

'i0b^7p a l a ' cSy l i n h 1 Ins C^^J • V i dy d i l n nlnn nudt

Va voi t r o này l à e3n£S t r l n h af:ui^n cim cua % a i n ve

^ y a r C'^^% 113J7, Odf© t a o già da aitmg mloh duqm au t5n

Trang 18

• 13

-t 9 l m^-t h^ -thSng pzo-teina sa - ciifi-t klm ham 0 hgi-t oSy

rou diSp, troug do' co m$t protoinaasa giSng tripxin dugro

hojt uo'a tr©ng tuoi c^lan ngàn h^t da 131 kéo m§t H daog

g&ì vcrtL mjt protelnaBO k;:i9o, mh d© do g i a i phong

teinaza tiiu h a i , Iibzlm ducf© c i a i i^ĩag l a i l à m;t

pro-t ^ n a s ^ ©© kiio n l ^ puSn giai hispro-ton, pha va pro-tz-^ng pro-trial n^hl Oua nnllb aSo t h è ,

^ y ^ ^ t vfin d'è di'feu noa qua' t r l n h piilìn g i a i protoin

0 ti bào th(^ Y^t l à v6n d% tucmg d01 phi'o tgtp, Baumgart^

ner va O a r l ^ e ^ a C ^^J da tach dugr© tu l a m!ìm hot dpu xanh oay mlm m$t ©iidt klm loSea endopeptidasaa ©hu yéu ©uà

ao, va mgo d^u k^l nay t&&a hoQt d^ pufta g i a i protoin t ing

leu ro r f t , dS5ng thcl t 9 l 00' a^ giatn cua hogt d% klm hSft

proteinasd, nhcmg ©a© d ^ l i { ^ 1^ agr d^nh vi cua oh5t klm

ham va endcpeptidasa nà^ o^io paep tao già k é t lugn l à

©;JJt klm haia này ]^ì5&g dl"^ ìToa hogit d$ ©uà endopef>titeea

da nSu* 1^0 00 thl^ giù o^x^o nang bao '^ t é bào ©hdt ka©i

# t ff # f # «

tao dyng phSn g i a i cua cao proteina e» dxxgo g i a i phong tu

©a© thè proteln,

Ohuo a^Qg dgt t3?u dutr© d% xu^t t r ^ 00 $0 tfnh plié

blQn ©ung nhu iiàm lugrng ©ao oua ©ao ^ ^ trong ©a© md du

t r u Vi dy 0 hot m5t a5 cày hoa thao C^^J% ^ ©u khoai t?3y C'^^'^J iiàm l u ^ g ©ao i*^ Ifni t u i 5 - 101 proteln hàa tao* ^ d^nh vt oua oa© ^ ^ trong ©a© thè proteln C^^%

100, loĩ, 1 1 3 ^ l à QKf acr thu iial ©no ©au© nung này .*un thS

t^% qua t r l n h tioh luy ©a© ^n xl^r 3ra óng w'i au 1^1©^^

luy oao otAt du tru k.^aot taag l^n theo au o^iln oua h^t

^ 7 , B, 9 , ầ, 3 9 ^ , Rat o h i ^ tao già C^t 33» ^^t ^ 2 , , J ^

©ho thSy i:i09t d^ hay hàm lugng ©uà ^^n 0 hjit giam xdSng

trong qua t r l n h nèy mAm, d i ^ tu^ng này 00 th^* l l 6 n quan

din vi?© ^h&vk g i à i ©ao ^n d^ ©ung ©fip nJng lujfug, n g u y ^

l i 6 u oho qua t r l n h nay ttltm oaa h ^ t , Tan-ì^'il^n va ©$ng egr

JT'^^iJ oiio r ^ agp pnSn g i o ì ©hSt klm ham iiowman-iHric

©hua a u i ^ ©l^u disunfit cf h^t dgu tucmg n^y m&m 00 thA l à

d i oung ©Sp luu huynh bé mmg ouo m^t 98 proteln du tru

afluV) luu huynh kao© nhu g l i x i n i n , oon/^lxinln

Trang 19

« 14 «*

^^ loài r a , ngJbt ta ©on i^h^t uif-n l^^y t r l n h tgr

axit amln giSng nhau giua ^'^^ va ca© protein dgr tru nhu

gitja ©iiSt klm uam uoi ouu© n ing ©àa ^amylaBa va t r i p

-xin o hgt doi m^oh vói protein iyr tru giSu Kl*A^aila cua

hot thfiu dSu C'^'^J va protein ©uà hgjt ©ai dSu C^J^

Oiiu^ nJng bao vf du^fo oiiung minh ro ràng nhSt

troog ©a© ©dng t r l n h oua Ryan w o^ng agp /*3ti, 39, M3,

114, 132J7 ^ao ta© già thSy rSng C3© l a kiiool tSy va cà

cuna k«.i bi tén tLiutmg bòi ta© dyng oo h^© h*^^ do bo

oauh ©ung 'i^olor^do dà tioh luy nhanh ohoug m»t lugmg ira

cad i^H Ja© ©h3t này, taeo ©a© ta© già ae u^an irty nf

tén ©3ng ©uà ©on trung tn^ng qua t'X© dgtng klm hàm ©uà

©iiung d5i vai cu© ennim p^oteolytio t i ^ ^^a ©uà ©a© ©cr the này, % goy tén thuxmg ohu v@y» triiU© hét dà t:foh

luy ySu td ©aim ì^.g ainh téng h^P chdt kioi h ^ proteina «a (?PIi.) va aau do' ©a© y& t6 này I 9 Ì glìy ©am img ainh

tSog htfp ^l^^jQ ma iioa ©ho sgr léng h^rp ^i^l iian the nua,

©g© tao già da taoh dugf© ^ H F tu n.-i%u l o à ì thuvo ©a©

hip Ihi/© i ^ t kuj^o nhau va da xa© dj.nh dug^© ban cudt ©uà

©hung l à ^'© p o l i x a o a r i t , co thè l à mOt phBn ©ùa thanh

tft bà©,

Oiiix© nSng beo vC^ ©a th^ MU du?o m^ rQng hun khi

ma osoloV if" 12^7 va m§t s6 ta© già kra© i f ^ l , ^'^J phat

iJLfn thSy m^t a5 i^i^ thgro vgt klm h^^m proteinaca vi ainh

vjit, eia© ta© già oliO r^og eao ^ ^ này 00 ta© d^ng klm

ham agf {^a&t trién ©uà vi d.nh vgt gay bfnh B^© bif^t,

Mwmg va Xaog Z*^3j7, ©ung nhu ^dlaon C^^J ©^0 * ^ y

©0 flg; i^iai poong ca© '^1 va 0^0 ©iìfit klm ham kimotripxin

tu hot Oua o h i ^ l o à i d ^ trong qua t r l n h nay m9m ^ao

tao già o.io rìcig agr g i a i phong oao ^ ^ này vij?a d^ klm ham

©a© vi ainh v@t gSy b^nh nhà ta© d^^ng uo che ©a© p r o t e i

-aaM ogo^i bào ©uà vi sinh vj^t ©o h^i ixra k:fch tai'oh ©ao

t h l o9a8 aiah 00 I17Ì,

vdi nhung k6t qua ughirn m^ da d^t du^o 0 tvtn cxiung

Trang 20

15

-t a 00 -t-ti^ -thSy r^ng -tuy v3u d^ chu© n Ing sdnh l y oua ©a©

f^I thuc vgt da dugfc nghirn ©im 0 n h i ^ go© d$ k.iao nhau

nhung dSy v ^ l à lo^t tOn t o i lem ©l'in phai dugrc g i a i quySt

^•2« 9ÌQ nfìnit ItJB aHa t r t 7 ^ B aula aa \^» tei

Cao H h9 bftu bi tuy mal duv© piiat iiifn tu nlm 19^0

b ^ Polanowflki, ''^iluaB/" 105^7, hodlma \Q o§ng agp/"4bJ7

Q^iung dang dành du^o 9f quan tam d^© b i ^ t ,

Tfnh dSn nay da tinh aginh du?© khồng >o TI tu h9t bBu uf thuv© 3 ©Ili I Ou©uais, ^u©urblta va M©mordi©a

jf*13:?^ Ja© i l ©hu y6u ©uà ©a© hot này ©hua khồng 3

-32 oxlt amln, vui trjng lugrtig oi^a tu khO(^:Jg 3<X>0«2700

va dô xam l à náng ^^l 00 trong lugng p n ^ tu be nhdt trong s6 oao î'I da dui?© b i é t , "ûy nulo.:, Phom Tr3n OhSu

va t$p thè 2 r i ^ 3 j 7 da ta©h dcs^'o tu h§t Ouourbita pepo var,

p a t i a » n i n a (OJT^r) m;t JI 00 tro^g lacmg r>hùn tu TiiOO d*

hgt ^©urbita pepo va , îromâtia (OiÔ) ©ung 00 mjt ^

vĩi trong lugmg ph3n t i vào khoang 3.0Qu ^ 12.500 C^^J^

)a'c l'I ©o' tr^ng lugng phte tu nho> (g^l t ^ t l à ^o,2i>0^ omR3 3 ©au d i a u n f i t , phSo tir 00^ ©Su truo ©h^t, rflt b^o

vui ©a© ta'© nhSi giìy blSn t i i h nhu nhij^t d^, a x i t , vS

ta© dyng ©uà mjt aff protelnaaa kua© nhau if"75, 9 4 ^ Tinh

©hit tryng luagmg plite tu thdp, bte vtTl a x i t l à 07 ao d&

©no hSu hSt ©a'© tao gi^ / * l , 75, 33, 103, 105J7 ax d^ng

d;m axetat ©0' pii a x i t de ©uiét iwt ©Q© ^^ tu hpt bBu bf,

vi ohu v^y ae vù'O ©ĩ ui^u auflt ohiSt H ©ao, vira k i t tua dusr© ©a© proteiu tr^ng lu^ng phSn tu lom kh3ng song mu5n

k^a©

Ca© nghirn ouu / ^ 5 , 33, 1 0 3 ^ ©ho thSy oao 5!l ©uà

hyt bHiu bl co pil dàog dl|B (p^j^) a ^ o vung a x i t y@u hc^ì©

gltt trung tdfnh, vi v^y khi tiSn uaah t i n h agoh qua o$t

ị a t i o n i t tiiu-ong m d«ng dung d},Qhd£|^ 00 p^ 3,) v^ oho

k8t qua t 5 t , l'uy nhicn Léluk va t j p thè Z"'i^5j7 oung da

Trang 21

/'

• 16

-taoh du^fo m^t ^13200 ^ *^^*^ ki^ cao (ph^ » a , 3 ) t*»:

hfit ^^ucurbita popò v ^^t ^^!Lromontia • ?uom 'ftrtto OhSu va

t i p t h l Z"^"^^» 1*^3J7 ©iSag tim thSy troag hot ^^^ oung

nhu tTOng hgit alaron ©uà h^tu^jp mjt 5.1 ©o' tjfnh kilÈm w i

d9 di d$ag difn di tuung %$ i?I k l ^ ti'nh (te nói 0 tr»"n

3a'© -i^ h©t b?lu bi' t h l hlgn t i n h d^ic hifu tu'cmg ddi hfi^f ©hung kii9ng klm ham a-kimotripxin, k a l i n r e i n ,

aubtilopeptidajsa A va mgt a0 ore teina sa kha'©, nhung l ^ i u© ©he anelm gidns tripxin ©uà oii8 ph9a pronajga Z " 1 0 3 ^ ,

D i ^ rSt dang quan tàa l à hojima va t^Jp ttié if+«, ^ ^ 7

l o i phat 1*1 ^n tioSy ©a© I l cua hpt Cucurbita maxima co

kha n ing klm ham y6u tS ^ l a oàa qua tjrlnh d5ng ma'u

Leluk vk t%o thè C^^J Ig'l dung tfnh ©hit dg© hi^u ©uà

I l h%t bBu bf dà taoh tìiành ©8ng en^Lm gidng tripxin tu

dj©h noSi cSy ©ùa ^treptojiycea griceua tóng phucmg phap

38© ky a l \\^ qua o^t g& H ©uà hgt 0?0 t r ^ 3epharo«a

4JLi 1)5 bte lun, t3?ong lut/ng ph3n tu tìiSp, ti'nh dgo U l ^

tiicm^ dBt hpp <^a oao ^ h%t b8u wf l à nhung co acf t 5 t

oho 9if© au dycig o^ung làm ©ii^ft gan trong s^o ky a l Igr©

d% tinh ^©h tripxin va ca© enrim tuxjug tu tripxin vi se

tranh du.© sgr biSo tfioh va I p i ©ho phep I09Ì du^© nid.^ pròteinaea khSog moug mudn,

Trong thành i ^ n a x i t amln oua cn© '^'I hg bBu l i

thii0ng tiii&i I r p , llie, r r e , ^JBJI lem ©a© Xl c^a hg này,

ké ©a ©a'o I I tooh tu l a mSm oua hot nay «Sm C^* 135J7

d ^ ©hua hya (? vj t r i X^, tron;^ trung t ^ pìinn ung Tuy

»$y» oae W oua h f t i^tomordioa renana JT^J va cuo h^it

«taourblta awaiao / " 7 5 j 7 I j i otiua ©Bu «^.j-i?^- l à

—^rg*-Ile-'i^^Z ^ ^^ ^^'^ ^^ **9* 0u-*4aralfl sativus ©hu«s a x i t a'nin 0 vj

t r f F icja© nhau t o' 03Ll-JIb c5© i^j l à r.ya, ©Sn 0

^»i^l-I V i è A ^

Kfit qua piirto tf©h t t l n h tgr aadt amln ©uà 10 Ti tiiu^a

3 ©hi *u©fflordl©a, Cfuourbita va OuoumlB iT^^^J oho thfiy

©hwg ©o ©Su t n i c b^c nhSt k.ia gi5ng nuau, "y-ong ©a© I l

Trang 22

• 17

-©hua 32 a x i t amin (aiai-IV ©uà h^t -u©urblta ^nnaìma""^

OPTUV ©uà hQit Cucurbita pepo) l à dai hcm ©a© i l ©òn

I9I m$t doon 3 a x i t amln (hii>.Glu-aia-) ^^ ph£a <au IK

^k} oQ© 'ì-l tijìh a^oh duy© tu' l ^ t bSu h{ 00 trjng lu^ng

plàin tu thSp ciio Io' ©a© tao gin dU u,:jh^ ràng 00' th^ do'

l à son phIm ©uà qua' t r l n h prò tooll za trong hgt hog© trong quo txlnh Chiét r u t , t i n h agoh ci*ung, ^h^m T r ^ Jhau va

tgp thè C^^'^J da ai dung a x i t peolori© (0,15 li) dh

©iiiét r u t I I tu hot Oi'i*, két qua ahSJ duy© ©ho phep ©a'©

ta© già l o o i tru k^ià naog ©a© Tj p^^^n t u bé này l à san

pbla <xia qua t r l n h proteolisa g i a i hgn x ^ ra troog qua'

t r l n h o-uiSt nTt,

%a t r ^ h0 thSog p h ^ l o o i do Ladkowj^i va Kato

d% xuSt nam 19^0 £^0j^ Laskov/^:i Wiiugs va tgp tìx^

/ " 1 3 5 , HlJ)^ da x5p ©a© i'I ©ija hot bQu h£ va© mjt hQ mifl

©uà protein klm barn protcdnassa s e r i n ,

i^Copil vif?o UtT-il^'Q ouu tinh apou, xao djnh tltih ohSt

©ung da ©o m)t ad oSng t r l n h / f i , 3 , 7o, 99j7 bat ^a Sb

©lOP d8n qua t i l n h t£oh luyt tlm xiièu i ^ l tro ainh l y ©àa

©a© ^3200 ^ Qia^g ©3y bBu b i , fh§m 'irèa Oh8u, ^eluk va mjt aff t>3© già k**a© 2f"l» 7«i^7 thfiy ring 11091 ^ ^^ iwi

t r i p x i n C^l^^) 0 l a rafia ©uà iogt 3^i? ©ung nhu h^t Oi'O va

tmt ^Juourbita pepo Y3r, Jlypeata (OKì) t Jng l6n o g i a i

d o ^ d!&u oua qua' t2*Lnh n^y mSm, sau do' f^iam xu5ng ro r ^ t

0 ngày tau 1^ trty d i , Oa'© ta© già ©uo rnng su t4ng H^ì 00

liil do 0^0 II dU5?o g i à i phong khol phu© ©hfit vJi proteionssa

tucmg ung khi h^t du?© trutmg nua©, ho;^© do d\zfo g i à i paong

tu ©a© thh protoin, V i ^ chat ai^ dugrc ©a© -^I trong ©a© th^' protein ©uà hgt OPP / " l O O ^ éa ung hg ©uo già thuySt tuu h a i , tJQng tuoi 1 ^ ag? giaca H ^ 0 l a ml^, ©a© ta© già

t h i y ©0 sgf xutft hi^n ©uà oa© '^ trong rS dSm va th-ln m&m,

B&ng ©a© din l i ^ pu^jn ti'nh ©Su truc v^ d&ng vj r^iong 3I9

ThfB Tipto Ohfiu C^^J **a ©uimg ^-^ ^ l ^ ^ i ' ' ^ ^^'"^ ^'^Q- *^ ^ * ^ ^ mlNa iè rS irika hoàn toàn ki^a'© vai ia© -T'a ii9t~T:!I?*'qung nhu

u l a tram, va oo thr> ©iuaog mca duaJ tong luyp, ~ |É

J f *^ J * *iiJi.'fiJ «.ti*S

Trang 23

-Vc?i mv© d/oh tlm alAu mSi l i f n quon :^iua ©a© i l 0 hvt VB ca© protciu^©o ^'I^^ 0 qua Pngm Trfln )hàu va t^p

t h A / " l o i , 102J7 da taoh ©hiet va ngiiiSn ©mi mjt ad ti^nh

OhSt ©uà ©a© I l tó qua Q^^ va 0^0 ]?roag 08 cá© -^I taoh

dugr© thfly m^t g5 ©ó trpng luyng ph%i tu khoang 3^00, cr*Ot

aS k^ioo khoang àpoo, va c^ m5i lool qua trSn dfeu ©ma m$t

n ©ó trpug lugmg ph3n tu 21.000 ( H ^ J O ^ ^ Q ) , Kho© vr?'l tSt

00 I I ta©h djyo tu hgt, c^o I I ou® qua Ci^ỉ va CFC d ^

ohua Atg ó vi tr£ * | troog trung tao nhan ung H^iooo

Qua qua Ot^^ n^-oài tripxin ©àn klm ham koll©rein,

aubtt-lopeptidauEi 4, ' ^ tren nhuog sai klis'o 1^ t*.*ah ::shSn

a x i t amin, s5 cBu d i a u n f i t , tinh d^o hipu enplm v , v , ,

©a© ta© già da kSt lujn r^ng ©a© "^l 00 trpng lugfng phSn

tu lem tu quo kh3ng phai l à cii5t t l ^ th3n oua ©a© H 0

h9t,

P h ^ Tran Ohau C^^J làngiol dSu tl?B ncui^n ©ira

• agp bi&i d4i ©uQ on© ^l 0 ât bBu bi dang phat t r l ^ , Tá©

già do phát n i ^ du^o su xudt nifa va biSn d^l ©uà 2 Ti

vc?i K^ t 0,7 va *|0 trong hot CPP «©ng piiót t r i è n , Trong

dó I I ^^ 1,0 xuSt jol^n 0 hgt ©on non, nau do thSy s^ xu3t

i i l ^ oua I I Sj 0^7, dSng tiiyi 00 ẩ giàa dSo ©uà I I ^^1,0

% bl8a d^ì nay thè i J ^ mgnh me vào kiioang git^a ©hu ky

phat t r l ^ Olla hgit, Khi e© sonh -^ I l này ^ -'^I 0 hgt khS

ta© già 0**0 thSy H ^j, 0,7 o hgit phat trioo tuung ung v5i

I I ohu ;/&a ©uO Iigt kh8 l à OPPTI-I ©o trpug lusgr^ig piiSa tiJ 3.200 I ©in I I ^« ifO tucmg ung vc^ OPMi-II ©©' trpng lu^fng phan tu 7.300 va olii 00 mjt liggfng nho troug h^t kh3 Tao

fila ©uog da phat j^ifìa du^o m^t pra teina gsa nh^y vc?i ^^^^ -iôt d§ng t5itlf©h h piì 6,5 trong hpt OPP dang phat t r i i ^ I>11bu

quan t:r9ng va tiui vi l à tao g i a t l>^t}g ©a taf n g ^ i ^ in vivo

1 & in vitro drx oliung minh du^o r^ng proteinata mioy v^i

^ i nùa n*\i trOn tban già trOQ£: quá trf.nh ohuy^n hóa oua

Trang 24

- 19 •

Mu b l , ©uS oao prò teina «a h^t oua h© này t^o già ©bo

rhig agr bi6n d^i nhu v^y co' thP nnjm mgi© di'©h tang ©^.cmg

uipu qua klm h ^ va co' thè l i o n qu^n d^ kha n sng hon

ohS qua ti^nh proteoliasa ktd hgt buao vào g i a i doga ©Ixln,

•^* slam xiOQt d9 pbdft g i a i protein cf p i ^,5 va au

t ^ g d&o oua hogt dO aà^ cf prf 4,5 kai hgt Oiln gyi y ta'o già né^i dte kha n ing t©© phi'o giua Qf^TJLJi vai proteinasa nho^ ^^^m ^a hai a l i * tuffng già t*iuy6t vuQ nSu CCèsa ao'i

I t o vai t r a d i ^ hoaho?* «l^ phSn Gioì protein oua I I o

h^t CPP

Ph^m Tygn ChSu con c:*o r?kig aif xuSt lilf^n an;»t d3

phito g i a i proteln cy ph 4,5 u hgt ©iln co Hkf ào xult

hifo proteinaea a x i t nhu da thfiy o hot Ououmis sativus

j^13B^7 ^^a ti^n oc sor pepxin (m;t protolaasa aadt) co kha

a ^ phUn g i a i ©a© H hg bSku Id / " 3 4 j ^ , ta© già già t^^lét

irlbig a^ xufit h i ^ proteinasa e x i t (nài co') se làm ctu©

nHng g i a i piiong proteinassa khoi phuc ©i^iSt vc?i di3t klm

iiam, phSn g i a i cao I I d^ ©ung odp ning lu^tig, ni^y@n 1 1 ^ oho h^t kiii no buc/c va© g i a i dopa n§y m&a*

«

Ij^hln chung l « i oo t h l thfly rSng chuc nung ninh l y

oua ©a© I l Cf h9 b&u bi cung nhu oa© ^PI kuo© ©uà thyc v^t

dang l à v6n dh c ^ phai dU7© làm song to» B^ aifu duqfo

vai t r o oua cao - i l tiil di'èu tn«5o h é t piinl g i à i quy§t io'

l à su tfoh luy vQ tra© d9i oua ©hung è th^ v^t,

2«3 ^ag «laag a k oao ^""^^

Co© qua t r l n h prò t eoi issa dong vai t3>S cala khoa trong lAu h€t hogt dOng ssflng ©uà tS bào va ©uà ©e? thè, vl v|y

ngi*i?n ©uu ca© '^n kà^ng ni^^he se làm saas to m5l quan h^

giua ©6u truc va c^u?c n"ng ©uà protoin aà con giup caung

ta hléu du^c bancuSt oua n i i l ^ iiogit djng affng,

'^ng nhu n h l ^ protein krxa'c, ©a© ^-I l à oong ©u tn?^

iiifn ca© thong t i n di t r u ^ ^ ouQ O0 thf^ aSng, do do phan

t^'oh ©Su tru© ©uo oao ^K se go'p palin idra dugro mSi quan

Trang 25

« 30 «

hg hg liàng uà t i Su iioa ©uà ainh g i o ì , ikm thS nua, ca©

^PI l à nhung protein co trong luvng ph.^ tu nho, co

m^t 9hé bi&a trong tu nni^n vi vSy oiiung daag l à niu^g d5i tLagmg tiiu0n l«^i va disyc quan tSm trong ng^ii^n ouu

tiSn no'a /*70, lOò, l a i , 122^7,

Trong ©a© phong t u i n g h i ^ ©o' thè ai? dyng ©a©

PPI làm ©hSt g ^ d^Sc hifu sinh hpc dh tinh s^oh ca'c

prò teina sso kne© nhau theo ncuyr^n tao sa© ky a'i Igro

^^0 dSiu vSn d% ©a© ^n ©ó i-^ei l à nhung chSt kiia'ng dloh daSag hay khSng y^ ©hua ©o g i a i dap th6ng nhSt / ^ 2 ,

9 6 ^ , nhung n6u oa© ^^^ ©o voi tro d i ^ ^ioo ©ae qua

t r l n h phSn g i a i protein n^i sinh, làm protein dg» t r u ,

beo v^ tii^o T.^t t a l ro ràug hi?>u biSt dSy du ve ©a'c

^n se giup ©ho ©a© niia n ^ i ^ ouu toc d)uvo nhumg igiSng

©ay txOng ba© dam co ^luo stfng t 5 t , co chfit lugmg dinh duomg ©ao,

Tuy VÈJ9 co' thS kiisng djnh r ^ t i ^ nóng ung dging

©uà ©a© PPI troug y hpc ae l à lem niiSt, Vi uang l o j t

b^ìh ( v i ^ t^j9 ©hay ma'u, khjC thung ph3i, d| ung ^

1 1 ^ quan tn^ ti6p dfo sgr ho^t d^ng kh5ng blnh thi»mg

oua ©a© proteina ad Nghi*n ouu oao ^PI ^ giup su dyng

© ung nhu nhung &rgm phhi sinh h^c d^ dlTsu tr^ cac bf»nh

t9èa ij u'ùi ta (aing d© ^^hX d6n vlfo ^ n g chSt klm ham

aorosln n ^ mjt cong oyt tranh thy t h a i , pa^ tu tbBng qua ta© dgtng klm hm kha n-,'ng phSn g i a i ti ìÀo tmxng cua no d5i vui easl» này C^^£^*

Kha 0 ^ mg d ^ g Qua ©a© ""^I li^gr© v^t tronc y UQC

àhxm du</o quan tèa» nhung g^n d3y, vl|)0 phat hi^n ro ca©

TI ho bSu bl vc^ nhung tfuh ohSt d^o b i f t i tnjag l»?vng

ph3n tu r a t nho, lifen vSt ahi"^ tao nhSn gOy bi3a t i n h ,

00 kha n'ittg klm ham yéu ttf -^la suo tao oiiO puan un^ d9u ti?n oua qua' t r l n h d6ng ma'u dang me? ra m?t ttl'^n vyng

Trang 26

:^1

1 Oi'feu t r a hogt d^ klm ham tripxin è iiot a'Jt s5 oSy bSu h£ tiftng o Vi^t nam,

ygu lai h g t , Irong do phai oujn diiyo mjt phucmg phap tiiiih B^oh don gian va re t i e n

3 , S g h i ^ ouu su ^i€iì dè± xiàm Vcstfù^ va thanh phUn

dà ohgn) n.ì^m oung oSp nhung d ^ liSu nhdt diah v& Bf troo d6i I I 0 li^t, ti&k t a l làm sang to

Trang 27

2^

3,1 HK«y§a lifm

do Hguy&i a5u xiiéo, V i ^ k^^a lìgo Vipt nam djnh l o à i

^ t 1^ qua ^muap dJiOg - ddi tug^ag nghi?n « i l ohinh du^c iSy

tu vuòti mu\/p d 4 g xa I>3ng du, huyfn Ola iQm, uà u§l

Tripxin tgty bo kSt tinh du^o d i ^ ch6 theo phuong

p ap cua Hllmor/Éfea-Pclo va i^ejbadkatssenellenbaugen

dua, pepxin, pronasai anbumin huy§t thanh bo, xitocrom C

oua bang êrva, fày Bu'c ìêphadex »25, êphadex G73, '3?-

3,2 Paif<7ag Bf^'a

dung anbuain huySt tnaah bo làm chSt oaa.^i>

# # #

df tinh ra lugfrig protein co trong dung djoh nghii^n ouu,

3.2,2 Xao dinh Iiopt d3 r>;xrìn g l g l proteln theo phuong

phap ^ugoa cai t i ^ C'^'^J% dung oo chgt

Trang 28

- 23 ^

caBeln 1 '> trong dung djch d ^ photpìiat ^,1» pii 7 , i (voi

^ian hvp iion img bao gSm 0,5 tal fJung dioii euadm,

Imi dung dlch 03?*in, /^iu (5 3v,5^j t r o n g 20 phut, L&a

nguttg phan ung bau,': oa'oh t h % 2,5 mi iung djoh ICA 5 5

i ^ dSi c;iuns làm nhu t r ' n nhung tu&a dune d^on ICA vào

Lfly hlfìu fj5 djo t r ^ n niay r^n^a 6ng t a l ' u^^ii^m va 5ug ki?m

t r a , dgQ vào <Stì5 t h j ohuln t l r o s d a ( h , ' i 3 , pnBn pha l'^c)

de t£nh ra ^oiol t i r o sin t «mg ims vSl Ivsgxxe san p h i t

à P / ^ ^ ^tuol t i y ^ ^ ^ ^-^ don vi (PU)

O^dSy ! d 1*1 the? t / o h toàa b§ hSn hg^p rJaan ung (0,5ml

«2»5 mi dung dloh ICA) *

t t tihi gian tt ^JEim v5± oa dhSt (20 piiut)

3 , 2 , 3 ^^0 d^tìh >iQst dS lihÈa g i a i p r o t e l n 'inkkg phucmg

ohgt d i ^ ki.iuén « Ooai pd 4 , 5 , cor ohflt g e l a t i n 0 , 1 , ' trong

t r o o g d|m Triflh*iiA ->,1 ^U^ ^

Oto3 vào m^i l e ^ o ^ l dung dlcu nèliifto ouu, é:i*^ ^ xuA%t d$

phong (25-30^0) t r M g vSng tu 1^24 g i à , %u do' nhu^m màu

Trang 29

24 •

toStofi dung djoh amido den 10 ^ o^ì,i pjjQ tiong iign hiyp

awtanol i axetio i ^J^ ^'^^ ^ ^f^ "«^ *i»^ t^cii l à 3 | ' t ^

San 4 t^itf, iSrf ra t l y mHu bari^^ dung aj.oh <&ns pha thufle

nìMjJia a trPn, CQO eozloa proteolytlo (uéu co') s« phan

g l a l oo obfit troo dio tiiaeh tgo tii*aQh eoo vòag aang tr^n

n ^ tiaoQh oniJQ oo elaflt bat mau xanix, Huò-ug k:ifnh vòna

{dite g i a i nhan onh ban dj.uh iLiVUè*: iioot d^ cua eirim

3,2.4 ^^^'o ittatt iwat 08 Ida aiiB tr^a^sta

pula 3.2.2 i!& kgt qua thu du^yo se ti'nh ra lu^yng t r i p x i n

bi klm ham, ^3t dsm vi uogt dO klm hoo ( l U ) l à lugvng

kiii et 0 oao d i ^ k i ^ ph9u ti'oh (p«* 7,^ j 35, jS, 20 p^ut)

©h^n tu :ri©ailg tuy&i t:fnh trrti dd 1ii| o h u ^ tripxin (h,20^ pxil^n phyi lv©)ft ^^Qg ^ ©hSt klm ham dugr© t£nh aao ©ho co

kha nang làm n&t tu 3o 70,^ ho^t d^ oua tzlpxint

khn hon, th§n vào do *0 v i d ^ photphat 0,2a, ph 7,6 va

dia thooh 0 30-35^0 trcng kuoang ^" glo' SQU do nhu^m màu,

t l y fonìx va piîa't ulCâ "vong phte g i o ì ocr dhAt tr"n dia thôh nhu da md ta* a i ^ n 3 , 2 } 3Q aanh d tmg k^nh vong nhan

3,2,3 Mista di trCn itél Doliaoniamit (PAG) 7,S.i

Trang 30

, ?9

a) 3i.Sg i!ri3 pha trong 48ml KOi Itó, Oho th8a 0,4aml

dung d4Qh ^msù va «In b W ^P!> «Sa ^^0 mi

b) 30g aorilgpiit, 0,3g b i s a o r i i u o i t pai bau^ ^^2^

tuanh 10u 21I

a) o , i g peaunph^)t amoa pba bihig tiji thktìx 100 mi

protein trong dung dloh m ^ d^t klioàng 0,3 • 4mg/ml, 718n hành ©hoy d i ^ di vwl o^-àng dj dàag dug?© duy t r i on d|.nh

l à 4m ^^/Sng g d , Ò' ©.d^ ©h^y difn di tu ©u© Sa aang ci/c ducmg tuoi gl?3n két thif© ©hay duy© ti'nh tu kiii vgt ©hSt

r o , nhu^m màu blog dung dioh smddo dcsn )0 l/> pjio trong

Trang 31

«• 26 w

iioa oafit va gel dugf© ©hu5n bl glin gi5ng ahu pnuong j^a'p trf^, nhung kiii di^^u aa? dung d4©h gel thl coth&a dung dich ©aeeiu uop© gelatin aao ©ho ndag d$ co chat

tronfi dung d^ch gel l à 0,2^i

*Ì2^ (3ti«ó) trong 1 /du, l l y mBu ^él b ^ g dung dloh dung

^eoha-dex 0Z5

tu dgu tuo^g) de xdy à\fag d9 t h i d ^ i u *

Trang 32

a x e t a t n a t r i bau bao :ioa, dyt vào èliyu nvsao da', *^u ^5

dtuag dioh pi:ian m g n , pha loàng bang dfm photphat 0 , v i ,

nSu ^1 này bi mfit ho^t t i n h s^u khi tiSn hành axetyl ho'a

d% t r i p x i n ^mo t l a h sao cho t y 1^ Vfe mol giua ^ v*)

3 , 4 5 , Oiu hSn 't^v r)han uag 0 15^C t r o n g ^H g i o iau do

dung i^^ tmg bung caoh ciio th?^ ^'50 i dung dioh J^ris 1^,

iClto t r a sv h i g ^ chinh ^I b^l t r i p x i n ba:ig phuung phap

i r t e (phan 3 2 5 va 3 2 o )

Trang 33

Ha qHB tè ì^«t ini^cyp a^ff

3.2.10.1 yaott a&ji^li ^ iifg m W B a ^

Hua din^o taoh bo i>t^ n i ^ t (placenta) -vS Jiet, du-yc ngui^fa cìfflag tti^- èkhomg i^i°2 -^c qaa - « i aSa

lOl l y tata tiiu dj.ou troag d i pii-lo t i c ù ,

Mt.;?rli>xln«3eaty3roe.3 4»

bang w i dfte 1ria-.iCìi 3,i:«, pti 7»à co' ói?a *^aC!l 0,5M,

%ou Uc^nlra ouu dJusgo dira -«% piti 7$^ ^^<iéS ^^ÛQg dlôii ^«Ôii ili

VB oiio ctiay qua <^t w i tSo £Ì§ iSml/ àG», ^ao o u l t kiiSag hgp tl4|^ Juvc rua apcli blag <»)ag dfiffl t r ^ n xieu Aanh r u t

Ci-iét cao Î da hSp th«i t r c a oSt bang dung dôh îJl 3,0iail,

1g h p t d3 ogiil'^ mj.!^» tj;ir)ift i)èo ^tnl dung

d$.oh d ^ a s B t a t 0,02M pii 4,'?, i f c t r o o g 3^^* phut a 25-30'^0, 3au do' I j c i-o^lo l'j t j a tuct? ajoii troog de phàn ti'cht

'?l^ns v^^ h ^ t mwp d*as a ose Qfjàj phat t r i ^ n Icuao ohau V V N ag.d'èn claièt dij^c tiiy?c hiC*i è diìàu kipn l'^ch

(khoaag 4*^C) 'TÙy thuOo 1^0 mgic dfoh oila t a l n £ * d ^ ầ

dung m§t t r o a g d5 duag dJ.oh o a l S t sau t dCta a x e t a t n a t r l

0 , 0 2 a , pii 4 , 5 , dgta photphat 0,V>7M, pH 7 , 0 , a x i t pelfolorlo

b) 'r;tvivi m a h ong* vtB» h«im t - n ,3ClQ ohu y&i

« 3uo ky qua $ * ^^ >^ophadex <329, *>l.oh oiiiSt

hOl O«!Q h ^ t mwp duiag duvc a^o ky quo e^t 3P-3ephadex 02j,

Trang 34

• 39

ky h i ^ i l à -^OTi-I, J : I , H I I I , -XV ^ ^V 3 dinh 1 - i c n - l l ,

TI A s i ^ C T U I , « I H ^ -IV t ; à ^ dt^o 0 tr@Dtdem ©d d^© i 4*^0, dura iè oh 7,0 b^ng 4ttng di©h SaOd M , va l^u l u ^ t

nha do ghi t r o a g phftn 3.2.-® i b

K r^ogil ma8i quo o^t ^ophadox G 2 5 , i i a i U V

-©ryl:3mlt) dvtgo lofli Wi5l bàag oaoh olio t l S p ttf© sf© ky qua ©7t Sopnadex C^^!?, ^§t 00 k i e h thir(?c -,0 x 7<^©m da

Trang 35

t r i trung blnh <^a 3 Xhn xao dinh

Trang 36

• 31 •

IV KÉT QÒA HOhlM jub

Két quo xa© djnh SIA ©i^a dj.©h otiiSt tu» h^t kitó ©uQ mjt aS ©% tìSku bl tx*ng ph5 blfa <J nux?© t a (bang 2) ©ÌÌO tiiSy ©a© hot g3o» miscJp d ^ (tha§© ©ai iocaordi©Q) r S t

4 , 2 y^nh aaoh migt klm h^m t r i n x i n ahil ^Su niSa h a t jurcyn

^.^•^ Tttfa flS gi>i Itistt taflto a<A§ti Uafe aa^ oao ^

ft»\a h f l t gaK?Q d W

t i ^ ^ t dcfn gian va già' r e nhmii^ 00 the OÌÌO hlf^u auSt oao,

nhikig khoang t ; ^ gian bao quan kiiao nhau 0 miivt d^

phong (-^3 - 30^^3) t r o n g a ^ i tru5nG 00 ciiSt cii^t knu^n

Trang 38

33

-Kit qua (beog I I | piiSn nhu l^c) cho thSy aau 72 gl5 bio

7tO) 1^ ki'fen (pii ,1) dP&u g?\n nhu» khoag taoy d è i ^St

^1 h9t miR^p dang è niJL|t dQ p^xong, t n r m^^ vài kia^àu nho

ngxii% oJu tiuao day 2 ~ i , 3 , 7t>, ^ 3 , 1w3, 105^7 d ^ su

dune dpm axetat n a t r i ^ iìhinag xuSt -^ot tu* d l ^ kifa

iàtih 1^'a ch^n mjt dung d j ^ d?> tlm ^cm, i*rong tiiif n^jhijfQ

này da mx d^ng mg* Q^ *^un?5 dicii co tinh a x i t (axit ii*<L,

djnh XIA tSng fl6» ho^t d3 ri'ûg {^^^) oua tùmg l o g i «Joh oriiét va tlm hiou sfô ky ?b qua ©vt ^-êphodex S75 oua oa©

l o Q l djoii tìtìi6t này#

oeo-loriOf df'm axetat v^ dfm photphat oao kha n^ng chiSt r u t

tuy Olio XIA t5ne a5 thSp bOTi 3 dung djoh kla nhung I 9 I

Kgt qua aao ky qua o3t ^ephaAox Q7ii (h«^3,b,c,d)

oSing làm oMg to t i a ^ vSa dfe này, -^^o ky -58 cuo 1 dung

ajoh d?ìu ( 1 | ^, 3) 00 dpog chuns glSug nuau w i 4 dinh

protoin cijTnh (T, I I , I H va IV), "^^ tfch r u t oja mol

dioh a ca 3 l o g i djoii chi6t l à nhu niiau, ìiPnti d^oh chiét

bSng ?3Xit petìlorio l à kh8ng co' dinh protein I , trong kui

Trang 39

X ^ f A 8* J

'O * ^ 3!:^

S

Định dạng
Số trang	113
Dung lượng	11,74 MB