Đề tài với nội dung nghiên cứu tính kháng khuẩn của tinh dầu tràm trà Úc, tinh dầu hương nhu trắng trên các vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm và khảo sát hiệu quả phối quả phối hợp của hai loại tinh dầu này nhằm tăng tác dụng, giảm độc tính, để từ đó là cơ sở ứng dụng vào bào chế các chế phẩm có tính kháng khuẩn cao trong điều trị nhiễm trùng trên những vết thương mất da.
Trang 1TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA TINH DẦU TRÀM TRÀ ÚC
VÀ TINH DẦU HƯƠNG NHU TRẮNG TRÊN CÁC CHỦNG VI KHUẨN
ĐỀ KHÁNG KHÁNG SINH PHÂN LẬP TỪ BỆNH PHẨM
Huỳnh Thị Ngọc Lan*, Hồ Ánh Nguyệt*, Lâm Thị Ngọc Phương*
TÓM TẮT
Đặt vấn đề: tỷ lệ đề kháng kháng sinh cao của các chủng vi khuẩn, trong đó có các vi khuẩn thường gây
nhiễm trùng vết thương đang trở thành mối đe dọa nghiêm trọng trong việc điều trị nhiễm khuẩn Nghiên cứu tính kháng khuẩn của tinh dầu tràm trà Úc, tinh dầu hương nhu trắng trên các vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm
và khảo sát hiệu quả phối quả phối hợp của hai loại tinh dầu này nhằm tăng tác dụng, giảm độc tính, để từ đó là
cơ sở ứng dụng vào bào chế các chế phẩm có tính kháng khuẩn cao trong điều trị nhiễm trùng trên những vết thương mất da
Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: - Vi khuẩn thử nghiệm: Pseudomonas aeruginosa,
Staphylococcus aureus, Methicillin resistant Staphylococcus aureus(MRSA), Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae phân lập từ bệnh phẩm - Chất thử nghiệm: tinh dầu tràm trà Úc (T.T.O.), tinh dầu hương nhu trắng (O.G) Phương pháp: - Xác định MIC của tinh dầu hương nhu trắng và tinh dầu hương nhu trắng trên các vi khuẩn thử nghiệm bằng phương pháp pha loãng trong bản thạch - Xác định hiệu quả phối hợp 2 tinh dầu thử nghiệm bằng phương pháp bàn cờ
Kết quả và bàn luận: Tinh dầu tràm trà Úc và tinh dầu tinh dầu hương nhu trắng có tác động kháng
khuẩn tốt trên các chủng P aeruginosa, S aureus, K pneumoniae, E coli phân lập từ bệnh phẩm, trong đó tinh dầu tinh dầu hương nhu trắng cho tác động tốt hơn (MIC trên P aeruginosa: 3,9 – 31,3 µl/ml; trên E coli: 0,98 µl/ml…) trong khi MIC của tinh dầu tràm trà Úc trên P aeruginosa là 7,8 – 125 µl/ml; trên E coli là 1,95 µl/ml MIC của 2 tinh dầu trên các vi khuẩn từ bệnh phẩm thấp hơn hoặc bằng MIC trên các vi khuẩn chuẩn, cho thấy các vi khuẩn đề kháng vẫn rất nhạy cảm với 2 tinh dầu này Phối hợp hai tinh dầu này cho tác động cộng lực, cải thiện rõ rệt tính kháng khuẩn của tinh dầu tràm trà Úc và tinh dầu dầu hương nhu trắng riêng lẻ (trên P aeruginosa, phối hợp đã làm giảm 32 lần MIC của tinh dầu tràm trà Úc và giảm 2 lần MIC của tinh dầu hương nhu trắng; trên E coli phối hợp làm giảm 4 lần MIC của tinh dầu tràm trà Úc và 2 lần MIC của tinh dầu hương nhu trắng Trong các tỉ lệ phối hợp của bàn cờ thì tỉ lệ 4 O.G: 1T.T.O cho tác động tốt nhất trên P aeruginosa, ở tỉ lệ 1:2 cho kết quả cộng lực trên cả 3 vi khuẩn S aureus, MRSA và K pneumoniae
Kết luận: Tinh dầu tràm trà Úc và tinh dầu hương nhu trắng có tác động mạnh trên các chủng vi khuẩn đề
kháng kháng sinh phân lập từ bệnh phẩm Điều này mở ra khả năng sử dụng 2 tinh dầu này trong trị liệu một số nhiễm khuẩn thông thường
Từ khóa: Tea tree oil, ocimum gratissimum oil
ABSTRACT
ANTIBACTERIAL EFFECT OF TEA TREE OIL AND OCIMUM GRATISSIMUM ESSENTIAL OIL ON
BACTERIAL RESISTANT ANTIBIOTIC STRAINS FROM CLINICAL SPECIMENS
Huynh Thi Ngoc Lan, Ho Anh Nguyet, Lam Thi Ngọc Phuong
* Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 18 - Supplement of No 2 - 2014: 209 - 215
Introduction: A high percentage of infections caused by resistant microorganisms often fail to respond to the
standard treatment, resulting in prolonged illness and greater risk of death Research on antibacterial effect of tea
* Khoa Dược, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh
Trang 2tree oil, Ocimum gratissimum essential oil and the combination of them against bacterial strains from clinical specimens is in order to enhance the effect, reduce toxicity and apply in therapy
Materials and methods: Bacteria: Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, K
pneumoniae, MRSA Substances: tea tree oil (T.T.O.), Ocimum gratissimum essential oil (O.G.) Methods: - Determine MIC of T.T.O and O.G by the agar dilution method - Identify rates of combinations between T.T.O and O.G by dilution chessboard method
Results and discussion: - T.T.O and O.G have a strong antibacterial effect on P aeruginosa and E coli
isolated from clinical specimens O.G (against P aeruginosa, MIC = 3.9 – 31.3 µl/ml; against E coli, MIC = 0.98 µl/ml) shows stronger effect than T.T.O (against P aeruginosa, MIC = 7.8 – 125 µl/ml; against E coli, MIC = 1.95 µl/ml) MIC of T.T.O and O.G against bacteria strains isolated from clinical specimens are lower than MIC
of these essential oils against bacteria ATCC strains This result shows that the antibiotic-resistance bacteria strains are still sensitive with these essential oils - The combination of T.T.O and O.G against bacteria is synergistic, which enhance the antibacterial effect (against P aeruginosa, the combination reduces 32 times MIC
of T.T.O and 2 times MIC of O.G.; against E coli, the combination reduces 4 times MIC of T.T.O and 2 times
MIC of O.G.) The best rate of the combination of T.T.O and O.G against P aeruginosa is 4 O.G.: 1 T.T.O and against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, K pneumoniae is 1 O.G: 2 T.T.O
Conclusion: The study has identified the strong antibacterial effect of tea tree oil, Ocimum gratissimum
essential oil on bacteria isolated from clinical specimens, found the combination rate of 2 essential oils and applied
in preparing products with effective bactericidal effect
Key words: Tea tree oil, ocimum gratissimum oil
ĐẶT VẤN ĐỀ
Tỷ lệ đề kháng kháng sinh cao của các chủng
vi khuẩn thường gây khó khăn trong trị liệu dẫn
đến việc kéo dài thời gian điều trị và có thể dẫn
đến tử vong Theo chương trình giám sát quốc
gia về tính kháng thuốc của một số vi khuẩn gây
bệnh thường gặp, thì năm 1999, tỉ lệ kháng thuốc
đối với 2 loại kháng sinh Ampicilin, Amoxicilin
chỉ từ 10-30%, nhưng năm 2001 tỉ lệ này là
50-70% và hiện nay đã lên tới trên 90%(3,4)
Theo báo cáo của hoạt động theo dõi sự đề
kháng kháng sinh của vi khuẩn gây bệnh
thường gặp ở Việt Nam năm 2005 thì trong
khoảng 22.647 chủng vi khuẩn được xác định độ
nhạy cảm với kháng sinh tại 8 bệnh viện đại diện
cho 3 miền Bắc, Trung, Nam, kết quả cho thấy 5
vi khuẩn vẫn thường gặp nhất là: E coli (13,3%),
trực khuẩn mủ xanh (13,3%), Staphylococcus (9,3%),
Acinetobacter (9,9%) và Klebsiella (15,1%) Cả 5 loại
vi khuẩn này đều đề kháng với nhiều kháng
sinh trong điều trị
Các tinh dầu hương nhu, tràm trà Úc đã
được chứng minh có tính kháng khuẩn tốt trên
các vi khuẩn S aureus, P aerusinosa chuẩn(1,2) Việc tiếp tục nghiên cứu tính kháng khuẩn của tinh dầu này trên các vi khuẩn đề kháng kháng sinh sẽ mở ra khả năng ứng dụng cao hơn của các tinh dầu này trên lâm sàng bởi vì việc kiểm soát sự nhiễm khuẩn một cách nhanh chóng và hiệu quả là rất cần thiết và là yếu tố quyết định trong điều trị các vết thương nhiễm trùng
VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Vật liệu thử nghiệm
Tinh dầu: tinh dầu hương nhu trắng do
Công ty TNHH tinh dầu Y Lang cung cấp, tinh dầu tràm trà Úc do Công Ty Cổ phần Dược Phẩm 3/2 cung cấp
Vi khuẩn thử nghiệm
- Các chủng vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm ở Khoa Vi sinh, bệnh viện Thống Nhất
gồm có: 11 chủng Staphylococcus aureus, 12 chủng
Klebsiella pneumoniae, 14 chủng Pseudomonas aerusinosa, 10 chủng E coli, 1 chủng MRSA
Môi trường thử nghiệm
Môi trường Manitol Salt Agar (MSA), môi
Trang 3trường MacConkey (MC), môi trường thử
nghiệm kháng sinh, môi trường phát hiện
Fluorescin của Pseudomonas, môi trường dinh
dưỡng Nutrient Broth (NB)
Kháng sinh thử nghiệm
Đĩa kháng sinh do công ty TNHH Dịch Vụ &
Thương mại Nam Khoa cung cấp
Phương pháp
Khảo sát độ nhạy cảm kháng sinh của các
chủng vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm bằng
phương pháp khuếch tán (phương pháp
Kirby-Bauer)
- Phương pháp: phân lập các vi khuẩn
MRSA và S.aureus trên môi trường MSA, K
pneumoniae trên môi trường MC, P aerusinosa
trên môi trường Pseudomonas, ấp trong 24 giờ ở
37 oC, sau đó, lấy 3-5 khóm vi khuẩn cấy sang
môi trường lỏng NB, ấp ở 37 oC trong 5-6 giờ
Pha loãng huyền dịch vi khuẩn trên để đạt số
lượng vi khuẩn vào khoảng 107 vk/ml Trải vi
khuẩn, ấp khô mặt thạch ở 37 oC trong không
quá 15 phút Đặt đĩa kháng sinh, ấp 37 oC trong
24 giờ
- Đọc kết quả: dùng thước có đo độ chia đến
milimet đo đường kính vùng ức chế Tra bảng
biện giải theo kháng sinh, vi khuẩn và hoạt lực
tương ứng để suy ra độ nhạy cảm
Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC)
bằng phương pháp pha loãng trong môi trường
rắn
- Hoạt hóa các vi khuẩn thử nghiệm và pha
huyền dịch vi khuẩn này để đạt số lượng vi
khuẩn vào khoảng 107 CFU/ml
- Chuẩn bị môi trường có chứa tinh dầu:
dùng Tween 80 ở nồng độ 0,1% để nhũ hóa tinh
dầu, pha loãng tinh dầu trong ống nghiệm chứa
môi trường rắn đã được nấu chảy, theo độ pha
loãng ½, tạo thành dãy các nồng độ tinh dầu
trong bản thạch là: 125 µl/ ml, 62,5 µl/ ml; 31,25 µl/ ml môi trường Chấm 1µl huyền dịch vi khuẩn đã pha loãng vào bản thạch có chứa chất kháng khuẩn trên, để ở nhiệt độ phòng Đọc kết quả sau 24 giờ
Xác định hiệu quả kháng khuẩn của phối hợp tinh dầu tràm trà Úc và tinh dầu hương nhu trắng trên các vi khuẩn thử nghiệm
- Sử dụng phương pháp bàn cờ để xác định hiệu quả phối hợp của tinh dầu tràm trà Úc và tinh dầu hương nhu trắng trên các chủng vi khuẩn thử nghiệm Dựa vào kết quả kháng sinh
đồ chọn các chủng vi khuẩn S.aureus, MRSA, K pneumoniae, aeruginosa đề kháng kháng sinh
để sử dụng cho thử nghiệm này
- Pha huyền dịch vi khuẩn để đạt số lượng vi khuẩn vào khoảng 107 CFU/ml
- Phối hợp tinh dầu: hai tinh dầu nghiên cứu
sẽ được pha loãng trong ống nghiệm chứa môi trường thử nghiệm kháng sinh theo độ pha loãng ½, tạo thành 2 dãy các nồng độ tinh dầu giảm dần Sau đó từ hai dãy nồng độ này tiếp tục phối hợp các nồng độ theo phương pháp bàn
cờ và cho các phối hợp này vào các hộp petri Chấm 1µl huyền dịch vi khuẩn đã pha loãng vào bản thạch có chứa chất kháng khuẩn trên, để ở nhiệt độ phòng Đọc kết quả sau 24 giờ
Để xác định loại tương tác giữa các chất thử nghiệm, dựa vào hệ số FIC
Tính toán giá trị FIC (Fractional Inhibitory Concentration)
FIC ≤ 0,5: hiệp lực bội tăng (synergism) FIC ≤1: cộng lực (additive)
1 < FIC ≤ 4: tác dụng riêng rẽ (indiferent) FIC > 4: đối kháng (antagonism)
Trang 4KẾT QUẢ
Khảo sát độ nhạy cảm kháng sinh của các chủng vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm
Bảng 1: Kết quả khảo sát tỷ lệ đề kháng kháng sinh của các chủng vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm
Amoxicillin/ clavulanic 81,8 40
Nhận xét: các chủng S.aureus đề kháng với
nhiều kháng sinh điều trị thông thường như:
erythromycin (100%), ciprofloxacin (90,91%) và
amoxicillin/ clavulanic (81,82%) Trong 11 chủng
S aureus khảo sát, đa số đều nhạy cảm với
imipenem Trên 10 chủng E coli được phân lập
từ mẫu bệnh phẩm cho thấy các vi khuẩn này đã
đề kháng với ít nhất 1 kháng sinh Các chủng đề
kháng đa kháng sinh đang được dùng để điều
trị hiện nay như ciprofloxacin, ofloxacin,
piperacillin/tazbactam, ceftazidim (tỉ lệ đề kháng
trên 30 %), tuy nhiên các chủng này vẫn nhạy
cảm 100% với imipenem Trên 14 chủng P
aeruginosa trích từ mẫu bệnh phẩm, trong đó có 5
chủng đề kháng với đa số kháng sinh đang được
dùng để điều trị hiện nay như gentamycin,
tcarcillin/acid clavulanic, ceftazidime (tỉ lệ đề
kháng trên 30%) Tuy nhiên các chủng này vẫn
còn nhạy cảm với Imipenem và Pipera-
tazobactam Các chủng K pneumoniae đề kháng
với nhiều loại kháng sinh điều trị thông thường
như gentamycin (91,67%), amikacin (83,33%),
ticarcillin/ clavulanic (83,33%) Trong 12 chủng
K pneumoniae khảo sát, có 11 chủng vẫn còn
nhạy cảm với imipenem
Tính kháng khuẩn của tinh dầu tràm trà Úc
và tinh dầu hương nhu trắng trên các chủng vi khuẩn thử nghiệm
Bảng 2: MIC của tinh dầu tràm trà Úc và hương
nhu trắng trên các chủng vi khuẩn thử nghiệm
Vi khuẩn n MIC (µl/ml môi trường)
Tinh dầu tràm trà Úc
Tinh dầu hương nhu trắng
S aureus 11 3,9 0,98
E coli 10 1,95 0,98
K pneumoniae 12 3,9 0,98
P aeruginosa 14 7,8 - 125 3,9 – 31,3 Tinh dầu tràm trà Úc có tính kháng khuẩn
tốt trên các chủng S aureus và K pneumoniae phân lập từ bệnh phẩm và ngay cả với MRSA
(Bảng 2) MIC trên các chủng này là 3,9 µl/ml môi
trường Trong 14 chủng P aeruginosa thử
nghiệm, MIC của T.T.O nằm trong khoảng khá rộng 7,8 – 125 µl/ml môi trường MIC trên 10
chủng E coli (100%) là 1,95 µl/ml môi trường Như vậy so với các chủng P.aeruginosa, sự nhạy cảm đối với T.T.O của các chủng E coli, S aureus
và K pneumoniae ít thay đổi
Tinh dầu hương nhu trắng có tính kháng
khuẩn mạnh trên các chủng S aureus và K
Trang 5pneumoniae phân lập từ bệnh phẩm và ngay cả
với P aeruginosa và MRSA MIC trên các chủng
S aureus và K pneumoniae là 0,98 µl/ml môi
trường, trên P aeruginosa thay đổi từ 31,3 – 3,9
µl/ml môi trường Như vậy, tính kháng khuẩn
của tinh dầu hương nhu trắng tốt hơn tinh dầu
tràm trà Úc MIC của hương nhu trắng trên các
vi khuẩn S aureus, MRSA, K.pneumoniae thấp
hơn 4 lần so với tinh dầu tràm trà Úc
Xác định hiệu quả kháng khuẩn của phối hợp tinh dầu tràm trà Úc và tinh dầu hương nhu trắng trên các chủng vi khuẩn thử nghiệm
Tiến hành xác định hiệu quả kháng khuẩn của phối hợp tinh dầu hương nhu trắng và tinh dầu tràm trà Úc bằng phương pháp bàn cờ
Xác định hiệu quả kháng khuẩn của phối hợp tinh dầu tràm trà Úc và tinh dầu hương nhu trắng trên vi khuẩn S aureus, MRSA và K pneumoniae
Bảng 3: Hiệu quả phối hợp tinh dầu hương nhu trắng và tràm trà Úc trên S aureus và MRSA
Nồng độ tinh dầu hương nhu trắng (µl / ml môi trường)
B 1
62,5
B 2
31,2
B 3
15,6
B 4
7,8
B 5
3,9
B 6
1,95
B 7
0,98
B 8
0,49 +
B 9
0,24 +
A 1
62,5
A 1 B 1
_
A 1 B 2
_
A 1 B 3
_
A 1 B 4
_
A 1 B 5
_
A 1 B 6
_
A 1 B 7
_
A 1 B 8
_
A 1 B 9
_
A 2
31,2
A 2 B 1
_
A 2 B 2
_
A 2 B 3
_
A 2 B 4
_
A 2 B 5
_
A 2 B 6
_
A 2 B 7
_
A 2 B 8
_
A 2 B 9
_
A 3
15,6
A 3 B 1
_
A 3 B 2
_
A 3 B 3
_
A 3 B 4
_
A 3 B 5
_
A 3 B 6
_
A 3 B 7
_
A 3 B 8
_
A 3 B 9
_
A 4
7,8
A 4 B 1
_
A 4 B 2
_
A 4 B 3
_
A 4 B 4
_
A 4 B 5
_
A 4 B 6
_
A 4 B 7
_
A 4 B 8
_
A 4 B 9
_
A 5
3,9
A 5 B 1
_
A 5 B 2
_
A 5 B 3
_
A 5 B 4
_
A 5 B 5
_
A 5 B 6
_
A 5 B 7
_
A 5 B 8
_
A 5 B 9
_
A 6
1,95 +
A 6 B 1
_
A 6 B 2
_
A 6 B 3
_
A 6 B 4
_
A 6 B 5
_
A 6 B 6
_
A 6 B 7
_
A 6 B 8
_
A 6 B 9
_
A 7
0,98 +
A 7 B 1
_
A 7 B 2
_
A 7 B 3
_
A 7 B 4
_
A 7 B 5
_
A 7 B 6
_
A 7 B 7
_
A 7 B 8
_
A 7 B 9
+
A 8
0,49 +
A 8 B 1
_
A 8 B 2
_
A 8 B 3
_
A 8 B 4
_
A 8 B 5
_
A 8 B 6
_
A 8 B 7
_
A 8 B 8
+
A 8 B 9
+
A 9
0,24 +
A 9 B 1
_
A 9 B 2
_
A 9 B 3
_
A 9 B 4
_
A 9 B 5
_
A 9 B 6
_
A 9 B 7
_
A 2 9B 8
+
A 9 B 9
+
Ghi chú: (-): vi khuẩn bị ức chế, (+): vi khuẩn phát triển A: nồng độ tinh dầu tràm trà Úc, B: nồng độ tinh dầu
Bảng 4 : Hiệu quả phối hợp tinh dầu hương nhu trắng và tràm trà Úc trên K pneumoniae
Nồng độ tinh dầu hương nhu trắng (µl / ml môi trường)
B 1
62,5
B 2
31,2
B 3
15,6
B 4
7,8
B 5
3,9
B 6
1,95
B 7
0,98
B 8
0,49 +
B 9
0,24 +
A 1
62,5
A 1 B 1
_
A 1 B 2
_
A 1 B 3
_
A 1 B 4
_
A 1 B 5
_
A 1 B 6
_
A 1 B 7
_
A 1 B 8
_
A 1 B 9
_
A 2
31,2
A 2 B 1
_
A 2 B 2
_
A 2 B 3
_
A 2 B 4
_
A 2 B 5
_
A 2 B 6
_
A 2 B 7
_
A 2 B 8
_
A 2 B 9
_
A 3
15,6
A 3 B 1
_
A 3 B 2
_
A 3 B 3
_
A 3 B 4
_
A 3 B 5
_
A 3 B 6
_
A 3 B 7
_
A 3 B 8
_
A 3 B 9
_
A 4
7,8
A 4 B 1
_
A 4 B 2
_
A 4 B 3
_
A 4 B 4
_
A 4 B 5
_
A 4 B 6
_
A 4 B 7
_
A 4 B 8
_
A 4 B 9
_
A 5 A 5 B 1 A 5 B 2 A 5 B 3 A 5 B 4 A 5 B 5 A 5 B 6 A 5 B 7 A 5 B 8 A 5 B 9
Trang 6Nồng độ tinh dầu hương nhu trắng (µl / ml môi trường)
B 1
62,5
B 2
31,2
B 3
15,6
B 4
7,8
B 5
3,9
B 6
1,95
B 7
0,98
B 8
0,49 +
B 9
0,24 +
A 6
1,95 +
A 6 B 1
_
A 6 B 2
_
A 6 B 3
_
A 6 B 4
_
A 6 B 5
_
A 6 B 6
_
A 6 B 7
_
A 6 B 8
_
A 6 B 9
_
A 7
0,98 +
A 7 B 1
_
A 7 B 2
_
A 7 B 3
_
A 7 B 4
_
A 7 B 5
_
A 7 B 6
_
A 7 B 7
_
A 7 B 8
_
A 7 B 9
+
A 8
0,49 +
A 8 B 1
_
A 8 B 2
_
A 8 B 3
_
A 8 B 4
_
A 8 B 5
_
A 8 B 6
_
A 8 B 7
_
A 8 B 8
+
A 8 B 9
+
A 9
0,24 +
A 9 B 1
_
A 9 B 2
_
A 9 B 3
_
A 9 B 4
_
A 9 B 5
_
A 9 B 6
_
A 9 B 7
_
A 9 B 8
+
A 9 B 9
+
Ghi chú: (-): vi khuẩn bị ức chế, (+): vi khuẩn phát triển A: nồng độ tinh dầu tràm trà Úc, B: nồng độ tinh dầu hương nhu trắng
AB: phối hợp hai tinh dầu ở các nồng độ
Kết quả cho thấy MIC của phối hợp hai tinh
dầu trên cả ba chủng vi khuẩn S aureus, MRSA
và K.pneumoniae đều là 0,49 µl O.G /ml + 0,98 µl
T.T.O /ml môi trường (Bảng 3 và Bảng 4) trong
khi MIC của T.T.O trên cả ba vi khuẩn S aureus
MRSA, K.pneumoniae là 3,9 µl/ml và MIC của
tinh dầu O.G trên ba vi khuẩn là 0,98 µl/ml
Giá trị FIC trên cả ba vi khuẩn thử nghiệm
đều là 0,75 Vậy phối hợp tinh dầu hương nhu
trắng và tinh dầu tràm trà Úc ở tỉ lệ 1:2 cho kết
quả tốt nhất, có tác động cộng lực trên cả S
aureus, MRSA và K pneumoniae
Xác định hiệu quả kháng khuẩn của phối hợp tinh dầu tràm trà Úc và tinh dầu hương nhu trắng trên vi khuẩn P aeruginosa
Bảng 5 : Hiệu quả phối hợp của T.T.O và tinh dầu HNT trên chủng P aeruginosa
Nồng độ tinh dầu hương nhu trắng (µl / ml môi trường)
B 1
125
B 2
62,5
B 3
31,2
B 4
15,6 +
B 5
7,8 +
B 6
3,9 +
B 7
1,95 +
B 8
0,98
B 9
0,49 +
A 1
125
A 1 B 1
_
A 1 B 2
_
A 1 B 3
_
A 1 B 4
_
A 1 B 5
_
A 1 B 6
_
A 1 B 7
_
A 1 B 8
_
A 1 B 9
_
A 2
62,5
A 2 B 1
_
A 2 B 2
_
A 2 B 3
_
A 2 B 4
_
A 2 B 5
_
A 2 B 6
_
A 2 B 7
_
A 2 B 8
_
A 2 B 9
_
A 3
31,2 +
A 3 B 1
_
A 3 B 2
_
A 3 B 3
_
A 3 B 4
_
A 3 B 5
_
A 3 B 6
_
A 3 B 7
_
A 3 B 8
_
A 3 B 9
_
A 4
15,6 +
A 4 B 1
_
A 4 B 2
_
A 4 B 3
_
A 4 B 4
_
A 4 B 5
_
A 4 B 6
_
A 4 B 7
_
A 4 B 8
_
A 4 B 9
_
A 5
7,8 +
A 5 B 1
_
A 5 B 2
_
A 5 B 3
_
A 5 B 4
_
A 5 B 5
_
A 5 B 6
_
A 5 B 7
_
A 5 B 8
_
A 5 B 9
_
A 6
3,9 +
A 6 B 1
_
A 6 B 2
_
A 6 B 3
_
A 6 B 4
_
A 6 B 5
+
A 6 B 6
+
A 6 B 7
+
A 6 B 8
+
A 6 B 9
+
A 7
1,95 +
A 7 B 1
_
A 7 B 2
+
A 7 B 3
+
A 7 B 4
+
A 7 B 5
+
A 7 B 6
+
A 7 B 7
+
A 7 B 8
+
A 7 B 9
+
A 8
0,98 +
A 8 B 1
+
A 8 B 2
+
A 8 B 3
+
A 8 B 4
+
A 8 B 5
+
A 8 B 6
+
A 8 B 7
+
A 8 B 8
+
A 8 B 9
+
A 9
0,49 +
A 9 B 1
+
A 9 B 2
+
A 9 B 3
+
A 9 B 4
+
A 9 B 5
+
A 9 B 6
+
A 9 B 7
+
A 2 9B 8
+
A 9 B 9
+
Từ kết quả Bảng 5, MIC của phối hợp hai
tinh dầu là 15,6 µl O.G /ml + 3,9 µl T.T.O /ml
môi trường (tỉ lệ O.G: T.T.O là 4:1), trong khi
MIC của T.T.O và tinh dầu O.G trên P
aeruginosa lần lượt là 125 µl/ml và 31,3 µl/ml
môi trường Giá trị FIC của phối hợp là 0,53 Như vậy hiệu quả phối hợp của hai tinh dầu là
phối hợp cộng lực trên vi khuẩn P aeruginosa
Tỷ lệ phối hợp O.G:và T.T.O tốt nhất là 4:1 So
với tác động riêng lẻ, phối hợp của hai tinh
Trang 7dầu đã làm tăng hoạt tính kháng khuẩn cụ thể
làm giảm 32 lần MIC của T.T.O và giảm 2 lần
MIC của tinh dầu O.G
KẾT LUẬN
Các chủng vi khuẩn S aureus, K pneumoniae,
P aeruginosa, E coli phân lập từ bệnh phẩm tại
khoa Vi sinh thuộc bệnh viện Thống Nhất đã đề
kháng với tỷ lệ cao nhiều kháng sinh điều trị
thông thường như amoxicillin/ clavulanic,
azithromycin, erythromycin, ciprofloxacin tỷ lệ
đề kháng đã lên tới trên 80% đến 100% Trong số
13 kháng sinh thử nghiệm, chỉ có 1 kháng sinh là
imipenem còn cho khả năng nhậy cảm cao Đây
là điều đáng báo động về việc sử dụng kháng
sinh trong điều trị
Tinh dầu tràm trà Úc và hương nhu trắng có
tính kháng khuẩn cao trên các vi khuẩn đã đề
kháng với kháng sinh Nồng độ MIC của các
tinh dầu có giá trị tương đương MIC của các
kháng sinh trên các vi khuẩn nhậy cảm Việc
phối hợp 2 tinh dầu trên các chủng vi khuẩn thử
nghiệm đều có tính cộng lực càng làm gia tăng
khả năng kháng khuẩn Điều này mở ra khả năng sử dụng các tinh dầu này trong điều trị các tổn thương mất da do bỏng, các tai nạn cũng như các bệnh nhiễm khuẩn thông thường ngoài
da khác để giảm nguy cơ đề kháng kháng sinh
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1 Carson CF, Riley TV (1998), “Antimicrobial activity of Tea Tree Oil” Rural Industries Research and Development Corporation, Australia, pp 14-29
2 Nakamura CV, Ueda-Nakamura T, Bando E (1999),
“Antibacterial Activity of Ocimum gratissimum L Essential Oil”,
Mem Inst Oswaldo Cruz, 94(5): 675-678
3 Siervert DM et al (2008), “Vancomycin-resistant
Staphylococcus aureus reported in the United States,
2002-2006”, Oxford Journal, 46(5): 668-674
4 Halcón L, Milkus K (2004), “Staphylococcus aureus and
wounds: a review of tea tree oil as a promising antimicrobial”,
Am J Infect Control 2:121-124
5 Chambers HF (2001), “The changing epidemiology of
Staphylococcus aureus?”, Emerging Infectious Disease, 7(2):250
Ngày phản biện nhận xét bài báo: 20.3.2013