Phương pháp nhuộm giemsa – chẩn đoán ký sinh trùng đường máu

PHƯƠNG PHÁP NHUỘM GIEMSA – CHẨN ĐOÁN KÝ SINH TRÙNG ĐƯỜNG MÁU1.. Dụngcụchuẩnbị Độngvậtthínghiệmđểlấymáu Xi-lanh, kim, daomổ/kéo, panh Phiếnkínhsạch, lamen, KHV, dầusoikính, giáphơiphiếnkí

PHƯƠNG PHÁP NHUỘM GIEMSA – CHẨN ĐOÁN KÝ SINH TRÙNG ĐƯỜNG MÁU

1 Ứngdụng

Tìmkýsinhtrùngđườngmáu: Lêdạngtrùng ở bò, chó; Biêntrùng ở bò; Theileria ở bò; Tiênmaotrùng

2 Dụngcụchuẩnbị

Độngvậtthínghiệmđểlấymáu

Xi-lanh, kim, daomổ/kéo, panh

Phiếnkínhsạch, lamen, KHV, dầusoikính, giáphơiphiếnkính

ThuốcnhuộmGiemsa, Cồntuyệtđốihoặc 90° (cồnMetanol)

3 Tiếnhành

a Cáchlấymáu

i Nênlấymáukhi con vậtbịsốt (bệnhTheileriathìlấymáusaungàythứ 3 từkhi con vậtsốt)

ii TrướcvàsaukhilấymáuphảisáttrùngnơilấymáubằngEtehoặccồn 70° iii Lấymáutĩnhmạch tai đốivớitrâu, bò, ngựa, lợn, thỏ; lấy ở cánhđốivớigiacầm; Vớitrâu, bò, dêcừucóthểlấy ở tĩnhmạchcổ; Vớichuộtbạchcóthểlấymáubằngcáchcắtchópđuôi

b Dànmáu

nhỏlênbềmặtphiếnkínhcáchmộtđầuchừng0,5cm

(trườnghợpkínhmàithìcầnxácđịnhchínhxácmặtkính)

ii Dùngmépmộtlákínhphẳngđặt ở phíatráigiọtmáu, đẩyngượctrênphiếnkínhvớigócgiữaphiếnkínhvàlákínhkhoảng 40 - 45° sauđóđểmáukhôtựnhiên

iii Cốđịnhtiêubảnbằngcồntuyệtđốitrongkhoảng 2 – 5 phút

iv Dùngbútmựcviếtnhãnlênphiếnkính

c Nhuộmtiêubảnđãphếtkính

i NhỏthuốcnhuộmGiemsa (cầnphaloãngthuốcnhuộmtheochỉdẫncủanhàsảnxuấtnếucầnthiết) lênbềmặttiêubảnđãđượcphiếtkính Để 15 – 20 phút (Giemsađặc) hoặc 1h (Giemsaloãng)

d Rửa

i Dùngnướccấttrungtínhđểrửa Khôngđổmạnhnước, khônggiộinướctrựctiếpvàochỗphiếtkính

ii Đểtiêubảnkhôtựnhiên, tránhbụi, nắng

4 Kiểmtratiêubảnphiếtkính

kếthợpvớidầusoikínhđểkiểmtravàtìmkýsinhtrùng

Thaotácphiếtkính