LOẠI BỎ CHẤT TAN TRONG ALCOHOL NHẰM NÂNG CAO GIÁ TRỊ DINH DƯỠNG CỦA KHÔ ĐẬU TƯƠNG CHO CÁ CHIM TRẮNG

LOẠI BỎ CHẤT TAN TRONG ALCOHOL NHẰM NÂNG CAO GIÁ TRỊ DINH DƯỠNG CỦA KHÔ ĐẬU TƯƠNG CHO CÁ CHIM TRẮNG Trọng lượng cơ thể cuối cùng của cá trong thức ăn có thành phần hòa tan trong rượu là ESBM + Ext và SBM thấp hơn đáng kể so với cá FM, trong khi trọng lượng cơ thể cuối cùng của cá được cho ăn ExSBM có thể so sánh với cá nuôi FMD (Bảng 2). Những kết quả chỉ ra rằng các chất tan trong alcohol được chiết từ SBM là thành phần chịu trách nhiệm cho việc giảm sự phát triển của cá chim trắng. Bằng chứng cũng được tìm thấy trong thí nghiệm với cá chim vây vàng 7. Chế độ ăn dựa vào SBM dẫn đến protein thấp và tiêu hóa lipid kết hợp với hiệu suất tăng trưởng kém hơn 30; 35. Trong nghiên cứu trên cá chim vây vàng, hiệu suất tăng trưởng và FCR của thức ăn cho cá ExSBM và FM có xu hướng tốt hơn của cá cho ăn SBM và ExSBM + Ext, mặc dù không sự khác biệt đáng kể đã được quan sát ở kết thúc thử nghiệm cho ăn 3 tuần 9. Ở nghiên cứu hiện tại nhận thấy lượng thức ăn thu nhận hàng ngày của cá nuôi SBM và ESBM + Ext cao hơn đáng kể so với cá cho ăn FM, sự phát triển kém hơn của cá ăn thức ăn có thành phần hòa tan trong rượu SBM và ESBM+Ext là do chế độ ăn có nguồn chất dinh dưỡng kém hơn, bởi vậy cá ở hai chế độ ăn này cần đòi hỏi việc sử dụng nguồn thức ăn nhiều hơn so với FM (Bảng 2). Thực tế nghiên cứu, khả năng tiêu hóa lipid và protein thấp của cá ăn SBM cũng như chế độ ăn có chiết xuất từ rượu như ExSBM + Ext, hỗ trợ phát hiện này (Bảng 3). Tương tự, sự tăng trưởng kém đi kèm với khả năng tiêu hoá lipid và protein thấp của thức ăn khi cho cá ăn SBM đã được được báo cáo trong cá hồi vân và cá hồi Đại Tây Dương34; 35.

LOẠI BỎ CHẤT TAN TRONG ALCOHOL NHẰM NÂNG CAO GIÁ TRỊ DINH DƯỠNG CỦA KHÔ ĐẬU TƯƠNG CHO CÁ CHIM TRẮNG

MỤC LỤC

PHẦN MỞ ĐẦU 1

1.Lí do chọn đề tài 1

2 Mục tiêu nghiên cứu 2

3 Nội dung 3

4 Giả thuyết khoa học 3

5 Đóng góp mới của luận văn 3

PHẦN NỘI DUNG 5

Chương 1- TỔNG QUAN TÀI LIỆU 5

1.1 Khái quát về cá Chim trắng 5

1.2 Tình hình sử dụng khô dầu đậu tương trong thức ăn cho cá 7

1.3 Các yếu tố kháng dinh dưỡng trong khô dầu đậu tương 8

1.4 Các chất tan trong alcohol của khô đậu tương 10

1.5 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước 11

Chương 2- ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18

2.1 Đối tượng, thời gian, địa điểm và phương pháp nghiên cứu 18

2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 18

2.1.2 Thời gian nghiên cứu 18

2.1.3 Địa điểm nghiên cứu 18

2.1.4 Phương pháp nghiên cứu 18

Chương 3- KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 23

3.1 Sinh trưởng và hiệu quả chuyển hoá thức ăn 23

3.2 Tỷ lệ tiêu hóa protein và lipid 25

3.3 Hoạt tính của trypsin và lipase trong ruột 27

3.5 Hàm lượng axit mật trong túi mật và ruột non 29

3.6 Hàm lượng lipid trong huyết tương 31

3.7 Hàm lượng lipid trong gan và cơ 33

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 35

1 Kết luận 35

2 Kiến nghị 38

TÀI LIỆU THAM KHẢO 39 PHỤ LỤC 1

DANH MỤC BẢNG

Bảng 1.: Khẩu phần thức ăn trong các chế độ ăn thí nghiệm 19

Bảng 2: Các chỉ số về sinh trưởng và hiệu quả chuyển hoá thức ăn 23

Bảng 3: Hàm lượng protein và lipid trong các khẩu phần thức ăn 26

Bảng 4: Chỉ số hàm lượng trypsin và lipase trong ruột cá 27

Bảng 5: Chỉ số hàm lượng axit mật trong túi mật và ruột non của cá 29

Bảng 6: Hàm lượng lipid trong huyết tương của cá 31

Bảng 7: Hàm lượng lipid trong gan và cơ 33

DANH MỤC HÌNH

Hình 1: Biểu đồ biểu thị khối lượng cá ban đầu, kết thúc, tăng trọng và lượng thức ăn thu

nhận của cá Chim trắng trong thí nghiệm 23

Hình 2: Biểu đồ biểu thị hàm lượng FCR của các khẩu phần thức ăn 24

Hình 3: Màu sắc đường ruột trong các ăn khẩu phần thí nghiệm Vòng tròn cho biết phần sau của ruột Một thanh đơn vị bằng 1 cm 25

Hình 4: Biểu đồ biểu thị tỉ lệ tiêu hoá protein và lipid giữa các khẩu phần thí nghiệm 26

Hình 5: Biểu đồ biểu thị hàm lượng Trypsin và Lipase trong ruột sau 8 giờ ăn 28

Hình 6: Biểu đồ biểu thị hàm lượng axid mật có trong túi mật và ruột non 30

Hình 7: Biểu đồ biểu thị hàm lượng total cholesterol, triglyceride, phospholipid trong huyết tương 31

Hình 8: Biểu đồ biểu thị hàm lượng NEFA trong huyết tương 32

Hình 9: Biểu đồ biểu thì hàm lượng lipid trong gan và cơ 34

PHẦN MỞ ĐẦU 1.Lí do chọn đề tài

Khi thay thế bột cá có giá bằng khô dầu đậu tương (defated soybeanmeal, SBM) nhằm hạ giá thành thức ăn, đa số các loài cá ăn động vật đều cóbiểu hiện sinh trưởng kém, hiệu quả chuyển hóa thức ăn giảm và xuất hiệnnhiều bất thường về sinh lý Các chất kháng dinh dưỡng trong khô dầu đậutương được xem là nguyên nhân chính dẫn đến những ảnh hưởng tiêu cực này.Đối với một số loài cá, các chất tan trong alcohol đã được xác định là nhữngyếu tố kháng dinh dưỡng quan trọng trong SBM [53; 16; 6; 7] Nó có ảnhhưởng trực tiếp đến quá trình tiêu hóa và hấp thụ các chất dinh dưỡng và ảnhhưởng xấu đến sinh trưởng của cơ thể [38]

Nhiều nghiên cứu đã được tiến hành để đánh giá tác động của việc thaythế đậu tương đã khử chất béo (SBM) cho bột cá (FM) trong thức ăn cho cá.Tuy nhiên, bao gồm một lượng lớn SBM đã dẫn đến tăng trưởng kém ởyellowtail Seriola quinqueradiata [37; 38; 50], cá hồi Đại Tây Dương Salmosalar [40; 30; 31; 32], cá hồi cầu vồng Oncorhynchus mykiss (32; 34; 35), màu

đỏ biển bream Pagrus major [44] và cá bơn Nhật Bản Paralichthys olivaceus[19; 20]

Bên cạnh hiệu suất tăng trưởng kém của cá, nhiều SBM gây ra bấtthường sinh lý tiêu hóa Cho ăn theo chế độ ăn SBM giảm nồng độ acid mậttrong vùng pyloric và phần giữa của ruột trong của cá Chim vây vàng [34; 35].Ngoài ra, Cá hồi Đại Tây Dương được ăn theo chế độ ăn SBM giảm hoạt tínhtrypsin trong ruột trong cùng một phân đoạn đường ruột [21] Vì axit mật vàenzyme tiêu hóa được tiết ra vào đường ruột trong vùng pyloric, những kết quảnày cho rằng yếu tố tiêu cực trong SBM can thiệp vào sự tổng hợp hoặc tiết,hoặc cả hai, của axit mật và enzyme tiêu hóa Có thể là những rối loạn nàytrong tiêu hóa sinh lý học chịu trách nhiệm về chất dinh dưỡng thấp tiêu hóa,như đã báo cáo trong SBM nuôi cá hồi [40; 34; 35; 54; 16]

Mặt khác, một sản phẩm được xử lí bằng rượu của SBM, có giá trị dinhdưỡng cao [17] Hơn nữa, hình thái ruột bị suy yếu, đó là triệu chứng điểnhình quan sát thấy trong thức ăn cho cá hồi SBM, đã được giảm nhẹ khi cho cá

ăn SBM đã được chiết alcohol [49] Báo cáo cho thấy rằng các thành phần tantrong rượu trong SBM gây ra những thay đổi bất lợi trong sinh lý tiêu hóa của

cá hồi như đã thấy khi cá được cho ăn khẩu phần có chứa SBM Vì thế, có thểchiết xuất tan trong alcohol từ SBM là yếu tố chính gây ra sự suy giảm trong cácho ăn bằng SBM

Đa số các nghiên cứu được thực hiện trên đối tượng cá Chim sống ở môitrường nước mặn Cá chim trắng (Colossoma brachypomum) có nguồn gốc từsông Amazon nam Mỹ, là loài cá ăn tạp thiên về động vật có phổ thức ăn rộng,tốc độ tăng trưởng nhanh, thịt cá chim ngon và có hàm lượng dinh dưỡng cao.Năm 1997 ở Việt Nam công ty cá giống Trung ương đã nhập cá chim về nuôitại sông Cầu Từ năm 1998 cho đến nay, việc nuôi trồng cá chim trắng đã đượcnhân lên rộng rãi ở nhiều tỉnh thành trên cả nước Tuy nhiên, tỷ lệ SBM trongkhẩu phần thương mại cho cá ăn thường chỉ đạt 20-25% Như vậy, để hạ giáthành thức ăn trong nuôi trồng thì cần tăng SBM trong khẩu phần ăn Tuynhiên, cho đến nay chưa có đề tài nào thực hiện việc nghiên cứu để loại bỏ chấtkháng dinh dưỡng tan trong alcohol của khô đậu tương trên đối tượng là cáChim trắng

Vì những lý do trên, tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Loại bỏ chất tan trong alcohol nhằm nâng cao giá trị dinh dưỡng của khô đậu tương cho cá chim trắng Colossoma brachypomum”.

2 Mục tiêu nghiên cứu

- Loại bỏ chất tan trong alcohol nhằm nâng cao giá trị dinh dưỡng trongSBM

- Đánh giá hiệu quả của việc loại bỏ chất tan trong alcohol đối với sinhtrưởng, hiệu quả chuyển hoá thức ăn, tỉ lệ tiêu hoá chất dinh dưỡng, hoạt độngcủa một số enzim tiêu hoá và một số chỉ số sinh lí trên cá chim trắng

Colossoma brachypomum.

3 Nội dung

- Loại bỏ chất tan trong alcohol của SBM thông qua việc chiết SBMbằng alcohol ở các nồng độ khác nhau

- Sử dụng SBM đã được loại bỏ chất tan trong alcohol để đánh giá một

số chỉ tiêu trên cá chim trắng bao gồm:

+ Sức sinh trưởng, hiệu quả chuyển hóa thức ăn

+ Tỷ lệ tiêu hóa lipid, protein, hoạt tính của lipase và trypsin trong ruột,hàm lượng axit mật trong ruột và trong túi mật

+ Một số chỉ số lipid máu

4 Giả thuyết khoa học

Việc sử dụng khô dầu đậu tương cho cá ăn động vật đều xuất hiện nhữngbiểu hiện bất lợi về sinh trưởng và sinh lý Một trong những nguyên nhân là docác chất kháng dinh dưỡng tan trong alcohol Vì thế, có thể sử dụng alcohol đểloại bỏ các chất này, nhằm tăng giá trị dinh dưỡng, sức sinh trưởng, hiệu quả sửdụng thức ăn và sinh lý của cá chim trắng – một đối tượng nuôi có tập tính ănthiên về động vật

5 Đóng góp mới của luận văn

Ý nghĩa khoa học: Xây dựng cơ sở khoa học trong việc nâng cao giá trịdinh dưỡng của SBM bằng loại bỏ chất tan trong alcohol và ảnh hưởng củachất tan trong alcohol với sinh trưởng, tiêu hóa hấp thu và một số chỉ số sinh lýtrên cá chim trắng Từ đó, làm cơ sở cho việc áp dụng trong sản xuất thức ănthủy sản

Ý nghĩa thực tiễn:Kết quả nghiên cứu giúp nâng cao giá trị dinh dưỡngcủa SBM cho cá chim trắng và có thể sử dụng SBM đã loại bỏ chất tan trongalcohol cho các đối tượng vật nuôi khác

6 Cấu trúc luận văn

PHẦN NỘI DUNG Chương 1- TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Khái quát về cá Chim trắng

* Nguồn gốc phân loại

Bộ: Characiformes

Họ: Characidae

Giống: Colossoma

Loài: Colossoma brachypomum, Cuvier 1818

* Đặc điểm của cá Chim Trắng

Cá chim trắng nước ngọt Clossoma brachypomum (Nguồn: Wikipedia)

- Hình thái:

Cá Chim Trắng có hình dạng gần giống so với cá chim biển Mình dẹt,đầu nhỏ, lưng cao, chiều cao đầu bằng chiều dài đầu Mắt to trung bình, cátrưởng thành có màu sắc nổi trội, đuôi xẻ rãnh, thân trắng bạc, đuôi có viềnmàu đen Các vây bụng và vây hậu môn của cá có màu đỏ Vây đuôi có điểmvân đen ở diềm đuôi Cá có khả năng biến đổi màu sắc theo môi trường sống

Dạ dày của cá tương đối to, có hình chữ U Chiều dài của ruột bằng 2,5 chiều

dài thân [46].

Chiều dài đầu gấp 4,5 đường kính mắt Răng có hai hàm gồm hàm trên

và hàm dưới Hàm trên có hai hàng răng, có 10 răng hàng ngoài và 4 răng hàngtrong Hàm dưới cũng có 2 hàng răng, hàng trong có 2 răng, hàng ngoài có 14răng (8 răng nhỏ và 6 răng lớn) Mặt răng có hình dạng răng cưa Ở mang thứnhất có số lượng lược là: 30-36 Số vẩy ở đường bên: 31-33 Số vẩy dướiđường bên là 28-31 Không có gai cứng ở tia vây Số vây lưng là 18-19 Số vâyngực là 14 (có 13 tia phân nhánh, 1 không phân nhánh) Số vây bụng là 8 Sốvẩy đường bên là 81-98 [45]

- Tập tính sinh sống:

Nhiệt độ mà cá có thể sinh sống dao động từ 21 - 32 0C, tuy nhiên nhiệt

độ thích hợp nhất trong khoảng từ 28 - 30 0C Cá chim trắng có sức chịu rétkém, 80C cá bắt đầu chết, cá sống không bình thường ở 120C, giới hạn nhiệt độthấp ở 100C Vào mùa xuân, khi nhiệt độ của nước đạt 160C trở lên thì cá bắtđầu ăn bình thường [46]

Vào mùa đông năm 1998 - 1999 ở miền bắc nước ta, cá giống 30 - 100gsống bình thường tại cỡ 5 - 6 tháng tuổi; mùa đông năm 1999 - 2000 cá thịt cỡ0,5 - 1,5kg sống bình thường, cá con cỡ 1,5 – 3cm mới nhập về tháng 11, bịsinh bệnh chết dần do chống rét cho cá chưa tốt [46]

Với độ pH thì cá chim trắng thích nghi khá rộng, ở pH=5,6 - 7,4 sốngtốt Ao độ mặn khoảng 5 - 10% cá sinh trưởng bình thường, ở độ mặn khoảng15% có thể sống được 10 giờ, cá có sức chịu lạnh và sức chống bệnh cao hơnnuôi ở nước ngọt ở độ mặn khoảng 5 - 10% [46]

Cá sinh trưởng tốt nhất ở điều kiện ao nuôi có hàm lượng oxy từ 6mg/l, khi giảm bớt dưới 3mg/l thì cá kém ăn dần Cá có sức chịu đựng vớihàm lượng oxy khoẻ hơn so với các loài cá khác [46]

4-Dipterex và xanh malachite là hai loại thuốc cá rất nhạy cảm cho cá, cáchết bắt đầu ở nồng độ dipterex 0,2ppm, ở nồng độ 0,3 ppm chết nhiều sau 8h

Ở nồng độ 0,5ppm chết phần lớn sau 3 - 4h Đối với xanh malachite nồng độ0,3ppm cá đã có hiện tượng bị ngộ đôc [46]

-Dinh dưỡng:

Cá chim trắng nước ngọt là loài cá ăn tạp – thiên ăn động vật nhiều hơn

Ở giai đoạn cá bột, các sinh vật phù du cỡ nhỏ là thức ăn chủ yếu như luântrùng và tảo đơn bào; thức ăn chủ yếu của giai đoạn cá hương của cá là chânphèo (Copepoda), động vật phù du cỡ lớn như giáp xác (Cladocera), mùn bãhữu cơ và thức ăn chế biến; thức ăn của cá càng đa dạng ở giai đoạn trưởngthành, ngoài thức ăn chế biến công nghiệp, cá còn ăn được nhiều rau cỏ dướinước và trên cạn, các loại hạt ngũ cốc, vỏ dưa hấu, rau chế phế phẩm, các độngvật nhỏ như giun, ôc, tôm, cá con và chất hữu cơ mục nát ở đáy [46]

- Sinh sản:

Ở sông Amazôn, Braxin, cá chim trắng nước ngọt khi được 32 tháng tuổithành thục và có thể sinh sản tự nhiên Tuy nhiên, cá chim trắng nuôi trong aokhông đẻ tự nhiên được mà cần phải có kích dục tố cho sinh sản nhân tạo Ðiềunày đã được kiểm chứng ở một số nước như Trung Quốc, Ðài Loan, Thái Lan

và Việt Nam [45]

- Sinh trưởng:

So với một số loài cá khác, cá chim trắng nước ngọt lớn rất nhanh Cá có thểtăng trọng 100 g/tháng Trong điều kiện thích hợp, cá có thể đạt từ 1,2 - 2 kg/con,sau 6 đến 7 tháng nuôi Trong môi trường tự nhiên, cá chim 2 tuổi dài 43cm vànặng trên 2,5 kg Từ cỡ 1.5kg cá lớn chậm lại, đạt khoảng 3kg sau 3 năm Cá có thểsống đến 10 năm tuổi [46]

1.2 Tình hình sử dụng khô dầu đậu tương trong thức ăn cho cá

Thí nghiệm “Khả năng thay thế bột cá bằng bột đậu nành trong thức ăn

của cá Tra (Pangasianodon hypophthalmus) trong giai đoạn giống” được thực

hiện để đánh giá khả năng thay thế đạm bột cá bằng đạm bột đậu nành trích

dầu trong khẩu phần thức ăn của cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) ở giai

đoạn giống (cỡ ở 6,73 g/con) Sáu công thức thức ăn được tạo ra có cùng mứcđạm (35%) và năng lượng (4,6 kcal/g), trong đó bột đậu nành được cho và thay

thế bột cá tại các nồng độ là: 0% (đối chứng), 20%, 40%, 60%, 80% và 100%.Mỗi công thức thức ăn được lặp lại 3 lần Sau 8 tuần thí nghiệm, các chỉ tiêu vềtăng trọng (WG), hệ số thức ăn (FCR), tốc độ tăng trưởng đặc biệt (SGR) vàhiệu quả sử dụng đạm (PER) của cá ở công thức đối chứng khác biệt không có

ý nghĩa so với cá ở các công thức thay thế từ 20% - 60% bằng bột đậu nànhlọc dầu (p>0,05) Các chỉ tiêu WG, SGR, PER của cá ở công thức thay thế 80%

và 100% protein bột cá bằng đạm bột đậu nành trích dầu thì thấp hơn và cóFCR cao hơn so với công thức đối chứng (p<0,05) Chỉ số gan trên cơ thể(HSI) và tỷ lệ sống (SR) giữa các công thức khác biệt không có ý nghĩa(p>0,05) Hàm lượng chất béo và tro trong cơ thể cá giảm đáng kể khi tănglượng đạm bột đậu nành ly trích dầu trong thức ăn Kết quả nghiên cứu này chothấy có thể thay thế đến 60% đạm bột cá bằng đạm bột đậu nành trích dầu màkhông làm giảm khả năng tăng trưởng và hiệu quả sử dụng thức ăn của cá tra ở

giai đoạn giống [18].

Bên cạnh đó, một số nghiên cứu tại Việt Nam cũng đã chỉ ra rằng, vớimức thay thế khoảng 30 – 45% bột đậu nành cho bột cá làm thức ăn cho cá sẽkhông làm ảnh hưởng tới sự sinh trưởng và phát triển bình thường của cá [3;4; 47; 48]

Nhìn chung, tại Việt Nam, các đề tài nghiên cứu tiến hành trên cá chimmới chỉ tập trung vào hoàn thiện quy trình sản xuất giống, nuôi thương phẩm

sử dụng các thức ăn thương mại do các công ty sản xuất Dù công thức thức ăncủa các công ty không được tiết lộ, nhưng nhìn chung, các công thức thức ănthương mại cho cá chim thường có tỷ lệ SBM trên dưới 20% Chúng ta hoàntoàn chưa có nghiên cứu nào nhằm nâng cao giá trị dinh dưỡng của SBM vànâng cao tỷ lệ sử dụng SBM trong khẩu phần cho loài cá tiềm năng này trongđiều kiện nuôi tại Việt Nam

1.3 Các yếu tố kháng dinh dưỡng trong khô dầu đậu tương

Các nhà khoa học đã chỉ ra rằng, có ít nhất hai trở ngại đối với cơ thể

động vật thủy sản khi sử dụng SBM trong khẩu phần ăn Một là, sự thiếu hụtmột số axit amin không thay thế như methionine và lysine trong SBM Hai là,SBM có chứa các chất kháng dinh dưỡng có ảnh hưởng trực tiếp đến quá trìnhtiêu hóa và hấp thụ các chất dinh dưỡng và ảnh hưởng xấu đến sinh trưởng của

cơ thể [29] Trong trường hợp thiếu hụt axit amin không thay thế, hướng khắcphục là bổ sung các axit amin tổng hợp, như methionine và lysine vào khẩuphần SBM hoặc phối hợp nhiều loại nguyên liệu khác nhau nhằm bổ sung axitamin không thay thế bị thiếu hụt trong SBM [13] Tuy nhiên, khi các axit aminkhông thay thế bị thiếu hụt đã được bổ sung, khẩu phần có tỷ lệ SBM cao vẫnkhông đạt được các thành công như mong muốn, đặt biệt thấy rõ ở những loàithủy sản ăn động vật [12] Chất kháng dinh dưỡng có ảnh hưởng trực tiếp đếnquá trình tiêu hóa, hấp thụ và sinh trưởng của cơ thể [29] Bao gồm nhóm chất

ức chế hoạt tính của protease, các protein dạng kháng nguyên, saponins,lectins, các polysaccharides không phải tinh bột, phytate v.v [29; 49; 12]

Quá trình sản xuất SBM trải qua quá trình xử lý nhiệt nên các chất ứcchế hoạt tính của protease trong đậu tương vốn không bền với nhiệt đã dễ dàng

bị loại bỏ [1] Tuy nhiên, các chất kháng dinh dưỡng khác trong đậu tương làcác chất bền với nhiệt nên chúng vẫn còn tồn tại trong sản phẩm SBM cuốicùng Các chất kháng dinh dưỡng này là nguyên nhân chính dẫn đến việc giảmsinh trưởng, giảm hệ số chuyển hóa thức ăn, xuất hiện các dấu hiệu bất thường

về sinh lý, giải phẫu và là yếu tố làm hạn chế việc sử dụng SBM trong khẩuphần của động vật thủy sản [14]

Bên cạnh hiệu suất tăng trưởng kém của cá, nhiều SBM gây ra bấtthường sinh lý tiêu hóa Cho ăn theo chế độ ăn SBM giảm nồng độ axit mậttrong vùng pyloric và phần giữa của ruột trong cá hồi [34] Ngoài ra, Cá hồiĐại Tây Dương được ăn theo chế độ ăn SBM giảm hoạt tính trypsin trong ruộttrong cùng một phân đoạn đường ruột Vì axit mật và enzyme tiêu hóa đượctiết ra vào đường ruột trong vùng pyloric, những kết quả này ngụ ý rằng yếu tố

tiêu cực trong SBM can thiệp vào sự tổng hợp hoặc tiết, hoặc cả hai, của axitmật và enzyme tiêu hóa Có thể là những rối loạn này trong tiêu hóa sinh lý họcchịu trách nhiệm về chất dinh dưỡng thấp tiêu hóa, như đã báo cáo trong SBMnuôi cá hồi [39; 34; 53; 17].

1.4 Các chất tan trong alcohol của khô đậu tương

Các thí nghiệm khác với cá cam sọc để tìm hiểu ảnh hưởng của các chất tantrong alcohol đến các biểu hiện bất thường trên loài cá này khi ăn SBM Kết quảcho thấy hỗn hợp dịch chiết bằng alcohol của đậu tương ức chế tiết axit mật vàenzyme tiêu hóa của tuyến tụy thông qua việc giảm kích thích củacholecystokinin Sự ức chế này là một yếu tố làm giảm tiêu hóa và hấp thu lipid,qua đó làm giảm sinh trưởng của cá cam sọc ăn khẩu phần SBM Ngoài ra, pháthiện ra các chất tan trong alcohol còn gây ra các biến đối bất thường trong màusắc của ruột sau đối với loài cá này [7; 6]

Mặt khác, một sản phẩm được xử lí bằng rượu của SBM, có giá trị dinhdưỡng cao Hơn nữa, hình thái ruột bị suy yếu, đó là triệu chứng điển hìnhquan sát thấy khi cho cá hồi ăn SBM, được giảm nhẹ trong cá SBM được cho

ăn bằng rượu [49] Nó đã được báo cáo rằng các thành phần tan trong rượutrong SBM gây ra những thay đổi bất lợi tương tự trong sinh lý tiêu hóa của cáhồi như đã thấy khi cá được cho ăn khẩu phần có chứa SBM Cho ăn đườngđậu nành, chủ yếu chứa oligosaccharides được tạo ra bằng cách chiết alcohol,dẫn đến việc tiêu hóa lipid thấp ở Đại Tây Dương cá hồi Cho ăn cá hồi mộtchế độ ăn uống dựa trên casein với rượu chiết xuất của SBM làm giảm mức độaxit mật và lipid tiêu hóa [53] Vì thế, có thể là chiết xuất rượu từ SBM yếu tốchính gây ra sự suy giảm trong cá cho ăn bằng SBM

Bên cạnh đó, Nguyễn và cộng sự đã có các nghiên cứu về sự ảnh hưởngcủa bột đậu nành đã được chiết alcohol tới sinh trưởng và phát triển của cáchim vây vàng Kết quả của các nghiên cứu đã chứng mình chất được chiếttrong alcohol từ bột đầu nành là nguyên nhân gây nên những biểu hiện bất

trường trong tiêu quà và ảnh hưởng trực tiếp đến hiệu suất tăng trưởng của cácchim vây vàng [6; 7]

Trong số các nguồn protein thay thế có sẵn, bột đậu nành đã khử chấtbéo (SBM) đã được coi là giải pháp thay thế hiệu quả nhất cho FM vì hàmlượng protein cao, khả năng tiêu hóa cao, cấu trúc axit amin cân bằng tươngđối tốt, và giá cả hợp lý [27; 39] Nhiều nghiên cứu đã được tiến hành để đánhgiá tác dụng thay thế SBM đối với FM trong khẩu phần ăn yellowtail Tuynhiên, quá nhiều SBM dẫn đến tăng trưởng kém và hiệu suất thức ăn [37; 38;50] Hơn nữa, thấp mức cholesterol trong máu (tăng cholesterol máu), thiếumáu, và tỷ lệ cao hơn của gan xanh cũng đã được báo cáo trong cá chim vâyvàng khi ăn với chế độ ăn không phải FM [51; 23; 28; 43] Chế độ ăn có chứahàm lượng SBM cao đã có thành công hạn chế và cho thấy tác dụng phụ ở cácloài cá khác Hạ cholesterol máu là một triệu chứng nổi bật ở động vật đượccho ăn dựa trên SBM [15; 26; 41; 43; 55], bao gồm cả đuôi vàng [50; 24; 22]

Để tăng tính khả thi của việc sử dụng đậu tương trong thức ăn, nó là điều cầnthiết để xác định các yếu tố gây hạ cholesterol máu ở loài này và phát triển cácphương pháp để loại bỏ các yếu tố đó một cách hiệu quả Trong động vật có vú,

nó đã được công nhận rằng cao chưa tiêu phân tử (HMF) của protein đậu tương

là yếu tố quyết định nồng độ cholesterol trong huyết tương thấp [15; 26; 41;42] Tuy nhiên, điều này đã không bao giờ được kiểm tra trong cá

1.5 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước

* Tình hình nghiên cứu ngoài nước:

Năm 2016, Nguyễn và cộng sự đã nghiên cứu ảnh hưởng của bột đậunành được chiết alcohol tới hiệu suất tăng trưởng, khả năng tiêu hóa và enzimtuyến tuỵ và axit mật của cá chim vây vàng (Seriola quinqueradiata) Cá đượccho ăn một trong những điều sau đây trong 8 tuần: một chế độ ăn kiểm soátbữa ăn cá (FM), chế độ ăn đậu nành đã khử chất béo (SBMD), chế độ SBMđược chiết xuất alcohol (ExSBMD), một ExSBMD với (ExSBM + ExtD) và

FMD với (FM + ExtD) Hiệu suất sinh trưởng kém hơn đáng kể ở cá ăn bằngSBM, ExSBM + ExtD, và FM + ExtD so với cá được cho ăn bằng FMD hoặcExSBMD Toàn bộ nồng độ axit mật, và hoạt động trypsin và lipase ở ruột nonthấp hơn đáng kể ở cá ăn bằng SBM, ExSBM + ExtD và FM + ExtD so với cáđược cho ăn ExSBMD và FMD, mặc dù có giá trị tương tự trong túi mật hoặc

ca tràng Các mức mRNA Cholecystokinin của cá ăn thức ăn trước đây thấphơn đáng kể so với cá được cho ăn bằng FMD hoặc ExSBMD Khả năng tiêuhóa lipid và protein cá được cho ăn bằng SBMD, ExSBM + ExtD và FM +ExtD giảm đáng kể so với cá cho ăn bằng FMD hoặc ExSBMD Những pháthiện này chỉ ra rằng alcoho chiết xuất từ bột đậu nành đã gây ức chế sự tiết acidmật và men tụy bằng cách giảm kích thích cholecystokinin Sự ức chế nàydường như là chịu trách nhiệm cho một hiệu suất tăng trưởng thấp thông qua

sự suy giảm của sự đồng hóa của lipid và protein [7]

Năm 2011, Nguyễn và cộng sự đã công bố dịch chiết alcohol của SBM

ức chế tiết acid mật và enzym tiêu hóa tụy thông qua giảm kích thích hoocmon

cholecystokinin (CCK) Thí nghiệm cho ăn được tiến hành để điều tra ảnhhưởng của việc chiết xuất rượu từ bột đậu nành đã khử chất béo (SBM) về bàitiết các enzyme tiêu hóa tuyến tụy và axit mật trong cá chim vây vàng Bốn chế

độ ăn uống được chỉ định là SBM, ExSBM (SBM chiết xuất từ rượu) vàExSBM + Ext (ExSBM được bổ sung với chiết xuất rượu) và FM (bột cá) đượccho cá chim vây vàng ăn trong 3 tuần Tổng lượng acid mật trong ruột trước làthấp hơn đáng kể so với cá cho ăn ExSBM + Ext và SBM và so với cá cho ănExSBM và FM, mặc dù mức độ tương tự trong túi mật trong số các phươngpháp điều trị Cá cho ăn ExSBM + Ext và SBM cho thấy các hoạt động lipase

và trypsin thấp hơn ở trước ruột so với cá được cho ăn ExSBM Các hoạt độngcủa các enzim này trong ca tràng của cá trước đây cao hơn một chút so với cásau này Hiệu suất tăng trưởng có xu hướng cao hơn ở cá cho ăn ExSBM và

FM so với cá chim vây vàng được cho ăn ExSBM + Ext và SBM mặc dùkhông có sự khác biệt đáng kể sau khi cho ăn 3 tuần Những phát hiện này chỉ

ra rằng alcohol chiết xuất từ bột đậu nành sẽ ức chế sự tiết acid mật và men tụytrong cá Tác động tiêu cực này đối với sinh lý tiêu hóa có thể làm giảm sự tăng

trưởng trong thời gian cho ăn dài hạn Axit mật ở mức độ thấp và hoạt động

enzyme tiêu hóa thấp ngăn ngừa sự tiêu hóa và hấp thu chất dinh dưỡng đồngthời làm suy giảm sự tăng trưởng của cá cam sọc với SBM [6]

Năm 2010, Nguyễn và cộng sự thực hiện đề tài “Ảnh hưởng của cácprotein đậu nành khác nhau đối với sự tiêu hóa lipid và tăng trưởng củayellowtail Seriola quinqueradiata” Kết quả cho thấy việc hiệu suất tăng trưởngcủa cá ăn đậu nành đã phân lập protein được tiêu hoá và thanh lọc (DPSPI) tốthơn so với cá ăn đậu tương protein khác và tương đương với cá ăn bằng proteinđậu nành hoặc thức ăn cho cá bột Plasma và mức lipid trong mô của cá cóDPSPI nuôi có xu hướng cao hơn so với cá ăn các protein đậu tương khác.Mức độ lipit trong ruột thấp hơn đáng kể và nồng độ acid mật cao hơn trong cáDPSPI so với cá ăn bằng protein khác Những phát hiện này chỉ ra rằng mộttrong những yếu tố góp phần làm giảm sự tăng trưởng ở cá chim vây vàng vớikhẩu phần ăn SBM là tác động tiêu cực của việc chưa chiết xuất protein đậunành trên mức axit mật và tiêu hóa lipid [9]

Năm 2014, nghiên cứu ảnh hưởng của việc bổ sung taurine đến chế độ

ăn ít bột cá đã được nghiên cứu trên cá chim vây vàng 1 tuổi trong 18 tuần.Những chế độ ăn kiểm này soát có chứa 60% bột cá (FM) trong chế độ ăn(FM60), FM thấp (FM35) và FM thấp với taurine (FM35T) Hiệu suất tăngtrưởng và mức độ thành phần các chất trong huyết tương không bị ảnh hưởngbởi việc không bổ sung taurine Mặt khác, nồng độ taurine trong gan và cơ của

cá ăn FM35T cao hơn đáng kể so với của cá được cho ăn với các chế độ ănkhác, trong khi đó cá được cho ăn bằng FM35 thấp hơn đáng kể so với FM60.Một thử nghiệm về hương vị được tiến hành sau 18 tuần cho ăn thể hiện rằng

không có sự khác biệt về sở thích mùi vị giữa cá FM35T và FM60 trong khi cá

ăn FM35 thích ít hơn so với cá được cho ăn bằng các chế độ ăn khác Nhữngkết quả này cho thấy việc bổ sung taurine không ảnh hưởng đến hiệu suất tăngtrưởng nhưng có thể cải thiện hương vị của cá chim vây vàng 1 tuổi được cho

ăn với chế độ ăn ít FM theo điều kiện [10]

Riche và Williams (2011) đã tiến hành nghiên cứu thay thế bột cá bằng

SBM và protein đậu tương hàm lượng cao cho cá chim Florida Trachinotuscarolinus Trong nghiên cứu này, các khẩu phần thí nghiệm được thiết kế vớimức thay thế protein từ bột cá bằng protein từ đậu tương như sau: 20%, 40%,60%, 80% và 100% Kết quả chỉ ra rằng, sinh trưởng và hiệu quả chuyển hóathức ăn giảm rõ rệt bắt đầu từ mức thay thế 40% Ở mức thay thế 60% trở lên,

cá có hiện tượng không ăn thức ăn Tỷ lệ nuôi sống cũng giảm rõ rệt ở mứcthay thế 60% trở lên bằng protein từ đậu tương Như vậy, ngoài các yếu tốkháng dinh dưỡng có mặt trong đậu tương làm cản trở quá trình tiêu hóa và hấpthu các chất dinh dưỡng, tính ngon miệng của thức ăn chứa protein đậu tươngcũng là một nguyên nhân làm cá chim Florida sinh trưởng kém hơn so với khẩuphần FM [33]

Năm 2012, Quintero và cộng sự đã tiến hành nghiên cứu nhằm đánh giáviệc sử dụng đậu tương giàu protein ở các chim Florida Bột cá được thay thếbằng loại nguyên liệu này và SBM đến mức cao nhất là 50% trong khẩu phần.Kết quả cho thấy cá ăn khẩu phần có mức thay thế 50% bột cá bằng đậu tươnggiàu protein đã đạt được sức sinh trưởng tương đương với cá ăn khẩu phần chỉ

có bột cá Kết quả của nghiên cứu này đã khẳng định rằng đậu tương giàuprotein có giá trị dinh dưỡng cao hơn SBM Điều này cũng gợi ý một giảthuyết, các chất tan trong alcohol cũng có thể là yếu tố kháng dinh dưỡng đốivới cá chim Florida [28]

Năm 2013, thí nghiệm cho ăn được tiến hành để xác định liệu rằng việc

bổ sung lên men và bổ sung taurine của bột đậu nành (SBM) có cải thiện hiệu

suất tăng trưởng và tiêu hóa lipid trên cá chim vây vàng Kết quả cho thấy khảnăng tiêu hóa lipid của chế độ ăn SBM thấp hơn đáng kể so với FM, nhưngSBM lipid tiêu hóa được cải thiện bằng cách bổ sung và lên men taurine Hoạtđộng lipase trong sự tiêu hoá của ruột trước, hàm lượng lipid trong gan và cơbắp, và mật độ acid mật trong túi mật và ruột trước là thấp hơn đáng kể trongchế độ ăn SBM so với FM Mặc dù taurine bổ sung hoặc lên men cải thiện tiêuhóa lipid so với chế độ ăn uống FM, tăng trưởng các thông số chỉ được cảithiện trong thức ăn cho cá FSBM2 + T, chỉ ra rằng ngoài việc thiếu taurine,SBM chứa các yếu tố khác có trách nhiệm cho sự phát triển kém của cá vâyvàng [10]

Bột cá chứa nhiều taurine trong khi SBM có rất ít taurine Taurine là axitamin tự do cần thiết để tổng hợp muối mật ở cá Tuy nhiên, khả năng tổng hợptaurine của hầu hết cá biển ăn thịt đều rất kém [53] Vì thế, việc tổng hợptaurine vào khẩu phần có SBM có thể cải thiện sinh trưởng của cá [43] Trong

nghiên cứu của Wu và cộng sự (2014) trên cá chim vàng vây ngắn Trachinotus ovatus, đậu tương giàu protein đã được bổ sung taurine Các khẩu phần được

thiết lập với 20, 40, 60 and 80% bột cá được thay thế bởi đậu tương giàuprotein có bổ sung taurine Kết quả cho thấy không có sự khác nhau về lượngthu nhận thức ăn giữa các nhóm cá ăn các khẩu phần thí nghiệm Dù mức thaythế 20% không ảnh hưởng đến sinh trưởng của cá Tuy nhiên, ở các tỷ lệ thaythế cao hơn, tăng trọng và hiệu quả sử dụng protein giảm, trong khi hệ sốchuyển hóa thức ăn lại tăng lên cùng với sự tăng lên về tỷ lệ thay thế của đậutương giàu protein đậu tương trong khẩu phần Nghiên cứu cũng chỉ ra rằngviệc bổ sung taurine với hàm lượng 5g/kg khẩu phần giúp giảm tỷ lệ bột cátrong khẩu phần và thay bằng đậu tương giàu protein từ mức 400g/kg khẩuphần xuống mức 240g/kg khẩu phần Như vậy, việc bổ sung taurine giúp tăng

tỷ lệ thay thế bột cá bằng đậu tương giàu protein, tuy nhiên, vẫn không thể thay

thế hoàn toàn bột cá bằng đậu tương giàu protein trong khẩu phần [52]

Mo và cộng sự (2016) đã tiến hành nghiên cứu về khả năng sử dụngSBM kết hợp với enzyme protease trong khẩu phần cho 3 loài cá biển trong đó

có cá chim vây vàng Trachinotus blochii nuôi trong thời gian 340 ngày Mức

sử dụng của SBM trong khẩu phần để thay thế cho bột cá cao nhất là 20% Kếtquả nghiên cứu cho thấy cá ăn khẩu phần có bổ sung SBM và enzyme đã thểhiện sức sinh trưởng tốt Các tác giả cũng khuyến cáo rằng, việc sử dụngenzyme làm tăng tỷ lệ sử dụng của protein thực vật trong khẩu phần, nâng caosức sinh trưởng của cá và giảm các ô nhiễm môi trường nuôi Kết quả củanghiên cứu này giúp đưa ra gợi ý rằng có thể sử dụng các vi sinh vật với cácenzyme của chúng để loại bỏ các chất kháng dinh dưỡng và nâng cao giá trịdinh dưỡng và tỷ lệ sử dụng của SBM trong thức ăn thủy sản [25]

Năm 2016, Koji Murashita và cộng sự làm rõ tác dụng của bột đậu tươngkhông chất béo (SBM) đối với tổng hợp mật và tuần hoàn nội tiết của cá hồivân, ba chế độ dinh dưỡng isonitrogenous và isolipidic; chế độ bột cá (FM),chế độ ăn protein bột đậu nành (SBM) và một acid mật 1% (taurocholate) bổsung chế độ ăn kiêng SBM (C-tau) được chuẩn bị và các tác động vào sinh lýmật đã được kiểm tra Mặt khác, biểu hiện của gen ức chế tổng hợp acid mậtshp-2 là cao hơn ở cá ăn chế độ SBM so với cá ăn khẩu phần FM và C-tau.Hơn nữa, cá ăn chế độ ăn uống theo SBM có tỷ lệ hấp thụ acid mật giảm Chỉ

ra rằng SBM điều chỉnh tổng hợp axit mật trong một thời gian ngắn, trong khiquản lý SBM lâu dài sẽ điều tiết sự tổng hợp axit mật và thu hồi mật thông quatuần hoàn nội tiết Trọng lượng túi mật của cá ăn chế độ C-tau cũng tương tựnhư cá ăn khẩu phần FM, trong khi khả năng hấp thụ acid axit thực tế vẫn bịtrấn áp trong nhóm C-tau Nghiên cứu này góp phần kiến thức tổng quát vềsinh lý mật ở cá ở những điều kiện dinh dưỡng khác nhau và để phát triển thức

ăn nuôi trồng thủy sản bền vững và phù hợp dựa trên SBM [5]

* Tình hình nghiên cứu trong nước:

Năm 2013 Khoa Thủy sản, Trường đại học Cần Thơ đã nghiên cứu đề

tài: “Đánh giá khả năng thay thế bột cá bằng bột đậu nành làm thức ăn cho cá Thát Lát còm” Kết quả trong thức ăn của cá thát lát còm có thể sử dụng 30%

protein bột đậu nành thay thế protein bột cá mà không ảnh hưởng đến tăngtrưởng và hiệu quả sử dụng thức ăn của cá Khi tăng tỉ lệ protein bột đậu nànhtrong thức ăn sẽ làm giảm hàm lượng lipid mà không ảnh hưởng đến hàmlượng protein và tro tích lũy trong cơ thịt của cá [4]

Năm 2010, nghiên cứu được tiến hành để xác định khả năng thay thếprotein bột cá bởi protein bột đậu nành, có bổ sung enzym phytase làm thức ăncho cá lóc bông Nghiệm thức thức ăn đối chứng với nguồn cung cấp protein làbột cá, 4 nghiệm thức còn lại có mức protein bột cá được thay thế bởi proteinbột đậu nành lần lượt là 20%, 30%, 40%, 50% và có bổ sung 0,02%phytase.Với mức thay thế 40% bột đậu nành cho bột cá làm thức ăn cho cá lócbông sự bổ sung phytase, các acid amin thì giảm chi phí thức ăn/1kg cá tăngtrưởng là 4,83% [ 47]

Năm 2013, đại học Nông Lâm tại thành phố Hồ Chí Minh đã nghiên cứudánh giá khả năng sử dụng bột đậu nành trong khẩu phần ăn cho cá Lăng Nha.Kết quả cho thấy có thể thay thế tới 45% bột đầu nành trong chế độ ăn của cá

mà không ảnh hưởng tới sự phát triển và việc sử dụng thức ăn của chúng [3]

Năm 2014, nghiên cứu thay thế đạm bột cá bằng đạm bột đậu nành trên

cá Lóc (Channa striata) được tiến hành nhằm xác định khả năng thay thế thíchhợp đạm bột cá bằng đạm bột đậu nành từ các nguồn đậu nành khác nhau Kếtquả thí nghiệm cho thấy tỷ lệ sống của cá ở các nghiệm thức thức ăn khác biệtkhông đáng kể, có thể thay thế protein của bột cá bằng bột đậu nành đậm đặcSPC ở mức 40% trong khẩu phần ăn cho cá lóc (Channa striata) [48]

Chương 2- ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Đối tượng, thời gian, địa điểm và phương pháp nghiên cứu

2.1.1 Đối tượng nghiên cứu

Sử dụng khô đậu tương đã loại bỏ kháng dinh dưỡng tan trong alcohol

và nghiên cứu ảnh hưởng của nó trên cá chim trắng Colossoma brachypomum.

2.1.2 Thời gian nghiên cứu

Nghiên cứu được tiến hành từ 10/2017 đến 10/2018

2.1.3 Địa điểm nghiên cứu

Khoa Sinh Học trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội và viện Nghiên cứuNuôi Trồng Thuỷ sản I

2.1.4 Phương pháp nghiên cứu

+ Sử dung alcohol để tạo nguyên liệu dịch chiết và khô dầu đậu tương:

Phương pháp tạo nguyên liệu dịch chiết SBM bằng alcohol được mô tảtheo phương pháp của Nguyen và cộng sự, 2016 [7]

Đầu tiên, SBM được chiết bằng alcohol có nồng độ 70%, 80% và 90%theo thứ tự lần lượt Sau đó hỗn hợp SBM và alcohol được lắc đều với tốc độ

70 vòng/phút trong vòng 15 phút, 3 tiếng lắc mẫu 1 lần Tiếp đó, để hỗn hợpSBM và alcohol ở nhiệt độ phòng trong 24 tiếng Sau 24h mẫu thu được 2 phânlớp, thu phần dịch nổi alcohol phía trên Phần bã SBM còn lại tiếp tục được lặplại lần lượt với alcohol ở nồng độ 80⁰ và 90⁰ Các dịch chiết alcohol được gộplại theo từng nồng độ tương ứng Phần dịch chiết được lọc ra khỏi phần cặnbằng tay và được sử dụng khăn vải Phần dịch chiết và phần cặn được làm bayhơi alcohol và làm khô để tạo các nguyên liệu cần thiết cho việc sản xuất thứcăn

Tiếp theo, phần cặn SBM sau khi chiết với alcohol 90⁰ được sấy ở 1000Ctrong 24h và để nguội trong vòng 30p Cuối cùng mang mẫu xay lại cho mịnđều trước khi làm thức ăn và bảo quản trong nhiệt độ -300C

+ Chuẩn bị chế độ ăn:

Trong thí nghiệm này, sử dụng 4 khẩu phần khác nhau, bao gồm: Khẩuphần bột cá FM, khẩu phần SBM, khẩu phần chiết alcohol ExtSBM và khẩuphần chiết alcohol bổ sung thêm chất chiết ExtSBM + Ext

Methionine và taurine được bổ sung vào khẩu phần sử dụng SBM và đảmbảo đầy đủ hàm lượng các chất dinh dưỡng để đáp ứng nhu cầu cho cá chimtrắng Thành phần chi tiết của khẩu phần ăn được ghi chi tiết trong bảng 1

Đầu tiên, để tạo được viên thức ăn thành phần các loại bột được cânđúng theo tỉ lệ và được trộn kỹ với nhau Sau đó, dầu cá và nước được thêmvào và trộn đều cho đến khi thấy bột có độ cứng vừa phải Cuối cùng hỗn hợpbột được tạo thành các viên nhỏ bằng cách sử dụng một máy nghiền viên thức

ăn trong phòng thí nghiệm và được lưu trữ ở -30 ℃ cho đến khi sử dụng

Bảng 1.: Khẩu phần thức ăn trong các chế độ ăn thí nghiệm

Crude Protein (DM basis)

From Defatted commercial SBM 0.00 17.3 17.3 17.3

Corn gluten meal 5.20 3.12 3.12 3.12