PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI

PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI

PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT

SINH KHỐI MAGNETOSPIRILLUM GRYPHISWALDENSE MSR-1

NHÓM 3:

Nguyễn Thị Bích

Lê Nguyễn Khánh Duy

Lê Minh Hải Nguyễn Minh Tuấn

• Giới

th iệ u

II

• Nguyê

n liệ

u, phươ

ng pháp tiế

n hà nh

• Quy trì

nh lên

me

n

III

• Kế

t luận

Sự hình thành magnetosome

 Nồng độ oxygen: điều kiện nghèo oxygen cung cấp không khí chứa 1% O2 để

duy trì điều kiện vi hiếu khí

 Khử nitrogen các con đường sinh hóa

Năng suất được quyết định bởi các yếu tố như thành phần môi trường, phương pháp feed, chế độ thủy động trong bioreactor và thành phần oxy khả dụng

Nguyên liệu Phương pháp tiến hành

Chủng vsv

Magnetospirillum gryphiswaldense

(MSR-1)

Phân tách tế bào theo dòng chảy:

Tạo dịch treo

Mẫu (PBS)

BD Accuri C6

Nhuộm

Thu nhận dữ liệu

Ánh sáng (488 nm) Tán xạ xuôi Tán xạ ngang

Evolution 300 UV-vis

(565 nm)

Đo các phản ứng từ tính (Cmag)

Khảo nghiệm nitrate và nitrite

Khảo nghiệm acid lactic

L-lactic acid (Megazyme, Ireland)

Nồng độ sắt

Phân tích ở 248.3 nm bằng một đèn cathode rỗng nguyên tố sắt (SMI-LabHut Ltd.) hoạt động

ở cường độ dòng 30 mA với ngọn lửa acetylene/không khí (0.7 L.phút-1 acetylene và 4.0 L.phút-1 không khí)

Quan sát dưới kính hiển vi điện tử truyền suốt

glutaraldehyde 2.5%

-potassium phosphate 0.1 M

-1 giờ

Rửa cồn

II.1 Quy trình lên men.

 Thành phần magnetosome của tế bào được xác định bằng phương pháp phân tích quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS)

 Đầu tiên chế độ cấp khí (0 – 100 ml.Phút-1) và các tốc độ khuấy khác nhau

(100-500 rpm) Lưu lượng khí trên 10 ml.Phút-1 và tốc độ khuấy trên 300 rpm ở đầu quá trình lên men

Cung cấp oxygen theo 2 giai đoạn : tăng sinh khối , hình thành

 Hình thanh magetosome: MSR-1 được nuôi cấy trong điều kiện khí oxygen hạn chế (pO2 ≤ 0.4%) ,chế độ điều chỉnh pH tự động trong 54 giờ tới khi khoảng 4.3 Sau đó feed sắt chloride tăng Fe3+ lên 414 mg.L-14 và Mineral Elixir 1.4mg Fe2+.L-1

 Sau cùng ~6.4, nồng độ sắt nội bào tang từ 3.1-6.1 mg.G-1 DCW sau tổng thời gian lên men là 71 giờ

II.2 Tối ưu hóa lượng acid lactic.

 Nồng độ acid lactic lần lượt là 50, 100 hoặc 200 g.L-1 Độ pH của dung dịch feed lần lượt là 3.65, 3.05 và 2.65 Hệ quả là, dịch feed có tính acid cao nhất cần dung tích ít nhất để duy trì giá trị pH (7.0 ± 0.05)

 Giá trị OD595 cao nhất ở thí nghiệm với dung dịch feed có nồng độ acid lactic 50 g.L-1

Độ từ tính tế bào (Cmag)

 Lượng acid lactic trong dung dịch feed tương quan nghịch so với lượng sinh khối sau cùng

Nồng độ sinh khối cao nhất thu được ở thí nghiệm với thành phần feed 50 g.L-1 acid lactic, tuy nhiên hàm lượng sắt và Cmag cao nhất dụng dịch feed chứa 200 g.L-1 acid lactic.